다발성골수종 환자에서 간기세포 Fluorescence in situ Hybridization을 이용한 IgH과 Cyclin D1 재배열 검색 document_id A220517034967

t은 다발성 골수종 환자에서 흔히 관찰되는 염색체 이상 중 하나이다. 악성형질세포는 분열지수가 낮아 염색체검사를 시행하는데 어려움이 있어 t의 임상적 의에 대한 연구가 충분히 이루어지지 못했다. 본 연구는 다발성골수종환자에서 IgH과 CCND1 소식자를 이용한 간기세포 FISH를 시행하여 재배열 빈도와 혈액 검사 및 임상 소견의 특징을 알아보고, 염색체 결과와 비교하여 간기세포 FISH의 유용성을 조사하고자하였다. 다발성골수종으로 진단되었던 23명, 재발되었던 8명, 치료중 질병이 지속되었던 5명 환자를 포함하여 총 36명 환자를 대상으로 하였다. 간기세포 FISH는 골수천자액 검체로 IGH CCND1 dual color, dual fusion translocation probe를이용하여 시행하였다. 다발성골수종 환자에서 간기세포 FISH를 이용한 IgH과 cyclin D1 유전자 재배열의 빈도는 19%였다. 염색체 검사에서 중기세포를 얻지 못하였던 1명과 정상핵형으로 관찰되었던 1명은 간기세포 FISH로 재배열이 관찰되었다. 재배열이 관찰되었던 환자군은 재배열이 관찰되지 않았던 환자군보다 lambda 형의빈도가 더 높았다. 그외 임상 소견과 혈액 검사 결과는 두군간에 유의한 차이가 없었다. 염색체 11q13에 위치하는 cyclin D1 이상으로 인해 정상적으로 세포주기를 조절하지 못하면 악성세포로 전환된다. CyclinD1 이상은 t 염색체 이상에 의해 cyclin D1이 과발현 되거나 cyclin D1 유전자 증폭에 의해서도 초래될 수 있다. 다발성골수종에서 cyclin D1 이상은 검출했던 방법에 따라 빈도가 다양하게 보고되어 있다. 면역조직화학법으로 검출시 20 30%, Northern blot을 이용한 연구에서는 35%, 중합효소연쇄반응법으로는 35 50% 빈도로 보고하였다. 염색체 검사에서 t이 관찰되는 빈도는 전체 다발성골수종 환자 중 5 10%로 보고하였다. 본 연구에서는 22명에서 염색체 검사를 시행하였는데, cyclin D 이상과 연관이 있는 t 또는 trisomy 11은 9%에서 관찰되어 다른 보고의 빈도와 유사하였다. 염색체 검사가 다른 검사 방법보다 상대적으로 빈도가 낮은 이유는 악성형질세포의 분열지수가 낮아 관찰되었던 중기세포가 정상 세포인 경우가 많았기 때문으로 생각된다. 또한 염색체 검사와 면역조직화학법을 이용한 cyclin D1 이상 검출에 대한 연구에서, t 염색체 이상이있었던 환자는 모두, trisomy 11 염색체 이상이 있었던 환자는 15%에서만 cyclin D1 이상이 관찰되었고, 11번 염색체 이상이 없었던 환자중에서도 5%는 cyclin D1 이상이 있었다고 하였다. 이와같이 염색체 검사는 t 또는 trisomy 11 염색체 이상은 검출할 수 있으나 그외 다른 기전으로 cyclin D1 이상이 초래된 것은 검출하지 못하여 다른 검사 방법보다 빈도가 낮았던 것으로 생각된다. 간기세포 FISH를 시행한 본 연구에서 IgH와 cyclin D1 재배열은 19% 환자에서 관찰되었으며, 이는 FISH를 이용한 다른 연구에서 11 23% 빈도로 보고한 것과 비슷한 결과이다. 이와같이 세포의 분열능력과 무관하게 cyclin D1 이상을 검출할수 있는 간기세포 FISH가 중기세포를 관찰하는 염색체 검사에서관찰될 수 있는 빈도보다 약간 높았다. 본 연구대상 중 염색체 검사로 정상 핵형이었던 환자 1명과 중기세포를 관찰할 수 없었던 1명 환자에서도 간기세포 FISH로 IgH와 cyclin D1 재배열이 관찰되었다. 다른 연구에서도 염색체 검사로 정상 핵형이었던 환자중 65%에서 FISH로 14q32이상을 검출하였고, 특히 정상 핵형이었던 5명 중 4명에서 FISH로 t 이상이 확인되어 FISH의 유용성을 강조하였다. 또한 본 연구에서 CCND1의 신호가 3개 관찰되어 cyclin D1유전자 증폭으로 생각되었던 3명 환자가 있었는데, 그 중1명은 trisomy 11이 관찰되었지만 다른 1명은 정상핵형이었다. 