4차 암모늄 화합물을 사용한 고수준 소독을 위한 방법 및조성물 document_id A220623050781

"고수준 소독제"는 다수의 박테리아 포자를 제외한, 모든 미생물을 파괴하는 것으로 예상될 수 있는 화학물질이다. "소독", "저", "중" 및 "고" 수준 소독에 대한 표준이 제정되었다. 이들 표준은 특정 미생물에 의한 특정 의료 장치의 오염의 공지된 또는 가능성있는 리스크, 생물체의 병원체 특성, 및 소독 규제에 관한 기타 원칙에 기초한다. 이 표준은 공지된 또는 가능성있는 감염 및 오염 리스크를 집합적으로 나타내는 시험 생물체의 특정 패널에 대한 소독 및/또는 멸균 효율을 증명할 것을 대표적으로 요구한다. 시험 패널 및 기준은 "저", "중" 및 "고" 수준 소독에 대해 다르다. 이들 용어는 출시전 고시 [510(k)] 액상 화학적 멸균제 및 고수준 소독제에 대한 제출(Premarcket Notification[510(k)] Submissions for Liquid Chemical Sterilants and High Level Disinfectants) FDA 1997): "라벨에 따라 사용될 때 다량의 박테리아 포자를 제외한 모든 미생물 병원체를 불활성화시키는 살균제"에 상세히 기재된 소독 수준에 대한 현행 식품의약국 (Food and Drug Administration ("FDA")의 기준에 따라 본명세서에서 사용된다. 간단히, 고수준 소독제에 대한 FDA 규정 요건은 정량적 결핵균 박멸 시험 (tuberculocidal test)에서 2% 말 혈청 존재 하에서 400 ppm 경수 (hard water) 내 우형 결핵균 (Mycobacterium tuberculosis var. bovis) (또는 마이코박테리움 테르아이 ((Mycobacterium terrae) 같이 적절한 대용물의 특이적 균주)의 100% 살생을 가장 어려운 시험으로서 포함한다. 우형 결핵균은 가장 살균적 화합물에 의한 치료가 듣지 않는 생물체이다. 또한, 고수준 소독제에 대한 FDA 요구조건은 특이적 그램-음성 및 그램-양성 박테리아, 진균 및 바이러스에 대한 효능을 포함한다. 관련된 AOAC 살포자 (sporicidal), 살결핵균 (tuberculocidal), 살바이러스 (virucidal) 및 살세균(bactericidal) 시험은 본명세서 부록 1을 참조한다. 고수준 소독제에 대한 부가적 FDA 규정 요구조건은 소독 계획시간 보다 더 긴 노출 시간이 비록 허용가능하더라도 이들 소독제는 또한 멸균을 수행해야만 한다는 것이다. 멸균은 바실러스 (Bacillus) 또는 클로스트리듐 (Clostridium) 종의 포자를 이용한 살포자 활성 시험으로 시험된다. 화학적 멸균제에 가장 저항성인 미생물은 바실러스 종, 바실러스 서브틸리스 (B. subtilis) 및 클로스트리듐 스포로겐스(C. sporogens)인 것으로 입증되었다. 멸균은 진균 및 세균 포자를 포함하는, 모든 형태의 미생물을 완전히 제거 또는 파괴하는 과정이다. 고수준 소독제로서 사용되기 위해, 화학물질은 FDA (미국 내) 또는 TGA (호주 내)와 같은 적합한 규제 기관에 등록되어야만 한다. 고수준 소독제 ("HLD")는 중- 및 저-수준 소독의 소독 효능 표준도 만족시킨다고 공지되어 있다. 저-수준 소독 능력은 중- 또는 고-수준 소독 능력을 예상할 수는 없다는 것이 일반적으로 인정된다. 사실, 시험 이전에, 저-수준 소독제가 더 높은 수준 소독 표준을 이룰 수 없다고 추정된다. 고수준 소독제는 예를 들면, 내시경, 신장 투석기 및 기타 특히 열에 의해 손상되기 쉬운 의료 장비 및 장치를 소독하기 위해, 건강 및 의료 산업에서 광범위하게 사용된다. 