트랜스페린 리셉터 항체 document_id A220623050645

진단법에서의 그들의 공지된 사용에 더하여, 항체는 치료제로서 유용한 것으로 나타났다. 예를 들어, 면역요법, 또는 치료 목적을 위한 항체의 사용은 최근 몇년간 암을 치료하는데 사용되었다. 수동 면역요법은, 암 치료에서 단일클론 항체의 사용을 수반한다. 예를 들어, Cancer: Principles and Practice of Oncology, 6th Edition (2001) Chapt. 20 pp. 495-508을 참조하라. 이들 항체는 종양 세포 성장 또는 생존의 직접적인 저해에 의해 그리고 몸의 면역 시스템의 천연 세포 사멸 활성을 보강하는 그들의 능력에 의해, 본래부터의 치료 생물학적 활성을 가질 수 있다. 이들 작용제는 단독으로 또는 방사선 또는 화학치료제와 결합하여 투여될 수 있다. 비-Hodgkin의 임파종과 유방암 각각의 치료에 승인된 리툭시맙과 트라스투주마브는 그러한 치료의 두가지 예이다. 대안으로서, 항체는 항체가 독성작용제에 연결되고 종양에 특이적으로 결합시킴으로써 그 작용제를 종양에 지시하는 항체 컨쥬게이트를 만드는데 사용될 수 있다. 겜투주마브 오조가마이신(Gemtuzumab ozogamicin)는 백혈병의 치료에 사용된 승인된 항체 컨쥬게이트의 예이다. 암 세포에 결합되고 진단 및 치료법에 잠재력인 사용을 갖는 단일클론 항체가 공보에 개시되었다. 예를 들어, 그 중에서도 특히, 표적 단백질의 일부 분자량을 개시하는 하기의 특허 출원을 참조하라: 미국 특허 No. 6,054,561 (200 kD c-erbB-2 (Her2), 및 다른 공지되지 않은 항원 크기 40-200 KD) 및 미국 특허 No. 5,656,444 (50 kD 및 55 kD 종양태아 단백질). 임상적인 실험에서와/또는 고형 종양의 치료에 승인된 항체의 예는 : 트라스투주마브 (항원: 180 kD, HER2/neu), 에드레콜로마브 (항원: 40-50 kD, Ep-CAM), 항-사람 유지방 글로불 (HMFG1) (항원 003e#200 kD, HMW Mucin), 세툭시마브 (항원: 150 kD 및 170 kD, EGF 리셉터), 알렘투주마브 (항원: 21-28 kD, CD52), 및 리툭시맙 (항원: 35 kD, CD20)을 포함한다. 유방암을 치료하는데 사용되는 트라스투주마브 (Her-2 리셉터) 및 몇가지 암의 치료를 위한 임상적인 실험에서의 세툭시마브 (EGF 리셉터)의 항원 표적은 피부, 결장, 폐, 난소, 간, 및 췌장을 포함하는 많은 정상 사람 성인 조직에서 일부 검출가능한 수준으로 존재한다. 이들 치료를 사용하는데 있어서 안전의 허용범위는 발현의 수준 또는 이들 부위에서 항체의 활성의 접근에서의 차이에 의해 가능하게 제공된다. 면역요법의 또다른 타입은 활성 면역요법, 또는 특정 암(들)에 존재하는 항원 또는 개인에서 면역 반응을 일으키는, 즉, 개인이 그들 고유의 암에 대해서 항체를 활발히 제조하도록 유도하는 항원의 발현을 지시하는 DNA 구성체의 백신접종이다. 활성 면역법은 수동 면역요법 또는 항체독소로서 종종 사용되지 않았다. 질환 진행의 몇가지 모델(암을 포함)이 제안되었다. 이론들은 단일 감염/변형사건에 의한 원인으로부터, 궁극적으로 충분히 병원균 또는 악성의 능력을 갖는 것으로 인도되는 "질환-유사" 또는 '암-유사' 조직 타입으로 점점 발달에까지 범위가 이른다. 일부는 암에 대해서, 예를 들어, 단일 돌연변이 사건이 악성종양을 유발하는데 충분하다고 주장하는 반면, 다른 이들은 이어지는 변경이 또한 필요하다고 주장한다. 일부 다른 이들은 증가하는 돌연변이 로드 및 종양 등급이 세포 수준에서 돌연변이-선택 사건의 연속체를 통한 종양형성의 진행은 물론 개시의 둘다에 필요하다고 제안하였다. 어떤 암 표적은 오직 종양 조직에서만형성된 반면, 다른 것들은 정상 조직에 존재하고 종양 조직에서 상향 조절 및/또는 과-발현된다. 그러한 상황에서, 일부 연구원들은 과도-발현이 악성종양의 획득에 연결된다고 제안하였고, 다른이들은 과도-발현이 단지 증가하는 질환 상태에 대한 진로를 따르는 경향의 마커라고 시사한다. 이상적인 진단 및/또는 치료 항체는 많은 암에 존재하는 항원에 대해 특이적일 것이지만, 오로지 낮은 수준으로 어떠한 정상 조직에 부재 또는 존재한다. 