기능성 식품의 제제화를 위한 포스파티딜세린이 풍부한우유 분획물 document_id A220623023143

인지질 (PL)은 생물계에서 매우 일반적인 물질이다. 이는 식물 및 동물 모두에 있어서 대부분의 세포의 막을 구성한다. 이들 지질은 각종 구획 사이의 장벽으로서 기능하며, 수용체, 효소 및 운반 단백질에 대한 적절한 환경을 제공하는 이중층 구조로 조직된다. 이들은 또한 세포 간의 소통을 위한 전달 물질로서 기능한다. 뇌의 대부분은 인지질로 이루어진다. 인간 뇌 인지질 풀의 15%는 포스파티딜세린 (PS)으로 이루어진다. 뇌가 노화됨에 따라, 물질이 소실되고 콜레스테롤과 같은 불활성 물질로 대체된다. PS는 최근 개선된 인지 수행, 기억 손실의 저지를 위한 영양양학 (nutraceutical) 식품의 활성 성분으로서 및 스트레스 완화제로서 큰 관심을 받아 왔다. 문헌은 논문 [Benton 등, "The influence of Phosphatidylserine Supplementation on Mood and Heart Rate when Faced with an Acute Stressor", Nutritional Neuroscience, Vol. 4 pp 169-178]으로 대표된다. PS 섭취가 스트레스 및 인지 수행에 미치는 유의한 긍정적 결과를 나타내는 실험이 수년간 수행되어 왔으며, 예를 들어, 문헌 [Arjan Blokland 등, "Cognition-Enhancing Properties of Subchronic Phosphatidylserine (PS) Treatment in Middle-Aged Rats: Comparison of Bovine Cortex PS With Egg PS and Soybean PS" in Nutrition Vol. 15, No. 10, 1999]을 참고한다. PS는 영양약학제품으로서 사용될 수 있으며, 건강에 유익한 성분의 농축물을 함유하는 각종 식품 제제, 음료, 정제 및 상이한 종류의 바에 도입될 수 있다. 역사적으로, 소의 뇌는 PS의 단리를 위한 원료로서 사용되어 왔으나; 광우병 (BSE)의 발병 이후, 상기 물질은 명백한 이유로 인하여 더이상 사용되지 않는다. 지난 수년 동안, 대두 레시틴으로부터 유도된 반-합성 변이체가 개발되어 왔고, 루카스 메이어 게엠베하 (Lucas Meyer GmbH) / 데구사 (Degussa), 엔자이모텍 (Enzymotec), 케미 (Chemi) 및 리포겐 (Lipogen)과 같은 회사에 의해 시판되어 왔다. 본원에서 WO 2005/027822를 참고한다. 모든 언급된 PS 제조업체에 의해 사용되는 주요 절차는 우리가 아는 한 기질 중 인지질의 헤드기 (head group)를 교환하는 것, 예를 들어, 반응이 일어나게 하는 활성 효소로서의 포시포리파제 D를 이용하여 포스파티딜 콜린의 콜린기를 세린으로 교환하는 것이다. 상기 절차에서 칼슘을 이용하여 효소를 활성화시킬 필요성이 존재하므로, PS는 종종 거의 분산되지 않는 Ca 염으로 끝난다. 화합물의 순도는 20 ∼ 90%에서 변할 수 있다. 헤드기 교환 절차와 관련된 또다른 문제점은 포스포리파제 D 효소 활성의 작은 잔기이고, 이는 수계 액체 시스템 내에서 PS의 불안정성을 초래한다. 유도된 순수 PL 분획물에 있어서의 추가의 주요 문제점은 대체적으로 수계 시스템 내에서 매우 불쾌한 맛의 발생이다. 상기 결점으로 인하여, PS는 대부분 오일에 용해된 캡슐형으로 시판된다. 