또한, 많은 장비가 그 구조 내에 고무 또는 플라스틱을 포함하고, 손상없이 60℃ 이상까지 반복적으로 가열될 수 없는 곳인 의료 시설 및 치과의사에 의해 광범위하게 사용된다. 통상 상업적으로 이용가능한 고수준 소독제는 사용전 알칼리 완충제로 활성화시키는 것이 대표적으로 필요한, 0.3 및 3.4% 사이의 글루타르알데히드 용액을 포함한다. 또한 산성 (pH 1.6-2.0) 7.5% sup. w/v 과산화수소 용액 (Sporox®, Reckitt and Colman, Inc.), 및 1.0% 과산화수소 및 0.08% 과초산 ("PAA")의 산성 (pH 1.87) 혼합물 (Peract™20, Minntech Corp. 또는 Cidex OPA®, Johnson 0026# Johnson)이 또한 이용가능하다. 25분 및 20℃에서의 고수준 소독에 대한 PAA의 최소 유효 농도는 0.05% (500 ppm)(Peract™)이다. 30분 및 20℃에서의 고수준 소독에 대한 과산화물의 최소 유효 농도는 6.0% (Sporox®)이다. 고수준 소독제로서 허용가능하려면, 조성물은 미생물 효능의 규정 표준을 만족시키는 것 외에, 고무, 플라스틱, 엘라스토머 및 금속과 같은 의료 장비에 사용되는 구성 재료와 적합성이 있어야 하고 쉽게 사용가능해야 한다. 소독제가 독성은 낮으면서 물로 쉽게 헹궈질 수 있다면 분명히 유리하다. 간편한 모니터링 및 검증 절차가 가능해야만 한다. 상업적으로 충분한 저장 수명 및 저장 안정성을 가져야만 한다. 바람직하게는, 비교적 단시간 내에 고수준 소독을 제조하고 수행하는 것이 경제적이다. 이들 요구조건을 모두 만족시키는 고수준 소독제는 공지된 바 없다. 글루테르알데히드, 과초산 및 페놀은 모두 불쾌감을 주면서 독성이 있다. 또한, 장치에 대한 일부 알데히드 잔류물은 생체검사 샘플과 불리하게 반응하고 심지어 내시경을 받는 환자에 대해 화학적으로 유도된 아나필락시스 쇼크를 일으키는 것으로 알려져 있다. 과산화수소 잔류물은 소독된 방광경을 통해 취한 방광경 샘플, 및 내시경을 통해 취해진 생체 검사 샘플과 간섭하는 것이 알려져 있다. 심지어 가장 양성인 고수준 소독제도 피부 과민 또는 알레르기 반응을 일으키는 경향이 있고 어떤 것은 잠재적 발암물질로서 생각된다. 4급 암모늄 화합물 ("quats")은 다년간 산업 및 가정용 소독제로서 널리 사용되어 왔고 사용하기 안전하고 간편하다. 유감스럽게도, 4급 암모늄 화합물을 함유하는 제제는 스트렙토코커스 및 스테필로코커스같은 그램 양성 생물체에 대해서는 효과적이지만, 단독으로 사용시 가장 효과가 적은 소독제이다. 4급 암모늄 화합물은 그램 음성 생물체에 대해 비교적 비효과적이고, 살포자 효과 결핍으로 인해 악명높고, 살결핵균 활성은 실질적으로 없는 것으로 널리 보고되어 있다 (예를 들면, "소독, 멸균, 및 보존 (Disinfection, Sterilization and Preservation)", Seymour S. Block, 5판, 306쪽 참조). 4급 암모늄 화합물은 ppm부터 0.25 %w/w의 범위의 농도에서 대표적으로 사용된다. 많은 노동자들은 서로 다르게 치환된 4급 암모늄 화합물을 선별하고 및/또는 그 효율을 더 높은 소독 수준으로 상승시키는 공통보조제를 추구해왔다. 예를 들면, US 6,245,361은 600-800 ppm의 4급 화합물, 및 차아염소산 또는 디이소시아네이트와 같이 염소 화합물이 살결핵균 활성을 제공하는 염소 함유 화합물의 조합을 개시한다. 염소 화합물은 자체가 우수한 멸균제이고 (특허에서 특정된 수준에서) 4급 암모늄 화합물의 부가는 염소 단독과 비교하여 살포자/살결핵균 효능에서 어떠한 향상도 나타내지 않는 것으로 보인다. 