항 Ａ 베타 항체의 정제 방법 document_id A220623062655

알츠하이머 병(Alzheimer's disease; "AD")은 아밀로이드 플라크(amyloid palque)와 신경 섬유의 다발성 병변(neurofibrillary tangle)의 형성 및 심각한 신경 세포의 손실을 특징으로 하는 신경 퇴행성 질환이다. 노인성 플라크(senile plaque)의 주성분인 β-아밀로이드 단백질(Aβ 펩티드라고도 부름)은 알츠하이머 병의 병인이다[Selkoe (1989) Cell 58:611-612; Hardy (1997) Trends Neurosci. 20:154-159]. β-아밀로이드는 배양 뉴런에 직접적으로 악영향을 미칠 뿐만 아니라[Lorenzo and Yankner (1996) Ann. NY Acad. Sci. 777:89-95], 다양한 매개 인자를 통해 간접적으로 악영향을 미치기도 한다는 사실이 밝혀진 바 있다[Koh et al. (1990) Brain Research 533:315-320; Mattson et al. (1992) J. Neurosciences 12:376-389]. 뿐만 아니라, 생체 내 모델 예를 들어, PDAPP 마우스 및 래트 모델을 통하여, β-아밀로이드가 학습 장애, 인지 능의 변질 그리고 해마의 장기 상승 작용의 억제에 관여한다는 사실이 규명되었다[Chen et al. (2000) Nature 408:975-985; Walsh et al. (2002) Nature 416:535-539]. 그러므로, 연구의 초점은 알츠하이머 병의 심각성을 잠재적으로 감소시키거나 이 질병 자체를 완치시키기 위해 β-아밀로이드 수준을 변경시키는 치료에 맞추어져 오고 있다. 최근 PDAPP 마우스 및 래트의 실험 모델을 통한 연구에서 성공을 거둠으로써 부상한 AD 치료 방법의 한가지 예로서는, 면역 글로불린 예를 들어, β-아밀로이드에 특이적인 항체를 제공하는, 개체의 수동 면역화 방법이 있다[예를 들어, Bard et al. (2000) Nat. Med. 6:916-919 및 Bard et al (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100:2023-2028 참조]. 뿐만 아니라, 최근 들어, 수동 면역화를 통하여 Aβ를 감소시킬 경우, 트랜스게닉 마우스의 알츠하이머 병 모델에 있어서 시냅스 변성과 같은 점진적 상실 현상을 막아주는 것으로 규명된 바 있다[Buttini et al. (2005) J. Neurosci. 25:9096-101]. 최근에는 재조합 기술이 발달함에 따라서 실질적으로 임의의 표적 예를 들어, 암 세포, 박테리아 및 바이러스에 대한 항체도 생산할 수 있게 되었다. 통상적으로, 항체는 항체를 높은 수준으로 발현하도록 조작된 세포주를 사용하여 생산된다. 결과적으로, 조작된 세포주는 당, 아미노산 및 성장 인자와, 다양한 단백질 예를 들어, 혈청 단백질의 복합적인 혼합물을 포함하는 배양액 중에서 생육된다. 그러나, 세포의 부산물과 배양액 성분들로부터 항체를 완벽하게 즉, 연구용 또는 치료용으로서 사용하기에 충분한 정도의 순도로 분리해 내는 데는 치명적인 한계가 있다. 항체 분자가 인간에게 투여되는 의약품으로서 사용되는 경우, 항체 분자의 정제는 특히 중요하다. 통상적인 항체 정제 계획(또는 전략)은 종종, 크로마토그래피 컬럼의 고상(즉, 작용화된 고상)에, 여러가지 불순물에 비하여 우선적으로 결합하거나 또는 이에 체류하게 되는 항체 분자의 능력을 이용하는 크로마토그래피 단계를 포함한다. 이러한 계획은, 우선, CH2/CH3 부위-함유 단백질과 고상에 고정되어 있는 단백질 A를 결합시켜 항체를 정제한 후, 이 고상을 소수성 전해질 용매로 세척함으로써 고상에 결합되어 있던 불순물을 제거하여, 마지막으로는 이 고상으로부터 CH2/CH3 부위-함유 단백질을 회수하는 순서로 제시되거나 또는 수행되었다. 그러나, 이러한 계획은, CH2/CH3 부위-함유 단백질을 우선적으로 결합시키는데 적용되는 조건이 불순물(예를 들어, 불완전 CH2/CH3 부위를 포함하는 항체)의 결합 또한 허용한다는 점에서 한계가 따른다. 인간의 치료제를 개발함에 있어서, 이러한 불순물은 매우 바람직하지 못하다. 그러므로, 세포 배양액 중에서 생산된, 불변부를 가지는 단백질 또는 폴리펩티드, 특히, Fc 부위를 가지는 단백질(예를 들어, 항체)을 정제하는 방법을 개선할 필요가 있는 것이다. 발명의 개요 본 발명은 Aβ-결합 단백질, 구체적으로, Aβ-결합 항체의 정제 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 특히 인간에게 투여하기 위해 개발한 단백질(예를 들어, 항체)의 정제에 적당하다. 구체적으로, 본 발명은 세포 배양액 중에서 생산된, 불변부를 가지는 단백질, 특히, Fc 부위를 가지는 단백질(예를 들어, 항체)의 정제에 관한 것이다. 