암(들)과 특이적으로 관련되는 신규 항원의 발견, 특성화, 및 분리는 많은 방식으로 유용할 것이다. 먼저, 항원은 단일클론 항체를 항원에 대하여 만드는데 사용될 수 있었다. 항체는 이상적으로 암 세포에 대해서 생물학적 활성을 가질 것이고 외래 항원에 대한 면역 시스템의 반응을 보충할 수 있다. 항체가 치료제로서 단독으로 또는 현재의 치료와 조합하여 투여되거나 또는 독성 작용제에 연결된 면역컨쥬게이트를 제조하는데 사용될 수 있다. 생물학적 활성이 낮거나 없는 것을 빼고 동일한 특이성을 갖는 항체가 단독으로 투여될 때, 항체가 방사성 동위원소, 독소, 또는 화학치료제 또는 화학치료제를 함유하는 리포솜과의 면역컨쥬게이트를 제조하는데 사용될 수 있고, 컨쥬게이트 형태는 독소를 항원-함유 세포로 지시하는 항체에 의하여, 생물학적으로 활성이라는 점에서 유용할 수 있다. 이상적인 진단 및/또는 치료 항체에 바람직한 한가지 양태는 다양한 암과 관련되는 항원의 발견과 특성화이다. 비-암세포에서 제한된 발현을 갖는 많은 타입의 암 (예를 들어, "전(pan)-암" 항원)에서 발현되는 항원은 거의 없다. 그러한 항원의 분리와 정제는 항원을 표적화하는 항체 (예를 들어, 진단 또는 치료)를 만드는데 유용할 것이다. "전-암" 항원에 결합하는 항체는 오직 하나의 특이적 타입의 암과 관련된 항원에 대한 항체와 대조적으로, 표적 다른 조직에서 발견된 다양한 암을 표적화할 수 있다. 항원은 또한 약물 발견 (예를 들어, 작은 분자) 및 더 나아가 세포 조절, 성장, 및 분화의 특성화에 유용할 것이다. 트랜스페린 리셉터는 사람 종양에서 널리 발현되었고(Gatter et al., 사람 조직에서 트랜스페린 리셉터: 그들의 분포 및 가능한 임상적인 적절성, J Clin Pathol 36, 539-545 (1983)) 세포 증식 및 생존에서 중요한 역할을 한다. 트랜스페린 리셉터에 결합하는 항체는 이전에 동물 종양 모델에서 효능있는 것으로 나타났다. CCRF-CEM 세포를 사용하는 백혈병 이종이식 모델에서(White et al., Combinations of anti-transferrin receptormonoclonal antibodies inhibithuman tumor cell growth in vitro and in vivo:evidence for synergistic antiproliferative effects, Cancer Res 50, 6295-6301(1990)) 그리고 M21 사람 흑색종 이종이식에서 (Trowbridge 0026# Domingo, Anti-transferrin receptormonoclonal antibody and toxin-antibody conjugates affect growth of human tumor cells, Nature 294, 171-173(1981)), 트랜스페린 리셉터 항체는 또한 종양 진행을 억제하였다. 뮤린 IgA 항체 42/6를 가지고한 단계 I 임상적인 실험을 포함하여(Brooks et al., PhaseIa trialof murine immunoglobulin A antitransferrin receptor antibody 42/6, Clin Cancer Res 1, 1259-1265(1995), 네이키드 항체, 독소 컨쥬게이트 항체 및 트랜스페린-독소 컨쥬게이트를 사용한 1980년대 이후로 트랜스페린 리셉터가 암 표적으로서 연구되었다(예를 들어, 하기 참조, Griffin et al., Combinedantitumor therapy with the chemotherapeutic drugdoxorubicin and an ahti-trafzsferrin receptor inimuiiotoxiii: In vitro and in vivo studies, J Immunol I 1 , 12-18 (1992) ; Qian et al., Targeted drug delivery via the transferrin receptor-mediated endocytosis pathway, Pharmacological Reviews 54, 561-587 (2002); Trowbridge 0026# Collin et al.,Structure-function analysis of thehatmarztransfer;in receptor: Effectsof anti- receptor monoclonal antibodies on tumor growth, Curr Stud Hematol Blood Transf 58, 139-147 (1991))). 