본 연구결과와 다른 연구결과를 종합할 때 FISH는 정상핵형이나 중기세포을 얻지 못한 환자에서 cyclin D1 이상과 연관있는 염색체 이상을 검출하는데 유용하다고 생각한다. Cyclin D1 이상이 다발성골수종의 발생과 진행에 있어 어떤 역할을 할 것인지에 대해 연구가 되어 왔다. 문헌을 살펴보면t 이상은 진단 당시 보다 재발 상태에서 더 흔하게 관찰되었고, 한 환자에서 진단시에는 관찰되지 않았지만 재발시 t가 관찰되었다고 보고하였다. 다른 보고에서도 다발성골수종보다 형질세포백혈병에서 재배열이 더 흔하게 관찰되었고, 병기가 진행된 환자에서 재배열의 빈도가 더 높아 t 이상은 다발성골수종의 진행과 연관성이 있다고 주장하였다. 그러나 cyclin D1 과발현의 빈도가 진단시나 재발시에 차이가 없었던 보고도 있다. 본 연구에서는 재발시와 진단시 재배열이 관찰되었던 빈도에 유의한 차이는 없었다. 또한 MGUS와 다발성골수종 환자에서 t가 관찰되었던 빈도에 차이가 없어, cyclin D1 이상은 질병 초기 발생에 관여하고 질병의 진행과 반드시 연관이 있는 것은 아니라고 주장한 연구도 있다. 이와같이 다발성골수종의 발생과 진행에 있어 cyclin D1 이상의 의미는 서로 상반된 주장들이 있어 앞으로 계속 연구가 되어야 할 것이다. 또한 예후에 있어서도 cyclin D1 이상이 있는 환자의 경우 생존율이 낮아 불량한 예후 인자로 생각했던 보고와 생존율에 차이가 없었던 보고가 있었다. 본 연구에서는 환자마다 치료 방법이 달랐고 추적관찰 기간이 짧아 생존율을 비교할 수 없었지만, 경쇄 종류의 분포를 제외하고는 예후와 관련 있다고 알려져 있는 여러 혈액 검사 소견이 두 군간에 차이가 없었다. 이와 같이 연구자마다 cyclin D1 이상과불량한 예후인자와의 연관성에 대해 다른 결론을 내린 것은 cyclin D1 이상을 검출했던 연구 방법이 달랐던 원인도 생각해볼 수 있다. Northern blot, 중합효소연쇄반응, 면역조직화합법으로 cyclin D1 이상을 연구했던 문헌에서는 예후와 상관없었던 것으로 보고하였다. FISH로 연구했던 문헌 중에서는 예후와 관계없다고 한 보고도 있지만 예후와 밀접한연관이 있었다고 보고한 연구자도 있다. Hoechtlen Vollnar등은 특히 다발성골수종 환자 중 38%에서 cyclin D1 증폭을FISH로 확인하였으며, 2 microglobulin과 함께 예후를 예측할수 있는 유용한 지표라고 주장하였다. 반면, 염색체 검사로 t가 검출되었던 환자를 대상으로 한 연구에서는 모두 불량한 예후인자로써 작용한 것으로 보고하였다. 염색체 검사에서 비정상적인 중기세포를 관찰할 수 있다는 것은, 일반적으로 분열능이 낮은 형질세포와는 달리 클론의 증식력이 높다는 의미이므로 불량한 예후인자와 더 밀접한 관계가 있을 수 있다. 어쨌든 cyclin D1 이상과 예후인자로써의 의미를 밝히기 위해서는 더 많은 환자를 대상으로 동일한 검사 방법으로 cyclin D1 이상을 검출하여 생존율을 비교하는 연구가 진행되어야 할 것이다. 일반적으로 다발성골수종 환자에서는 kappa형의 빈도가 더 높은데, 본 연구에서도 IgH과 cyclin D1 유전자 재배열이 있었던 환자는 lambda형의 빈도가 더 높았다. 한 연구에서도 재배열이 있었던 환자는 labmda형이 더 흔한 것으로 보고하였지만, 재배열 유무와 경쇄 종류의 분포와는 무관한 것으로 보고한 상반된 연구도 있었다. 결론적으로 IgH와 cyclin D1 유전자 재배열은 주로 lambda형 다발성골수종과 연관성이 있었으며, 간기세포 FISH는 염색체 검사에서 중기세포를 관찰하지 못했거나 정상핵형으로 관찰되었던 환자에서 cyclin D1 이상과 연관있는 염색체 이상 유무를 확인하는데 도움이 되었다. IgH와 cyclin D1 유전자 재배열은 주로 lambda형 다발성골수종과 연관이 있었으며, 간기세포 FISH는 염색체 검사에서 중기세포를 관찰하지 못했거나 정상핵형으로 관찰되었던 환자에서 cyclin D1 이상과 연관있는 염색체 이상 유무를 확인하는데 도움이 되었다.