주장된 개선점은 4급 암모늄 화합물과의 조합이 염소 화합물 단독보다 "덜" 독성이고 "덜" 피부과민증이라는 것이다. 그렇지만, 염소 화합물의 존재는 많은 구성 재료에 대해 조성물이 부식성이 되게 하고 이 조합은 선행기술의 단점의 대부분을 가지고 있다. 이 예시에서와 같이 활성 성분의 조합을 포함하는 소독제는 또한 규정된 공정에 대해 불리하다. 어떤 지역에서는, 각 활성 성분이 독성 및 재료 적합성에 대해 개별적으로 널리 공지되어 있을 지라도, 이 조합은 규제 목적에 대해 신규한, 이전에 비공지된 것으로서 취급되어야만 한다. US 5,444,094는 4급 암모늄 염 제제가 소독제로서 오랫동안 사용되어 왔지만 어떠한 살결핵균 활성을 나타내지는 않는다는 것을 인정한다. 글리콜 에스테르도 마찬가지이다. 그렇지만, US 5,444,094는 최소한 약 8% w/w 글리콜 에테르와 0.1% 내지 0.2% 4급 암모늄 화합물의 조합은 결핵균을 박멸하지만, 6% 글리콜 에테르와의 조합은 그렇지 않다는 점을 교시한다. 이것은 놀라운 것이며, 글리콜 에테르에 의해 60% 지방으로 구성된 마이코박테리아 3층 세포벽의 파괴에 기인한다. 글리콜 에테르는 강력한 용매이고 이들 고수준에서 구성 재료로서 사용되는 방대한 대부분의 플라스틱 및 고무류에 비적합성이다. US 5,444,094 조성물의 또다른 단점은 생성물이 살포자 특성을 나타내지 않고 (참조번호 966.04의 AOAC 공식 분석 방법 (1955) 살포자 시험에 따라) 따라서 고수준 소독제 ("HLD")는 아니라는 것이다. 영양형(vegetative) 포자를 박멸하기 위해 초음파를 사용하는 소독제가 제안되었다. 0.25% 농도 및 60℃ 이상의 온도에서 염화 벤제토늄은 그러한 목적으로 제안되었다. 그렇지만, 본명세서에서 나타낸 바와 같이 그러한 처리는 마이코박테리움에 대해 효과가 없고, 그 처리는 고수준 소독에 적합하지 않다. 준-중요 의료 장치 (즉, 내시경, 치과 장비 등과 같이 손상없는 피부 및 점막에 접촉하는 것)에 대해, 별도의 짧은 클리닝 및 소독 단계 및 횟수, 및 재사용가능한 용액을 사용하는 것이 현재의 의료 장치 사용자 관행이다. 담금 클리닝 또는 소독 횟수가 더 길어지거나 일회-사용 용액은 대부분에 대해 현재의 의료 또는 치과 관행에서 비경제적이고 비실용적이다. 명세서 전체에서 선행기술에 대한 어떠한 논의도 어떤 식으로든 본 분야에서 그러한 선행기술이 널리 공지되었거나 일반적인 상식의 부분을 형성하는 것을 인정하는 것으로 간주되어서는 안된다. 선행기술의 최소한 몇몇 단점들을 회피하거나 경감시키는 고수준 소독제를 제공하는 것이 본발명의 목적이다. 저장시 안정하고, 단시간 내에 효과적이고, 직업적 건강 위협이 상당히 감소된 고수준 소독제를 제공하는 것이 본발명의 바람직한 구체예의 목적이다. 본발명의 바람직한 구체예는 AOAC 살결핵균 시험에서 2-10분의 시간 내에 마이코박테리움 테르아이 ((Mycobacterium terrae)의 수가 로그 6 감소되도록 조절되어 바실러스 서브틸리스 (B. subtilis) 및 클로스트리듐 스포로게네스(C. sporogens) 포자 모두가 고수준 소독에 대한 FDA 요건 (출시전 고시 [510(k)] 액상 화학적 멸균제 및 고수준 소독제에 대한 제출, FDA 1993에 정의된 바와 같이) 에 따라 5시간 이내에 결과를 유도한다. 발명의 요약 제 1 양상에 따르면, 본발명은 4급 암모늄 화합물을 포함하는 조성물로 표면을 처리하는 단계를 포함하는, 표면의 고수준 소독 (본명세서에서 정의된 바와 같은) 방법 을 제공하는데, 여기서, 4급 암모늄 화합물의 농도는 1.0% w/w를 초과하도록 선택되고, 처리 온도는 30℃ 내지 80℃의 범위 내에 있도록 선택되고, 이에 의해 10분 이내에, 표면 상에, 존재한다면 결핵균의 로그 6 감소를 실현한다. 