항-ＣＤ3 항체 및 그의 사용 방법 document_id A220623050615

사람의 면역계는 상처, 감염 및 신생물 형성을 포함하는 각종 증상에 대항하는 방어계로 작용하며, 세포성 및 체액성 면역계라 불리우는 두 개의 분리되어 있으나 상호 관련이 있는 계에 의해 매개된다. 일반적으로, 체액성 면역계는 계에 의해 외래의 것이라고 인식되는 산물에 결합하여 그를 중화시키는 능력이 있는, 항체 또는 이뮤노글로불린으로 불리우는 가용성 생성물에 의해 매개된다. 대조적으로, 세포성 면역계는 여러 가지 치료 역할을 하는 T-세포라는 세포를 이동시키는 것을 포함한다. 인간 및 동물의 면역계는 모두 두 가지 주된 부류의 림프구, 즉 흉선으로부터 유래하는 세포(T 세포)와 골수로부터 유래하는 세포(B 세포)를 포함한다. 성숙한 T 세포는 흉선으로부터 나와 조직, 림프관 및 혈류 사이를 순환한다. T 세포는 면역학적 특이성을 나타내며, 세포-매개 면역 반응(예를 들어, 이식 거부)에 직접적으로 관여한다. T 세포는 각종 외래 구조물(항원)에 대항하거나 그에 반응하여 작용한다. 많은 경우에 이러한 외래 항원은 감염의 결과로서 숙주 세포 상에 발현된다. 그러나, 외래 항원은 신생물 형성이나 감염에 의해 변화된 숙주로부터 나올수 도 있다. T 세포는 그 자체가 항체를 분비하는 것은 아니지만, 대부분 제2 부류의 림프구인 B 세포에 의해 항체가 분비되는데 필요하다. T 세포는 세포 표면에 나타나는 항원 결정 부위, 기능적 활성 및 외래 항원 인식 등에 의해 일반적으로 정의될 수 있는 여러 소부류로 나누어진다. CD8+ 세포와 같은 특정 소부류의 T 세포는 면역계에서 조절 기능을 담당하는 킬러/서프레서세포인 반면, CD4+ 세포와 같은 다른 세포는 염증 및 체액성 반응을 촉진시키는 작용을 한다. 인간 말초 T 림프구는 외래 항원, 모노클로날 항체, 및 파이토헤마글루티닌, 콘카나발린 A와 같은 렉틴을 포함하는 각종 물질에 의해 자극되어 유사분열을 일으킬 수 있다. 활성화는 미토젠이 세포막의 특이적 부위에 결합하여 일어나는 것으로 추측되지만, 그러한 수용체의 본질 및 활성화 메카니즘 등은 완전히 밝혀지지 않았다. 증식의 유도는 T 세포 활성화의 단지 하나의 징후일 뿐이다. 세포의 기초 및 휴지 상태의 변화로서 정의되는 다른 징후들은 림포카인 생산 및 세포독성 세포 활성의 증가를 포함한다. T 세포 활성화는 반응하는 T 세포 집단 상에 발현된 여러 세포 표면 분자들이 참여하여 일어나는 복잡한 현상이다. 예를 들어, 항원-특이적 T 세포 수용체 (TcR)는 통상 CD3로 불리우는(T3로 불리운 적도 있음) 저분자량 불변 단백질 복합체와 비공유적으로 결합되어 있으며, 클론적으로 분리되어 있는 두 개의 통합 막 당단백질 쇄 알파 및 베타(α 및 β), 또는 감마 및 델타(γ 및 δ)를 함유하는, 디술파이드 결합된 헤테로이합체로 이루어진다. TcR 알파 및 베타 쇄는 항원 특이성을 결정한다. CD3 구조는 TcR 알파베타 (TcR αβ)가 그의 리간드에 결합할 때 개시되는 활성화 신호의 전도 요소인 부속 분자를 나타낸다. TcR의 당단백질 쇄에는 불변 영역과 가변 영역(다형성)이 모두 있다. 다형성 TcR 가변 영역은 구별되는 특이성을 갖는 T 세포 하위 집단을 정의한다. 항원으로서 외래 단백질의 전체 또는 작은 단편을 인식하는 항체와 달리, TcR 복합체는 주 조직적합성 복합체(MHC) 분자 구조 내에 존재하는 작은 펩티드의 항원과 상호작용한다. 이러한 MHC 단백질은 종내에 무작위로 분포된 고도의 다형성을 나타내는 분자 세트이다. 따라서, 활성화는 일반적으로 TcR과 MHC 단백질에 결합된 외래 펩티드성 항원이라는 세 성분 사이의 상호작용이 일어날 것을 요한다. 발명의 개요 본 발명은 CD3에 대하여 특이적으로 유도된 완전 인간 모노클로날 항체를 제공한다. 