항 ＣＤ４０ 항체의 변이체 document_id A220623042780

1. CD40 CD40은 분자량 50 kDa의 세포막 표면에 존재하는 항원이고, B 세포, 수상 세포(dendritic cell; DC), 어떤 종류의 암 세포, 또한 흉선 상피 세포에 발현되고 있다. CD40은 B 세포나 DC의 증식, 분화에 중요한 기능을 하고 있는 것으로 알려져 있다. CD40은 인간 B 세포 표면에 발현하는 항원으로서 동정되고(E. A. Clark et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83: 4494, 1986, I. Stamenkovic et. al., EMBO J, 8:1403, 1989), 아미노산 서열의 상동성으로부터, CD40은 저친화성 NGF 수용체나 TNF 수용체, CD27, OX40, CD30 등이 속해 있는 TNF 수용체 패밀리 중 하나의 멤버로서 생각 되고 있다. 인간 및 마우스의 CD40에 대한 리간드(CD40L)는, 최근 유전자 클로닝되어 II형 막 단백질인 것 및 활성화된 CD40+T 세포에 발현되고 있는 것을 알 수 있었다. CD40L은 강력한 활성화 시그널을 인간 및 마우스의 B 세포에 도입하는 것도 알았다. 또한, 수상 세포에는 B 세포보다 많은 CD40 발현이 확인되고 있고, 중요한 역할을 담당하고 있는 것이 분명해졌다. CD40이 CD40L과 결합하면, 항원 제시 세포(APC)의 활성화, 즉 CD80(B7-1)이나 CD86(B7-2) 등의 보조 자극 분자의 발현, 또는 IL-I2의 생산이 증강된다(Caux, C., et al.: Activation of human dendritic cells through CD40 cross-linking. J. Exp. Med., 180:1263, 1994), (Shu, U., et al.: Activated T cells induce interleukin-12 production by monocyte via CD40-CD40 ligand interaction. Eur. J. Immunol., 25: 1125. 1995). 수상 세포는 강한 항원 제시능을 가지고, 강력한 핼퍼 T(Th) 세포 활성화능을 가지고 있다. 또한, 나이브(naive) Th 세포의 Th1 또는 Th2 세포로의 분화를 수상 세포가 제어하고 있다고 생각되었다. 미엘로이드계 수상 세포인 말초혈 단구를 GM-CSF 및 IL-4와 함께 배양하여 CD40L에 의해 성숙시킨 수상 세포(DC1)은 시험관 내에서 IL-12 생산능을 가지고, 이계(異系) 나이브 Th 세포를 자극 활성화하여, IFNγ 생산 T 세포를 유도한다(즉 Th1로의 분화를 촉진시킴). 이 작용은 항 IL-12 항체에 의해 저해되기 때문에, IL-12를 통한 반응이라고 생각된다. 한편 림프 조직 T 영역이나, 말초혈에 존재하는 형질세포 T 세포를 IL-3, CD40 리간드와 동시에 배양한 림프구계수상 세포(DC2)는, IL-12 생산능은 가지지 않고, 또한 이계 나이브 Th 세포를 자극 활성화하여, IL-4 생산 T 세포를 유도하고, Th2로의 분화를 촉진시키는 것이 나타났다. Th1 세포는 세포성 면역의 활성화에 관계되고, Th2 세포는 액성 면역능을 높이면서 동시에 세포성 면역능의 억제에 관여한다고 생각되었다. Th1 세포의 도움으로 활성화된 세포 상해성 T 세포(CTL)는 세포질 내에서 증식하는 병원체(많은 바이러스, 리스테리아균, 결핵균 및 톡소플라즈마 원충 등)나 종양 세포를 제거할 수 있다. 막 표면에 발현한 CD40을 인식하는 항 CD40 모노클로날 항체가, B 세포에 대하여 각종 생물 활성을 나타내는 것으로 개시되어 왔다. 항 CD40 모노클로날 항체는, CD40과 CD40L과의 상호 작용에 대하여 아고니스틱인 것과 안타고니스틱인 것으로 크게 구별된다. 2. 아고니스틱 항체 아고니스틱 항체의 작용으로서, B 세포의 활성화가 알려져 있다. 