본발명의 바람직한 구체예에서, 4급 암모늄 화합물("quat")의 농도는 2% w/w를 초과하고, 바람직하게는 4% w/w 초과이다. 온도는 30℃ 초과, 바람직하게는 40℃, 더욱 바람직하게는 약 50℃ 초과까지 상승되어야만 한다. 그렇지만, 온도는 바람직하게는, 열저항상 재료 사용으로 80℃까지 상승할 수 있긴 하지만, 장비에 대한 손상의 관점에서 약 60℃를 초과하지 않는다. 바람직한 농도 및 온도의 선택은 5분 이내에 마이코박테리움 테르아이 (Mycobacterium terrae)에 있어서 로그 6 감소를 실현한다. 당업자라면 4급 암모늄 화합물이 고수준 소독을 제공하는 것이 불가능하다고 현재까지 알려져 있음을 이해할 것이다. 소독 분야에서 인정되는 매뉴얼인 Block (상기에서 언급됨)은 "4급 암모늄 화합물이 고농도 수준에서 친수성 바이러스에 대해 살결핵균 또는 살포자 또는 살바이러스성이 아니다"라고 기재한다. 저 수준 살독제로서 사용될 때 4급 암모늄 화합물은 주변온도 및 약 0.1% 내지 약 0.25%의 농도에서 표면에 대표적으로 적용된다. 선행문헌에는 4급 암모늄 화합물이 실온에서 어떠한 농도에서도 결핵균을 박멸할 수 있다는 점, 또는 30℃ 이상의 온도 상승이 4급 암모늄 화합물의 살생 효과에 어떠한 유리한 효과를 가진다는 점에 대해 어떠한 시사도 없다. 사실, 본발명자들은 주변온도 및 1% w/w 까지의 농도에서 4급 암모늄 화합물이 고수준 살균 능력이 없고, 심지어 2% w/w 이하에서도 실용적으로 짧은 시간 주기 동안 그러한 수준을 실현할 수 없다는 것을 발견하였다. 그러므로, 4급 암모늄 화합물을 이용함으로써 및 적절한 농도 및 처리 조건을 선택함으로써 실질적으로 단시간에 고수준 소독을 실현할 수 있음을 발견한 것은 놀라운 것이었다. 30℃ 내지 80℃의 선택된 온도는 열 및 다른 물리적 카오트로프 (chaotrope)에 의해 생성될 수 있다. 예를 들면, 열 (카오트로프임) 적용, 또는 전자기 방사선과 같은 물리적 카오트로피제 (예를 들면, 초음파, 마이크로파, UV, IR 또는 기타 방사선), 전기장 또는 자기장, 또는 심지어 진탕 또는 교반의 적용의 결과로 온도 증가될 수 있다. 에너지를 적용시키는 기타 방법은 자기 또는 보텍스 교반과 같은 기계적 수단으로부터의 전자기 방사 및 에너지 진동을 포함한다. 에너지는 전자빔 방사, 레이저, 전기분석 또는 고에너지 제트로부터의 입력일 수 있다. 그러한 카오트로피 영향의 조합은 유리하게 이용될 수 있다. 온도 증가는 기타 수단, 예를 들면 발열 화학 반응에 의해 또한 생성될 수 있다. 제 2 양상에 따르면, 본발명은 제 1 양상에 따른 방법에 있어서 조성물이 화학적 카오트로프를 추가로 포함하는 방법을 제공한다. 바람직한 카오트로프는 붕소 또는 붕소 화합물 또는 복합체이다. 바람직하게는 이 조성물은 예를 들면, EDTA와 같은 금속이온봉쇄제 (Sequestering Agent)를 포함한다. 카오트로프제는 수성 용액 내에서 소수성 입자의 용해도를 증가시키거나, 또는 비극성 용질 입자 및 미셀의 응집을 탈안정화시키거나, 또는 단백질을 변성 (접거나 푸는)시키는 경향을 갖는, 4급 암모늄 화합물 및 미생물의 혼합물과의 물리적 또는 화학적 상호작용이다. 본발명에서 사용되는 물리적 카오트로프는 상기에서 논의된 바와 같다. 금속 이온, 유기 및 무기 음이온, 우레아 등과 같은 특정 화학적 카오트로프는 단독으로 4급 암모늄 화합물과 함께, 또는 물리적 카오트로프와 조합하여 사용될 수 있다. 