모노클로날 항체는, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 28F11, 27H5, 23F10 및 15C3을 포함한다. 또한, 모노클로날 항체는 28F11, 27H5, 23F10 또는 15C3과 동일한 에피토프에 결합하는 항체이다. 본 명세서에서 항체들은 각각 huCD3 항체로 기재된다. huCD3 항체는, CD3 양성(CD3+) 세포에는 결합하지만 CD3 음성(CD3-) 세포에는 결합하지 않는 특성; CD3 또는 T 세포 수용체(TcR)의 세포 표면 발현 수준 또는 활성을 변화(예컨대, 감소)시키는 것을 포함하는 항원성 조절을 유도하는 특성; 쥐 항-인간 OKT3 모노클로날 항체가 T-림프구에 결합하는 것을 억제하는 특성; 또는 전체적으로 또는 부분적으로 아미노산 서열 EMGGITQTPYKVSISGT (서열번호:21)을 포함하는 CD3의 에피토프에 결합하는 특성 중 하나 이상을 갖는다. 본 발명의 huCD3 항체는 CD3에 결합하기 위해 쥐 항-CD3 항체 OKT3와 경쟁하며, huCD3 항체에 노출시키면 CD2, CD4 또는 CD8의 세포 표면 발현에는 영향을 주지 않으면서 CD3 및(또는) TcR을 제거 또는 마스킹할 수 있다. CD3 및(또는) TcR의 마스킹은 T-세포 활성화의 손실 또는 감소를 가져오는데, 이는 제어되지 않은 T-세포 활성화가 일어나는 자가면역 질환에서 바람직하다. CD3의 하향 조절은 종래의 면역 억제제인 시클로스포린 등을 사용할 때 관찰되는 일시적인 면역 억제와 비교할 때, 적어도 수 개월 이상 지속되는 장기적인 T 세포 활성화 감소 효과를 가져온다. 항원성 조절이란, 예컨대, 림프구와 같은 세포 표면에서 CD3-T 세포 수용체 복합체를 재배치 및 제거하는 것이다. 세포상 TcR의 표면 발현 수준 또는 활성을 감소시킨다는 것은 TcR의 양이나 기능을 감소시키는 것을 의미한다. CD3의 세포 표면 발현 수준 또는 활성을 조절한다는 것은 세포 표면상 CD3의 양 또는 기능이 변화, 예컨대, 감소시킨다는 것을 의미한다. 세포의 원형질막에 발현되는 CD3 또는 TcR의 양은, 예를 들어, 세포가 huCD3 항체와 접촉할 때 CD3 또는 TcR이 내부화되어 감소된다. 다른 방식으로는, 세포가 huCD3 항체와 접촉할 때 CD3 또는 TcR이 마스킹된다. 쥐 항-인간 0KT3 모노클로날 항체가 T-림프구에 결합하는 것을 억제하는 것은 쥐 OKT3 항체가 T-림프구 세포 표면상의 CD3와 결합체를 형성하는 능력의 감소로서 정의된다. huCD3 항체는 서열번호 2, 6, 10 또는 22의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역과, 서열번호 4, 8, 16 내지 20, 25 또는 26의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 바람직하게는, 세 개의 중쇄 CDR은 GYGMH (서열번호 27), VIWYDGSKKYYVDSVKG (서열번호 28), QMGYWHFDL (서열번호 29), SYGMH (서열번호 33), IIWYDGSKKNYADSVKG (서열번호 34), GTGYNWFDP (서열번호 35) 및 AIWYNGRKQDYADSVKG (서열번호 44)로 구성되는 군으로부터 선택되는 서열과 적어도 90%, 92%, 95%, 97% 98%, 99% 또는 그 이상 일치하는 아미노산 서열을 포함하고, 세 개의 경쇄 CDR은 RASQSVSSYLA (서열번호 30), DASNRAT (서열번호 31), QQRSNWPPLT (서열번호 32), RASQSVSSSYLA (서열번호 36), GASSRAT (서열번호 37), QQYGSSPIT (서열번호 38), RASQGISSALA (서열번호 39), YASSLQS (서열번호 40), QQYYSTLT (서열번호 41), DASSLGS (서열번호 42), WASQGISSYLA (서열번호 43), QQRSNWPWT (서열번호 45), DASSLES (서열번호 46) 및 QQFNSYPIT (서열번호 47)로 구성되는 군으로부터 선택되는 서열과 적어도 90%, 92%, 95%, 97% 98%, 99% 또는 그 이상 일치하는 아미노산 서열을 포함한다. 