예를 들면, 항 CD40 항체가 세포 접착을 유도하고(Barrett et al., J. Immunol 146: 1722, 1991; Gordon et al., J. Immunol. 140: 1425, 1988), 세포의 크기를 증진시키며(Gordon et al. J. Immunol. 140: 1425, 1988; Valle et al., Eur. J. Immunol. 19: 1463, 1989), 항 IgM 항체, 항 CD20 항체 또는 포르볼 에스테르만으로 활성화된 B 세포의 분열을 유도하고(Clark and Ledbetter, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83: 4494, 1986; Gordon et al., LEUCOCYTE TYPING III. A. J. McMicheal ed. 0xford University Press. 0xford, p.426: Paulie et al., J. Immunol. 142: 590, 1989), IL4 존재하에서 B 세포의 분열을 유도하며(Valle et al., Eur. J. Immunol. 19: 1463, 1989; Gordon et al., Eur. J. Immunol. 17: 1535, 1987), IL-4 자극, T 세포 제거 배양 세포의 IgE(Jabara et al, J. Exp. Med. 172: 1861, 1990: Gascan et al, J. Immunol. 147: 8, 1991), IgG, IgM(Gascan et al., J. Immunol, 147: 8, 1991)의 발현을 유도하고, IL-4에 의한 B 세포로부터의 가용성 CD23/FceRII의 분비와(Gordon and Guy, Immunol. Today 8:339, 1987; Cairns et al., Eur. J. Immunol. 18: 349, 1988) 세포 상의 발현 증강(Challa A, Allergy, 54: 576, 1999)을 수행하며, IL-6의 생산을 촉진시키는(Clark and Shu, J. Immunol. 145: 1400, 1990) 것이 보고되어 있다. 또한, CDw32+ 접착 세포 존재하에서 IL-4 및 항 CD40 항체를 첨가함으로써, 인간 초대 배양 B 세포로부터 B 세포 클론을 수립하는 것이나(Bancherau et al. Science 241:70, 1991), 배(胚) 중심의 중심 세포의 아포토시스가, 항원 수용체의 작용에 불문하고, CD40을 통해 저해되는 것(Liu et al., Nature 342: 929, 1989)이 보고되어 있다. 이상과 같이 CD40은 인간 B 세포 표면에 발현하는 항원으로서 동정되었기 때문에, 단리된 항체의 대부분은 주로 인간 B 세포에 대한 증식 분화 유도 기능, 암 세포에 있어서의 세포사 유도 활성을 지표로 평가되어 왔다(Katira, A. et. al., LEUKOCYTE TYPING V. S. F. Schlossossman, et. al. eds., p.547. 0xford University Press. 0xford, W. C. Flansow et. al., LEUKOCYTE TYPING V. S. F. Schlossossman, et. al. eds. p.555. 0xford University Press. Oxford, J. D. Pound et. al., International Immunology, 11: 11, 1999). 항 CD40 항체가 DC를 성숙시키는 것이 개시되었다(Z. H, Zhou et, al., Hybridoma, 18:471 1999). 또한, 항원 특이적 CD8T 세포 프라이밍에 있어서의 CD4T 세포의 역할은, CD40-CD40L 시그널링을 통한 DC의 활성화에 있는 것이 보고되고, 항 CD40 모노클로날 항체(mAb)에 의해 수상 세포(DC)의 활성화에 있어서의 CD4 핼퍼 T 세포의 역할을 대체할 수 있는 것이 개시되었다(Shoenbergerv S. P., et. al.: T-cell help for cytotoxic T lymphocytes is mediated by CD40-CD40L interactions. Nature, 480, 1998). 