바람직하게는 카오트로피제의 조합이 사용된다. 제 3 양상에 따라서, 본발명은 제 1 또는 제 2 양상에 따른 방법에 있어서 조성물이 효소를 추가로 포함하는 방법을 제공한다. 제 4 양상에 따라서, 본발명은 선행하는 어느 한 양상에 따른 고수준 소독 (본명세서에서 정의된 바와 같은)의 방법에 사용하기 위한, 실시 농도에서 30℃에서 1% 초과의 4급 암모늄 화합물을 포함하는 조성물을 포함한다. 고수준 소독을 실현하기 위한 요구조건은, 본방법이 우형 결핵균에서 로그 6 감소를 실현하는 것 이외에, FDA에 의해 정의된 기타 요구조건을 만족시킬 수 있어야만 한다는 것을 암시한다는 점은 이해할 것이다. 본발명에 따른 바람직한 방법은 적절한 FDA 시험 방법 (24 시간 이내를 특정하는)에 따라 5 시간 미만 동안 바실러스 서브틸리스 및 클로스트리듐 스포로게네스 포자 모두에서 또한 로그 6 감소를 실현할 수 있다. 제 5 양상에 따르면, 본발명은 실시 강도에서 1% 초과의 농도의 4급 암모늄 화합물을, 카오트로피제이지만 포자 개방 화학 물질 (spore opening chemical)이 아닌 하나 이상의 화학물질과 조합하여 포함하는 고수준 소독제를 제공한다. 문맥상 분명히 다른 뜻인 경우를 제외하고, 발명의 상세한 설명 및 청구범위 전체를 통해, 단어 "포함한다", "포함하는" 등은 배타적인 또는 철저한 의미와 반대적인 포함적인 의미로 간주되어야 한다; 즉, "포함하지만, 제한되지는 않는"의 의미이다. 발명의 바람직한 구체예 본발명은 예시의 목적으로만 이제 더욱 상세히 설명될 것이다. 본발명은 고수준 소독을 실현하도록 선택된 조건하에서 4급 암모늄 화합물을 사용한다. 어떠한 상업적으로 이용가능한 4급 화합물이 본발명에서 적합하다. 4급 암모늄 화합물은 일반식 (R1R2R3R4N+)X-에 의해 나타내어질 수 있다. R1, R2, R3 및 R4는 독립적으로 알킬, 아릴, 알카릴, 아랄킬, 에테르 등과 같은 어떠한 적당한 치환된 또는 비치환된 선상 또는 환상기일 수 있다. 바람직하게는, 본발명에서 R1 및 R2는 1-3 탄소 원자를 갖는 알킬기로 구성된 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, R3는 8-20 탄소 원자를 갖는 알킬기로 구성된 그룹으로부터 선택되고, 및 R4는 8-20 탄소 원자를 갖는 알킬기, 아릴기 및 아릴-치환된, 1-3 탄소원자를 갖는 알킬기로 구성된 그룹으로부터 선택되고, X-는 상기 4급 암모늄 화합물이 수용성이 되도록 선택된다. 어떠한 적합한 4급 화합물이 사용될 수 있지만, 바람직하게는 본발명에서 사용되는 4급 화합물은 디알킬 4급 화합물이고 더욱 바람직하게는 알킬 중 하나가 18 미만의 길이의 사슬을 갖는 4급 화합물이다. 바람직하게는 알킬의 최소한 하나는 C14-C18 이고, C12가 매우 바람직하다. 4급 암모늄 화합물은 하나 이상의 알킬 사슬을 가질 수 있거나, 아릴 4급 암모늄 화합물일 수 있다. 4급 암모늄 화합물은 예를 들면 CHG이다. 반대이온 X-는 어떠한 적합한 반대이온일 수 있고, 무기 또는 유기 이온일 수 있다. X-의 적합한 예는 할로겐화물 (불화물, 염화물, 브롬화물 또는 요오드화물), 수산화물, 테트라플루오로보레이트, 포스페이트 또는 카보네이트를 포함하지만 이에 제한되는 것은 아니다. 본명세서에서 사용된 4급 암모늄 화합물이라는 용어는 또는 4급 암모늄 화합물의 혼합물을 포함한다. 본발명의 바람직한 형태에서, 선택된 조건은 카오트로피제의 조합의 적용을 포함한다. 예를 들면, 4% w/w에서 4급 암모늄 화합물은 말하자면 50℃에서, 열 또는 열 및 초음파와 함께 붕소 화합물과 조합하여 사용된다. 