Ｍｒａｐ 유전자의 발현을 증진시켜 지방분해를 촉진하는후보물질을 검색하기 위한 키트 및 방법 document_id A220623049877

인체의 항상성(homeostasis)에 중요한 역할을 하는 핵 수용체(nuclear receptor)로서 고아 핵 수용체(orphan nuclear receptor)가 알려져 있으며, 이러한 고아 핵 수용체로는 퍼록시좀 증식인자-활성화 수용체(peroxisome proliferator-activated receptor, PPAR), 파나소이드 엑스 수용체(farnesoid X receptor, FXR), 라이버 엑스 수용체 (liver X receptor, LXR), 프레그네인 엑스 수용체(pregnane X receptor, PXR), 기본 안드로스테인 수용체 (constitutive androstane receptor, CAR) 등이 보고되고 있다. 고아 핵 수용체는 레티노이드 엑스 수용체(retinoid X receptor, RXR)와 이종이합체(heterodimer)를 이루어 세포 내에서 작용한다 (Brun 등, J Endocrinol., 155(2): 217-218 (1997)). 에너지 항상성은 흡수한 에너지와 소비된 에너지 사이의 정밀한 균형을 나타낸다. 그러나 과도한 에너지의 섭취로 이러한 균형이 깨지게 되면 비만이나 동맥경화, 제2형 당뇨병과 같은 대사질환을 일으킨다. 지난 수년간 고아 수용체(orphan receptor)의 일종인 PPAR이 체내 에너지 균형을 조절하는 중요한 인자로 밝혀짐으로써 이 분야에 대한 연구가 활발하게 이루어지고 있다. PPAR은 핵에 존재하는 호르몬 수용체의 한 종류로서 지질, 포도당 대사 및 에너지 항상성과 관련된 유전자를 조절하는 전사인자이다. 에너지대사를 조절하는 PPAR의 특성 때문에 대사질환을 치료하기 위한 약리학적 타겟(pharmacological target)으로 관심이 고조되고 있으며, 이들 수용체의 생리적 기능에 대한 연구 결과가 빠른 속도로 증가하고 있다. PPAR-감마(γ)는 선택적 스플라이싱(alternative splicing)을 통해 2종류의 단백질(PPAR-γ1 및 PPAR-γ2)을 생성한다 (Barak 등, Mol Cell. 4(4): 585-595 (1999)). 특히 PPAR-γ2는 주로 지방 조직에서만 발현되는데 PPAR-γ2가 변이를 통해 과도하게 활성화되면 지방세포(adipocyte)의 분화를 촉진하여 비만을 유발한다. 이처럼 PPAR-γ2의 타겟 유전자(target gene)는 비만에 중요한 역할을 한다고 할 수 있다 (Moller 등, J Obes., 27 Suppl 3: S17-21 (2003); Ferre 등, Diabetes. 53 Suppl 1: S43-50 (2004)). 멜라노코르틴 2 수용체 단백질(melanocortin 2 receptor protein, MC2R)과 멜라노코르틴 2 수용체 부속 단백질 (melanocortin 2 receptor accessory protein, Mrap)은 부신피질자극 호르몬(adrenocorticotropic hormone, ACTH)의 수용체로 작용한다 (Louise 등, Nat.Genet., 37(2): 166-70 (2005)). MC2R은 지방세포에서 호르몬 센시티브 리파제(hormone sensitive lipase, HSL)의 활성을 증가시켜 중성지방의 분해를 촉진하는 것으로 알려져 있다. Mrap은 MC2R의 보조적인 단백질로서 이와 상호작용하는 것으로 알려져 있으며, 지방조직에서만 특이적으로 발현되고 지방 세포의 분화에 따라 그 발현이 증가한다. ACTH 호르몬은 음식 섭취, 에너지 소비, 체내 지방구성 등에 영향을 미치는 것으로 널리 알려져 있는데, 특히 지방분해를 촉진하여 중성지방의 감소를 유도한다 (Cho 등, J Cell Biochem., 96: 869-878 (2005)). 본 발명자들은 ACTH에 의한 지방분해를 촉진할 수 있는 물질을 개발하기 위해 연구를 계속한 결과, Mrap의 발현이 PPAR-γ에 의해 조절되고 ACTH의 활성이 Mrap을 통해 매개되는 것을 밝혔내었으며, Mrap의 발현을 억제한 결과 ACTH에 의한 지방분해가 저해됨을 확인하였다. 이에, 본 발명자들은 Mrap 유전자 프로모터와 여기에 융합된 리포터 벡터를 활용하여 지방분해를 촉진할 수 있는 물질을 검색할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.