항체는 CD3에 결합한다. 본 발명의 huCD3 항체는, 인간 DP50 VH 생식세포 유전자 서열 또는 인간 DP50 VH 생식세포 유전자 서열에 상동성인 핵산 서열에 의해 코딩되는 중쇄 가변 영역(VH)을 함유한다는 점; 인간 L6 VL 생식세포 유전자 서열 또는 인간 L6 VL 생식세포 유전자 서열에 상동성인 핵산 서열에 의해 코딩되는 경쇄 가변 영역(VL)을 함유한다는 점; 인간 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열 또는 인간 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열에 상동성인 핵산 서열에 의해 코딩되는 VL을 함유한다는 점; 아미노산 서열 YGMH (서열번호 58)을 포함하는 VH CDR1 영역을 함유한다는 점; 아미노산 서열 DSVKG (서열번호 59)을 포함하는 VH CDR2 영역을 함유한다는 점; 아미노산 서열 IWYX1GX2X3X4X5YX6DSVKG (서열번호:60)을 포함하는 VH CDR2 영역을 함유한다는 점; 아미노산 서열 XAXBGYXCXDFDXE (서열번호:61)을 포함하는 VH CDR3 영역을 함유한다는 점; 아미노산 서열 GTGYNWFDP (서열번호:62) 또는 아미노산 서열 QMGYWHFDL (서열번호:63)을 포함하는 VH CDR3 영역을 함유한다는 점; CDR3 영역에 대하여 C-말단인 위치(이 위치는 CDR3 영역에 대하여 C-말단인 가변 영역 내에 있음)에 아미노산 서열 VTVSS (서열번호:64)을 포함하는 점; CDR3 영역에 대하여 C-말단인 위치(이 위치는 CDR3 영역에 대하여 C-말단인 가변 영역 내에 있음)에 아미노산 서열 GTLVTVSS (서열번호:65)을 포함하는 점; CDR3 영역에 대하여 C-말단인 위치(이 위치는 CDR3 영역에 대하여 C-말단인 가변 영역 내에 있음)에 아미노산 서열 WGRGTLVTVSS (서열번호:66)을 포함하는 점; 전제적으로 또는 부분적으로 아미노산 서열 EMGGITQTPYKVSISGT (서열번호 67)을 포함하는 에피토프에 결합한다는 점; 중쇄 내 위치 234, 235, 265 또는 297, 또는 이들의 조합된 위치의 아미노산 잔기에서 변이를 포함(이들 항체 존재하에서의 T-세포로부터의 사이토카인 방출은 중쇄 내 위치 234, 235, 265 또는 297, 또는 이들의 조합된 위치에서 변이를 포함하지 않는 항체 존재하에서의 T-세포로부터의 사이토카인 방출과 비교할 때 감소된 것임)한다는 점 중 적어도 두 가지 이상(즉, 두 가지 이상, 세 가지 이상, 네 가지 이상, 다섯 가지 이상. 여섯 가지 이상, 일곱 가지 이상, 여덟 가지 이상, 아홉 가지 이상, 열 가지 이상, 열 한가지 이상)의 특성을 나타낸다. 본 명세서에서 중쇄 잔기의 번호 체계는 EU 인덱스[Kabat et al., "Proteins of Immunological Interest", US Dept. of Health 0026# Human Services (1983)]에 따른 것이며, 예를 들어, 본 명세서에 그 내용이 포함되는 미합중국 특허 제5,624,821호 및 제5,648,260호에 나타낸 바와 같다. 본 발명의 일부 국면에서, huCD3 항체는 아미노산 변이를 함유한다. 변이는 불변 영역 내에 있다. 변이의 결과 항체는 변화된 이펙터 기능을 갖게 된다. 항체의 이펙터 기능은 항체가 Fc 수용체나 보체 성분과 같은 이펙터 분자에 대하여 갖는 친화도를 변화, 즉, 증진 또는 저하시킴으로써 변화된다. 