트랜스페린 리셉터의 발현은 세포 증식과 상호관련이 있고 이것이 트랜스페린 리셉터 항체와 포지티브로 염색하는 높은 비율의 종양 및 정상 조직의 제한된 염색을 설명한다고 제안되었다 (Gatter, 1983). 일반적으로 트랜스페린 리셉터 항체가 세포 안으로의 철의 흡수를 줄임으로써 세포 증식을 저해한다는 것이 받아들여진다 (Kemp, Iron deprivation andcancer: a viewbeginning with studiesof monoclonal antibodies against the transferrin receptor, Histol Histopathol 12, 291-296, (1997)). 이것은 트랜스페린 리셉터과 철-하전된 트랜스페린과의 상호작용을 차단함으로써 또는 트랜스페린 리셉터 주기 세포 표면 제시의 역학을 바꿈으로써 달성될 수 있다. 종양 세포에서 철 흡수를 차단하는 효과는 주로 S-상태에서 이어서 G1 상태 세포의 축적에서, 초기에 세포 주기 저지로서 나타난다 (White, 1990). 철 회수의 궁극적 종말점은 백혈구정체로부터 세포 사멸의 유도에 이르기까지 변하는 것으로 보인다. 뮤린 트랜스페린 리셉터를 인식하는 래트 유도된 항체는 합성 마우스 백혈병 모델에서 테스트되었다 (Savage, et al.,. Effects of monoclonal antibodiesthat block transferrin receptorfunction on the in vivo growth of a syngeneic murine leukemia, Cancer Res 47, 747-753 (1987)). 이 분자는 대조군에 비해 생존을 상당히 개선시켰고 주에 걸친 치료 기간에서 항체에 의해 인식된 총체 독성의 증거 또는 정상 조직에 대한 손상의 증거는 없었다. 추가적으로, 적혈구 또는 백혈구 세포 수에서의 변화는 없었다. 그러나, 골수 원종 세포의 분석은 CFU-e /106 세포에서의 2배 감소와 CFU-c에서는 덜 현저한 감소를 보여주었다. 트랜스페린 리셉터를 차단하는 효과(들)에 추가의 통찰력은 마우스 항체 42/6를 사용하여 수행된 단계 I 임상적인 실험의 결과를 평가함으로써 제공될 수 있다. 이 연구에서, 짧은 처리 과정과 마우스 항체의 불량한 약동학에도 불구하고, 혼합된 종양 반응의 증거가 있었다 (Brooks, 1995). 42/6으로 처리된 환자의 평가는 항체로 처리한 후에, 감소된 골수 BFU-e의 증거를 보였지만 결과는 통계적으로 유의하지 않았다. 트랜스페린 리셉터가 분화하는 골수 원종 세포에서 발현되는 것으로 나타났기 때문에(Helm et al., Characterizationand phenotypic analysis of differentiating CD34+human bone marrow cells in liquid culture, Eur J Haematol 59, 318-326 (1997)) 항-트랜스페린 리셉터 항체를 편입하는 치료제는 골수 독성에 대한 잠재력보다 중대한 잠재적인 치료 효과를 갖는다는 것이 바람직하다. 요구되는 것은 그러한 질환 및/또는 암을, 세포 표면 표적을 특이적으로 인식하는, 항체 및 다른 작용제로 진단하고 치료하는데 사용될 수 있는, 병든 및/또는 암 세포의 표면에서의 신규 표적이다. 본원에서 개시된 발견에 근거하여, 트랜스페린 리셉터의 질환-촉진 활성을 감소하거나 강화함으로써 조절할 수 있는, 세포의 표면에서 표적을 특이적으로 인식하는, 신규 항체 및 다른 작용제에 대한 더 나아간 요구가 존재한다. 그것의 질환-관련 활성을 저해할 수 있는 사람 트랜스페린 리셉터의 길항제를 확인하는 것이 본 발명의 목적이다. 트랜스페린 리셉터의 분석에 사용하기 위해, 그리고 면역원으로서 사용하기 위한 또는 항-사람 트랜스페린 리셉터 항체를 선택하기 위한 신규 화합물을 제공하는 것이 또다른 목적이다. 아래에서 좀더 자세하게 설명될 바와 같이, 본 발명자들은 사람 트랜스페린 리셉터의 신규 에피토프를 발견하고, 본원에서 제공된 신규 길항제, 조정자 및 항체의 항원 표적으로서 확인하였다 .