상기 기재한 이유로 인하여, 물에 분산된 PS 음료 제제는 아직까지 성공적이지 못했다. 시판과 관련된 또다른 문제점은 PS의 유래이다. 헤드기가 교환된 PS는 천연 유래가 아니다. 이는 사실상 공중 보건 당국에 의하여 부과된, 인간 식품에서의 사용에 있어서 모든 제한을 갖는 반-합성 물질이다. 상기 기재한 문제점을 해결하기 위하여, PS의 새로운 천연 공급원을 찾아 왔다. 우유는 유지방구막 (MFGM) 중 인지질을 함유한다. 상기 막은 특정 단백질, 소위 MFGM 단백질과 함께 정렬된 이중층 구조로 조직된다. 젖통의 골지 및 지방구로부터 벗겨진 MFGM 물질로부터 유래한 특정 MFGM 단편이 탈지유 중 존재한다. 용매 추출 절차를 수행한 후, 인지질의 조성은 바람직하게는 P31 NMR (독일 소재 스펙트랄 서비스 게엠베하 (Spectral Service GmbH))에 의해 측정될 수 있다. 우유의 PL 패턴의 전형적 조성은 하기와 같다 (P31 NMR 방법): 몰 백분율 포스파티딜콜린 (PC) 27 포스파티딜이노시톨 (PI) 7 포스파티딜세린 (PS) 13 스핑고미엘린 (SPH) 25 포스파티딜에탄올아민 (PE) 27 기타 1 우유의 PL 조성은 PS 및 스핑고미엘린 (SPH)의 고 함량으로 인하여 천연에서 유일한 것이다. SPH는 또한 우유 중 생리활성의 극성 지질이다. 이는 콜레스테롤의 섭취를 감소시키고, 또한 결장 중 항종양 효과를 갖는 것으로 생각된다. 활성 항발암 효과는 장관 중 SPH의 분해 산물, 즉 세라미드로 거슬러 올라간다. 본원에서 문헌 [Vesper 등 (1999) Sphingolipids in food and the emerging importance of sphingolipids to nutrition, J. Nutr. 129: p.1239-1250]을 언급한다. 전유는 PS의 불충분한 공급원이다. 이는 ℓ당 오로지 약 27 ㎎의 PS를 함유한다. 탈지유는 ℓ당 약 10 ㎎을 함유한다. 크림을 휘저음으로부터 발생하는 버터밀크는 ℓ당 약 130 ㎎의 PS를 함유한다. 버터오일로부터의 버터밀크는 PS의 훨씬 더 좋은 공급원이며, 이는 ℓ당 약 250 ㎎의 PS를 함유한다. 정의 본 명세서에 사용된 하기 용어는 하기 의미를 갖는다: 영양약학제품은 식품 또는 식품의 일부이고 의료적 이점 및/또는 건강에 대한 이점, 예컨대 질환의 예방 및 치료를 제공하는 임의의 물질로서 정의된다. 버터밀크는 버터 또는 버터오일의 제조 이후의 유청상 (serum phase)으로서 정의된다. PL은 인지질의 약어이다. PS는 포스파티일세린의 약어이다. SPH는 스핑고미엘린의 약어이다. MFGM은 유지방구막의 약어이다. 본 발명에 사용된 PL 농축물은 우유 유래의 인지질 농축물이다. P31 NMR 검출기를 갖는 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)는 건조 샘플의 용매 추출 이후 PS를 비롯한 인지질의 조성을 측정하는 진보된 방법이다. 실험실 환경에서 정신생리학적 스트레스 반응을 조사하는 도구인 트리어 사회적 스트레스 시험 모델 (Trier Social Stress Test model, TSST)은 문헌 [Kirschbaum, C, Pirke, KM, Hellhammer, DH, The "Trier Social Stress Test", Neurophysiobiology, 1993, 28, p.76-81]에 의해 기재된 바와 같다. DMV 인터내셔날사제 Esprion 300은 약 30%의 단백질을 갖는 유장 단백질 농축물이다.