항체의 이펙터 기능을 변화시켜 면역 반응의 여러 가지 측면을 제어하는 것, 예를 들어, 면역계의 각종 반응을 증진시키거나 억제하는 것이 가능하다. 변이의 결과, 예를 들어, T-세포로부터 사이토카인의 방출을 감소시킬 수 있는 항체가 얻어진다. 변이는, 예를 들어, 중쇄 내 아미노산 잔기 234, 235, 265 또는 297, 또는 이들의 조합에 존재한다. 바람직하게는, 변이는 위치 234, 235, 265 또는 297에 알라닌 잔기, 또는 위치 235에 글루타메이트 잔기를 가져오는 것, 또는 이들의 조합이다. "사이토카인"이란 세포 표면에 발현된 세포외 수용체에 결합하여 세포 기능을 조절하는, 당업계에 알려진 모든 인간 사이토카인을 이르는 것으로, IL-2, IFN-감마, TNF-a, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-IO 및 IL-13을 포함하나, 이에 국한되는 것은 아니다. 사이토카인의 방출은 ATG(항-흉선세포 글로불린) 및 OKT3 (쥐 항-인간 CD3 항체)와 같은 항 T-세포 항체를 사용할 때 통상적으로 일어나는 임상 복합 증상인 사이토카인 방출 증후군(CRS)으로 알려진 독성 증상을 일으킬 수 있다. 이러한 증상은 TNF, IFN-감마 및 IL-2와 같은 사이토카인이 순환계로 과다 방출되는 것을 특징으로 한다. CRS는 항체가 CD3(항체의 가변 영역을 통해)와 다른 세포 상의 Fc 수용체 및(또는) 보체 수용체(항체의 불변 영역을 통해)에 동시에 결합하여 T 세포를 활성화시킴으로써 T 세포가 사이토카인을 방출하고, 이에 의해 저혈압, 발열, 경직을 특징으로 하는 전신적 염증 반응이 일어난 결과이다. CRS의 증후는 발열, 오한, 오심, 구토, 저혈압 및 호흡 곤란을 포함한다. 본 발명의 huCD3 항체는 생체내에서 중쇄 불변 영역에 의해 매개되어 하나 이상의 사이토카인이 방출되는 것을 방지하는 하나 이상의 변이를 함유한다. 본 발명의 완전 인간 CD3 항체는 huCD3 항체에의 노출시에 사이토카인 방출이 상당하게 감소 또는 제거되도록, 예를 들어, Fc 영역에 L234 L235 -003e# A234 E235 변이를 함유한다(도 11A 및 11B 참조). 하기 실시예 4에 기재된 바와 같이, 본 발명에 따른 huCD3 항체의 Fc 영역 내의 L234 L235 -003e# A234 E235 변이는 huCD3 항체가 인간 백혈구에 노출되었을 때 사이토카인 방출을 감소 또는 제거하는 반면, 하기하는 변이는 상당한 양의 사이토카인 방출을 유지한다. 예를 들어, 사이토카인 방출의 상당한 감소는 Fc 영역에 L234 L235 -003e# A234 E235 변이를 갖는 huCD3 항체에 노출되었을 때의 사이토카인 방출 수준을, 하기와 같은 하나 이상의 다른 변이를 갖는 다른 항-CD3 항체에 노출시켰을 때의 사이토카인 방출 수준과 비교하여 정의된다. Fc 영역에서의 다른 변이는, 예를 들어, L234 L235 -003e# A234 A235, L235 -003e# E235, N297 -003e# A297, 및 D265 -003e# A265를 포함한다. 다른 방식으로는, huCD3 항체는 핵산 잔기를 생식세포 핵산 잔기로 교체하는 하나 이상의 변이를 포함하는 핵산에 의해 코딩된다. "생식세포 핵산 잔기"란 불변 또는 가변 영역을 코딩하는 생식세포 유전자 내에 자연적으로 발생하는 핵산 잔기를 말한다. "생식세포 유전자"는 생식세포(즉, 난자 또는 정자로 되는 세포) 내에서 발견되는 유전자이다. "생식세포 변이"는 생식세포 또는 단세포 단계의 접합자에서 일어난 특정 DNA 내의 유전될 수 있는 변화로서, 그러한 변이가 자손에게 전달될 때 개체의 모든 세포에 혼입될 수 있는 변이를 이른다. 생식세포 변이는 하나의 체세포에서 얻어지는 체세포 변이와는 대조적인 것이다. 몇몇 경우에, 가변 영역을 코딩하는 생식세포 DNA 서열 중 뉴클레오티드가 변이(즉, 체세포 변이)되어 다른 뉴클레오티드로 교체된다. 