또한, 마우스에 있어서 항 CD40 항체의 투여에 의해 CD40을 발현하는 종양 세포뿐만 아니라 비발현 종양 세포로부터도 생체를 방어 가능한 것이 개시되었다(French, R. R., et. al.: CD40 antibody evokes a cytotoxic T-cell response that eradicates lymphoma and bypasses T-cell help. Nature Medicine, 5, 1999). 상술한 기능에 기초하여, 아고니스틱 항 CD40 항체는 세균, 바이러스 등의 감염증 치료, 암 치료 등에 사용할 수 있는 것으로 생각되었다. WO02/088186에는 우수한 아고니스틱 활성을 갖는 항 CD40 항체가 기재되어 있다. 상기 아고니스틱 항체의 대표예로서 KM341-1-19 항체 및 2105 항체를 들 수 있다. KM341-1-19 항체를 생산하는 하이브리도마 KM341-1-19는 2001년 9월 27일 2105 항체를 생산하는 하이브리도마 2105는 2002년 4월 17일에, 독립 행정 법인 산업 기술 종합 연구소 특허 생물 기탁 센터(이바라기껭 쯔꾸바시 히가시 1쪼메 1반지 1주오 다이 6)에 부다페스트 조약에 기초하여 국제 기탁되어 있다. 수탁 번호는 FERM BP-7759(KM341-1-19) 및 FERM BP-8024(2105)이다. 3. 안타고니스틱 항체 한편, 상기한 바와 같이, CD40가 면역 반응에 있어서 중요한 역할을 담당하고 있기 때문에, CD40과 그의 리간드의 결합을 저해함으로써, 장기 이식시의 면역 억제나 자기 면역 질환의 치료약을 개발할 수 있다고 기대된다. Sawada-Hase 등은, 클론병 환자의 말초혈 중의 단구에서는 CD40을 강하게 발현하는 세포의 비율이 상승하는 것을 보고하였다. 그러나, CD40과 그의 리간드의 결합을 저해하는 항체에 대해서는, 아직 잘 알려져 있지 않다. 그와 같은 저해성 항체는, 예를 들면 CD40의 기능 해석이나, CD40의 활성화가 필요한 질환의 치료에 유효할 가능성이 있다. 또한, CD40 리간드에 대한 저해 항체도, CD40과 CD40 리간드와의 결합이 관여하는 질환약으로서 유효한 가능성이 나타나 있다. 그러나, CD40L은 활성화된 혈소판에 발현한다는 보고(V. Henn et. al., Nature 391: 591, 1998)가 있기 때문에, 항 CD40L 항체를 치료약으로서 사용한 경우, 혈전을 야기할 위험성이 존재하는 것이 보고되어 있다(T. Kawai et. al., Nat. Medi. 6: 114, 2000). 이러한 관점에서, CD40과 그의 리간드의 결합을 저해하는 항체 치료약으로서는, 항 CD40L 항체보다 오히려 CD40에 대한 항체의 경우가 안전성이 우수하다고 기대할 수 있다. 항 CD40 항체로서는 CD40L의 CD40에의 결합을 억제하고, 또한 항체 자체가 CD4D를 활성화하지 않는 것이 필요하다. 상술한 기능에 기초하여, 안타고니스틱 항 CD40 항체는, 자기 면역 질환의 치료, 장기, 골수 등의 이식에 있어서의 거절 반응의 억제에 사용할 수 있을 것으로 생각된다. WO02/088186에는 우수한 안타고니스틱 활성을 갖는 항 CD40 항체가 기재되어 있다. 상기 안타고니스틱 항체의 대표예로서 4D11 항체를 들 수 있다. 4D11 항체를 생산하는 하이브리도마 4D11은 2001년 9월 27일에, 독립 행정 법인 산업 기술 종합 연구소 특허 생물 기탁 센터(이바라기껭 쯔꾸바시 히가시 1쪼메 1반지 1주오 다이 6)에 부다페스트 조약에 기초하여 국제 기탁되어 있다. 수탁 번호는 FERM BP-7758이다. 특허 문헌 1: W002/088186호 공보