또는 또다른 예를 사용하여, 5% w/w에서 4급 암모늄 화합물은 온도가 40℃까지 상승하도록 에너지를 주입하면서 계면활성제 및/또는 적절한 용매와 함께 사용될 수 있다. 가열과 같은 에너지 주입이 접힘/풀림 (folding/unfolding) 평형에 있어서 포자 피막 및 마이코박테리움 세포 막 단백질/지단백의 풀림 쪽으로 유리하게 몰고가는 것을 돕는지, 또는 포자 표면의 "접근불가한" 부분에 대한 4급 암모늄 화합물 분자의 순간적 접근을 제공하는 것을 단지 돕는지 또는 단백질성 물질에 의해 4급 암모늄 화합물에 고유한 불활성화를 극복하는지, 또는 어떤 다른 방식으로 4급 암모늄 화합물 또는 표적화된 미생물을 활성화시키는데 효과적인지 아닌지는 불분명하다. 본발명의 매우 바람직한 형태에서, 4급 암모늄 화합물은 붕사의 존재 하에서 상승된 온도에서 프로티아제와 함께 사용된다. 선택된 조건은 온도를 30℃에서 80℃, 바람직하게는 40℃ 이상 및 60℃ 이하로 상승시키기 위한 에너지 주입을 포함한다. 60℃ 이상의 온도는 감열성 의료 장비의 구성 재료에 대한 온도의 치명적 효과로 인해 바람직하지 않다. 온도는 열을 인가함으로써 상승될 수 있지만, 에너지 주입은 초음파 에너지, 적외선 또는 마이크로파 방사선, 고압, 전기장 및/또는 자기장의 작용 및 심지어 진탕 또는 교반에 의할 수 있고, 이들 모두는 폴림 (다시 접힘)을 촉진하는데 효과적일 수 있다. 4급 암모늄 화합물과 함께 조합될 수 있는 화학적 카오트로프는 다음을 포함한다: (1) 단백질을 변성, 용해 또는 팽창시키는 경향이 있는 종류의 선택된 유기 용매. 일반적으로 생성물은 완전히 풀리지는 않고 자연 상태와 다른 정렬된 구성을 갖는다. 나선형 구성 (즉 풀림)에 유리한 용매는 N-디메틸포름아미드, 포름아미드, m-크레졸, 디옥산, CHCl3, 피리딘, 디클로에틸렌, 및 2-클로로에탄올에 의해 예시된다. 이 그룹은 또한 알콜, 에탄올, n-프로판올, 메탄올 (특히 0.01% HCl과의 혼합물 형태)와 같은 수소 결합을 형성하는 약한 경향이 있는 용매 및 고농도에서의 디메틸설폭사이드 (DMSO), 디클로로아세트산 및 트리플루오로아세트산, 및 기타 친전자성 용매와 같이 구조를 해체하는 경향을 갖는 용매를 포함한다. 광범위한 대부분의 이들 화합물은 포자 개방제 (spore-opener)로서 작용과 반대로, 포자 피막을 실질적으로 강화시킨다. (2) 특정 유기 용질, 및 우레아 또는 염산 구아니딘 (GuHCl)과 같은 카오트로피제. 랜덤하게 꼬여진 폴리펩티드로의 전이는 일부 예외적으로 안정한 단백질을 제외하고 실온에서 6-8 M GuHCl에 대해 완전하다. 이들 시약은 온도, pH 기타 시약 및 조건에 의해 현저히 영향을 받을 수 있다. 무기 염은 단백질에서 구조 (conformation) 전환을 유도할 수 있다. 예를 들면, LiBr, CaCl2, KSCN, NaI, NaBr, 붕사, 아지드나트륨은 강력한 변성화제이다. 비록 이들 염이 반드시 완전히 풀린 단백지을 유도하는 것은 아니지만, 남은 정렬된 구조는 에너지 주입, 즉 온도 상승에 의해 파괴될 것이다. CNS-003e#I-003e#Br-003e#NO3-003e#Cl-003e#CH3COO-003e#SO42-와 같은 음이온은 구아니디늄 염 및 테트라알킬 암모늄염과 비슷한 거동을 나타낸다. 그렇지만, (GuH)2SO4는 변성에 대해 특정 단백질을 보호하는 것으로 관찰되었다. 붕소는 화합물 또는 복합체의 형태로 사용될 수 있다. 특정 표면 및 제올라이트를 포함하는 계면, 공기/액체 계면을 포함하는 계면에 대한 흡착. (3) 예를 들면 프로티아제, 아밀라제, 리피다제, 셀룰라제 등과 같은 효소.