따라서, 본 발명의 항체는 핵산을 생식세포 핵산 잔기로 교체하는 하나 이상의 변이를 포함한다. 생식세포 항체 유전자는, 예를 들어, DP50 (기탁 번호: IMGT/EMBL/GenBank/DDBJ:L06618), L6 (기탁 번호: IMGT/EMBL/GenBank/DDBJ:X01668) 및 L4/18a (기탁 번호: EMBL/GenBank/DDBJ:Z00006)을 포함한다. huCD3 항체의 중쇄는, 예컨대, DP50 생식세포 유전자와 같은 생식세포 V (가변) 유전자로부터 유래한다. DP50 생식세포 유전자의 핵산 및 아미노산 서열은, 예를 들어, 하기 핵산 및 아미노산 서열을 포함한다. 본 발명의 huCD3 항체는 인간 DP50 VH 생식세포 유전자 서열에 의해 코딩되는 중쇄 가변(VH) 영역을 포함한다. DP50 VH 생식세포 유전자 서열은, 예를 들어, 도 5의 서열번호 48에 나타나있다. 본 발명의 huCD3 항체는 DP50 VH 생식세포 유전자 서열에 80% 이상 상동성인 핵산 서열에 의해 코딩되는 VH 영역을 포함한다. 핵산 서열은 DP50 VH 생식세포 유전자 서열에 바람직하게는 90%, 95%, 96%, 97% 이상, 보다 바람직하게는 98%, 99% 이상 상동성이다. huCD3 항체의 VH 영역은 DP50 VH 생식세포 유전자 서열에 의해 코딩되는 VH 영역의 아미노산 서열에 80% 이상 상동성이다. huCD3 항체의 VH 영역의 아미노산 서열은 DP50 VH 생식세포 유전자 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 바람직하게는 90%, 95%, 96%, 97% 이상, 보다 바람직하게는 98%, 99% 이상 상동성이다. 본 발명의 huCD3 항체는 또한 인간 L6 또는 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열에 의해 코딩되는 경쇄 가변(VL) 영역을 포함한다. 인간 L6 VL 생식세포 유전자 서열은, 예를 들어, 도 6의 서열번호 74에, 인간 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열은 도 7의 서열번호 53에 나타나 있다. 다른 방식으로는, huCD3 항체는 L6 또는 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열에 80% 이상 상동성인 핵산 서열에 의해 코딩되는 VL 영역을 포함한다. 핵산 서열은 L6 또는 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열에 바람직하게는 90%, 95%, 96%, 97% 이상, 보다 바람직하게는 98%, 99% 이상 상동성이다. huCD3 항체의 VL 영역은 L6 또는 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열에 의해 코딩되는 VL 영역의 아미노산 서열에 80% 이상 상동성이다. huCD3 항체의 VL 영역의 아미노산 서열은 L6 또는 L4/18a VL 생식세포 유전자 서열에 의해 코딩되는 아미노산 서열에 바람직하게는 90%, 95%, 96%, 97% 이상, 보다 바람직하게는 98%, 99% 이상 상동성이다. 본 발명의 huCD3 항체는, 예를 들어, DP50 생식세포로부터 유래된 부분적으로 보존된 아미노산 서열을 갖는다. 예를 들어, 본 발명의 huCD3 항체의 CDR1 영역은 적어도 연속 아미노산 서열 YGMH (서열번호: 58)을 갖는다. huCD3 항체의 CDR2는 적어도 연속 아미노산 서열 DSVKG (서열번호 59)을 포함한다. 예를 들어, CDR2 영역은 연속 아미노산 서열 IWYX1GX2X3X4X5YX6DSVKG (서열번호:60)을 갖는데, 이 때 X1, X2, X3, X4, X5 및 X6은 어떠한 아미노산이어도 무방하다. X1, X2, X3 및 X4는, 예를 들어, 친수성 아미노산이다. 