효모 세포 표면에 디스플레이되는 ＡｐｘＩＩＡ 단백질의 제조방법 및 사료 첨가제로서의 이의 용도 document_id A220623062610

파스퇴렐라세애(Pasteurellaceae) 과의 하나인 돼지 흉막 폐렴균 악티노바실러스 플루로뉴모니애(Actinobacillus pleuropneumoniae; APP)에 의해 발생하는 돼지 흉막 폐렴은 전염성, 섬유소성, 출혈성 그리고 괴사성의 폐 손상이 발생하는 질병이다. 또한, 급성으로 발생할 경우 돼지에서 이환율과 사망률이 매우 높으며, 출혈성, 괴사성 폐렴과 섬유소성 흉막염이 주특징인 질병이다. 악티노바실러스 속에 속하는 세균은 모두 소위 RTX 독소를 생산한다. 이러한 RTX 독소의 존재는 악티노바이러스 세균의 주요한 병원성 특징이다. RTX 독소는 문헌(Braun et al., Critical Rev. in Microbiol. (1991) 18(2): 115-158)에 의해 검토된 바 있다. 또한, 그람 음성 균주들의 RTX 독소는 문헌(Welch, R.A., Molecular Microbiology (1991) 5/3: 521-528) 및 문헌(Welch et al., Inf. Agents and Disease (1995) 4: 254-272)에서 검토된 바 있다. 모든 공지된 RTX 독소는 몇가지 세포독성 또는 세포용해 활성을 갖는다. 하지만, 독소와 아실화의 차이에 따라 표적 세포 특이성 및 숙주 특이성이 달라지는 것으로 공지되어져 있다(McWhinney et al., J. Bact. (1992) 174: 291-297; and Hackett et al., J. Biol. Chem. (1995) 270: 20250-20253). 표적 세포의 차이에 따라, RTX 독소에 속하는 다양한 독소들이 알려져 있고, 헤모리신, 세포용해소 또는 세포 독소가 포함된다. 악티노바실러스 속에는 다수의 여러 종이 포함되며 예를 들면, 악티노바실러스 플루로뉴모니애, 에이. 악티노마이세템코미탄스(A. actinomycetemcomitans), 에이. 수스(A. suis), 에이. 로시(A. rossi), 에이. 에쿨리(A. equuli) 및 에이. 리그니에레시(A. lignieresii) 등이 있다. 이중에서 특히, 악티노바실러스 플루로뉴모니애는 돼지, 말, 소 및 인간의 적혈구에 대해서, 토끼와 돼지의 호중구에 대해서, 및 돼지의 폐포 대식세포에 대해 세포독성/세포용해성인 혈청형 의존적 RTX 독소를 생산하는 것으로 공지되어져 있다. 흉막 폐렴균의 병원성은 숙주 환경적 요인, 전염원과 관련된 여러요소의 다양한 특성을 포함하는 다인자에 의하여 발생하는 질병이다. 본 질병의 원인체인 APP는 RTX(Repeats in Toxins) 독소군에 속하는 Apx 독소를 포함한 많은 병원성 인자들을 생성한다. 흉막 폐렴의 병원성에 있어서 Apx 독소의 중요성은 자발적으로(spontaneous) 또는 화학적으로(chemically) 유도되거나, 트랜스포존(transposon)을 이용한 돌연변이체 (mutants)등을 이용한 여러 가지 방법을 통하여 규명되어졌다(Anderson C et al., Infect. Immun. (1991) 59: 4110-4116). 현재까지, 이들 독소는 ApxI, ApXII, ApxIII 그리고 ApxIV의 네 가지가 밝혀져 있으며, 원인균은 협막 다당체(capsular polysacchride)에 따라서 15가지 혈청형이 밝혀졌으며, 이들 세포 독소의 생성은 혈청형에 따라서 다양하게 분비되며, 이들 혈청형의 분포는 지역에 따라 차이를 보이고 있다. 한국에서 가장 유행하는 혈청형은 2형, 5형 그리고 6형의 순서이다. 비록 흉막 폐렴균의 병원성이 다양하지만, 많은 연구들이 가장 강한 병원성을 나타내는 ApxI과 ApxII의 독소를 생산하는 혈청형과 밀접하게 연관되어 있음을 지적하고 있다. ApxI은 강한 용혈 작용을 나타내는 반면, ApxII는 상대적으로 낮은 용혈 작용을 보이나 두 독소 모두 다른 유형과 다른 종의 세포에 대하여 활발한 세포 독성을 가지고 있다. 이에 반하여, ApxIII는 용혈작용은 없으나 돼지 폐포 대식세포와 호중구를 포함한 세포에 세포독성을 가지고 있다. 그러나, 모든 혈청형에서 분비되는 ApxIV의 병원성과 관련된 역할은 아직까지도 명확하게 밝혀지지 않았다. 또한, 현재까지 Apx 독소들을 모두 분비하는 혈청형은 확인되지 않았으며 ApxII는 혈청형 10형을 제외한 모든 혈청형에서 생산된다. 한편, 대한민국 등록특허 제0465347호에서는 '효모에서 악티노바실러스 플루로뉴모니애의 재조합 ApxIIA 독소 단백질을 제조하는 방법 및 사료 첨가제로서의 이의 용도'가 개시되어 있으나, 본 발명에서와 같이 재조합 ApxIIA 단백질을 효모 세포 표면에 디스플레이시켜 돼지 흉막 페렴에 대한 면역원성 및 방어 면역 능력을 향상시킨 경구백신의 개발방법에 대해서는 밝혀진 바가 전혀 없다.