본 발명의 몇몇 huCD3 항체에서, X1은 아스파라긴 또는 아스파르테이트이고, X2는 아르기닌 또는 세린이고, X3는 리신 또는 아스파라긴이고, X4는 리신 또는 글루타민이고, X5는 아스파르테이트, 아스파라긴 또는 티로신이고(이거나), X6는 발린 또는 알라닌이다. VH CDR2 영역은, 예를 들어, AIWYNGRKQDYADSVKG (서열번호:69), IIWYDGSKKNYADSVKG (서열번호:70), VIWYDGSKKYYVDSVKG (서열번호:71) 및 VIWYDGSNKYYADSVKG (서열번호:72)로 구성되는 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다. huCD3 항체의 CDR3 영역은, 예를 들어, 적어도 연속 아미노산 서열 XAXBGYXCXDFDXE (서열번호:61)(여기서, XA, XB, XC, XD 및 XE는 어떤 아미노산이어도 무방하다)을 함유한다. 본 발명의 일부 huCD3 항체에서, XA 및 XB는 중성 아미노산이고, XD는 방향족 아미노산이고(이거나) XE는 소수성 아미노산이다. 예를 들어, XA는 글리신 또는 글루타민이고, XB는 트레오닌 또는 메티오닌이고, XC는 아스파라긴 또는 트립토판이고, XD는 트립토판 또는 히스티딘이고(이거나), XE는 프롤린 또는 류신이다. CDR3 영역은, 예를 들어, 연속 아미노산 서열 GTGYNWFDP (서열번호: 62) 또는 연속 아미노산 서열 QMGYWHFDL (서열번호: 63)을 포함한다. huCD3 항체는 아미노산 서열 WVRQAPGKGLEWV (서열번호:73)을 함유하는 프레임워크 2 영역 (FRW2)을 포함한다. 본 발명의 huCD3 항체는 아미노산 서열 RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCA (서열번호:74)을 함유하는 프레임워크 3 영역 (FRW3)을 포함한다. 일부 huCD3 항체는 CDR3 영역에 대하여 C-말단인 위치에 연속 아미노산 서열 VTVSS (서열번호:64)을 포함한다. 예를 들어, 항체는 CDR3 영역에 대하여 C-말단인 위치에 연속 아미노산 서열 GTLVTVSS (서열번호:65)을 포함한다. 다른 huCD3 항체는 CDR3 영역에 대하여 C-말단인 위치에 연속 아미노산 서열 WGRGTLVTVSS (서열번호: 66)을 포함한다. 서열번호 66 중의 아르기닌 잔기는, 예를 들어, 28F11 huCD3 항체 (서열번호:2) 및 23F10 huCD3 항체 (서열번호:6)에 대한 VH 서열 중에 있다. 또 다른 국면으로서, 본 발명은 개체에 huCD3 항체를 투여하여 면역 관련된 질환의 증상을 치료, 예방 또는 완화시키는 방법을 제공한다. 임의로는, 개체에 비제한적인 예로서 소염 화합물 또는 면역억제 화합물과 같은 제2의 약제를 투여한다. 예를 들어, I형 당뇨병 또는 성인 잠복성 자가면역 당뇨병(LADA)이 있는 개체에 GLP-1 또는 베타 세포 휴지 화합물 (즉, 칼륨 채널 개방제와 같이, 인슐린 방출을 감소 또는 억제하는 화합물)과 같은 제2의 약제를 투여한다. 적절한 화합물은 메토트렉세이트, 시클로스포린 A (예를 들어, 시클로스포린 마이크로에멀젼 포함), 타크로리무스, 코르티코스테로이드, 스타틴, 인터페론 베타, 레미케이드(인플릭시맙), 엔브렐(에타너셉트) 및 휴미라(아달리무맙)을 포함하나, 이에 국한되는 것은 아니다. 개체는 자가면역 질환 또는 염증성 질환과 같은 면역 관련 질환을 앓고 있거나 그러한 질환으로 발전될 수 있는 소인을 가지고 있다. 또 다른 국면으로, 본 발명은 장기 또는 조직의 이식 전, 도중 또는 후에 개체에 본 발명의 huCD3 항체를 투여하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 본 발명의 huCD3 항체는 장기 또는 조직 이식 후의 거부증을 치료 또는 예방하는데 사용된다.