다양한 측면에서, 본 발명은 Fc 부위를 가지는 Aβ 결합 단백질 예를 들어, 항-Aβ 항체를, 단백질 및 하나 이상의 불순물을 포함하는 원액으로부터 분리하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에 있어서, Aβ 결합 단백질은 Fc 결합제에 흡착되는데, 이후 이 Fc 결합제는 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액으로 세척되어, 이것으로부터 하나 이상의 불순물이 제거된다. 이후, 이 단백질은 용리 용액에 의해 Fc 결합제로부터 회수된다. 본 발명의 방법은 불순물 예를 들어, 인트론 리드쓰루 변이종(intron read through variant species; IRT), 디설파이드 (disulfide) 결합 부족 종(under disulfide bonded species; UDB) 및/또는 저 분자량 변이종(low molecular weight variant species; LMW)을 제거하는데 특히 유용하다. 본 발명의 방법은 또한 불순물 예를 들어, 숙주 세포 단백질(HCP) 및 DNA를 제거하는데에도 유용하다. 본 발명의 방법은 하나 이상의 크로마토그래피 분리 단계를 포함할 뿐만 아니라, 하나 이상의 여과 단계도 포함할 수 있다. 크로마토그래피 분리 단계는 연속적이거나 불연속적(예를 들어, 회분 방식)일 수 있거나, 아니면 이 두 가지 방식을 조합한 방식일 수 있다. 다양한 구체예에 있어서, 본 발명의 방법은 예를 들어, 바이러스를 제거하고, 표적 단백질을 함유하는 용액을 농축 및 완충하며, 또한 미생물 오염물을 제거하기 위한 하나 이상의 여과 단계를 포함한다. 다양한 구체예에서, 항-Aβ 항체는 뮤린(murine)의 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 또는 인간의 항체이다. 몇몇 구체예에서, 상기 항-Aβ 항체는 Aβ의 1∼7, 1∼5, 3∼7, 3∼6, 13∼28, 15∼24, 16∼24, 16∼21, 19∼22, 33∼40, 33∼42번 위치의 잔기 내에 존재하는 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체이다. 대표적인 항 Aβ 항체는 Aβ의 1∼10번 잔기 예를 들어, Aβ의 1∼7, 1∼5, 3∼7 또는 3∼6번 잔기 내에 존재하는 에피토프에 특이적으로 결합한다. 기타 대표적인 항 Aβ 항체는 Aβ의 13∼28번 잔기 예를 들어, Aβ의 16∼21 또는 19∼22번 잔기 내에 존재하는 에피토프에 특이적으로 결합한다. 또 다른 대표적인 항 Aβ 항체는 Aβ의 C 말단 에피토프 예를 들어, Aβ의 33∼40 또는 33∼42번 잔기 내에 존재하는 에피토프에 특이적으로 결합한다. 몇몇 구체예에 있어서, 항 Aβ 항체는 Aβ의 1∼7번 및 13∼28번 잔기를 포함하는 불연속적 에피토프에 결합한다. 다른 구체예는 항-Aβ 항체의 Fab, Fab'(2) 또는 Fv 단편에 관한 것이다. 이와 같은 몇몇 구체예에 있어서, 항체는 이중 특이적 항체이거나 또는 국제 특허 공보 제 WO 03/070760에 개시된 방법에 의하여 생산된 항체이다. 바람직한 구체예에 있어서, 본 발명의 항체는 인간화 항-Aβ 항체이고, 몇몇 구체예에서, 이 항체는 3D6, 10D5, 12B4, 12A11, 15C11 및 266으로 이루어진 군으로부터 선택되는 항-Aβ 항체이다. 이 항체의 동 기준 표본은 IgM, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 또는 기타 임의의 약학적으로 허용 가능한 동 기준 표본일 수 있다. 바람직한 구체예에서, 동 기준 표본은 인간 IgG1 또는 인간 IgG4이다. 다양한 구체예에서, Aβ 결합 단백질은 재조합적으로 생산된다. 다양한 구체예에서, Aβ 결합 단백질은 중국 햄스터 난소(CHO) 세포에서 재조합적으로 생산된다. 다양한 구체예에서, 하나 이상의 불순물은 숙주 세포 단백질, 숙주 세포 DNA, 세포 배양 단백질, Aβ 결합 단백질의 원치 않는 종 및 이의 혼합물 중 하나 이상을 포함한다. 예를 들어, 다양한 구체예에 있어서, Aβ 결합 단백질의 원치 않는 종은 인트론 리드쓰루 서열을 가지는 항체 사슬 또는 이의 단편, 부적당한 디설파이드 결합을 가지는 항체 사슬 또는 이의 단편, 반항체(half-antibody) 또는 이의 단편, 경쇄 이량체 또는 이의 단편, 그리고 중쇄 이량체 또는 이의 단편 중 하나 이상을 포함한다. 하나의 측면에서, 본 발명의 방법은, 처음에는 단백질과 Fc 결합제를 흡착시키고, 그 다음 이 Fc 결합제를 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액으로 세척하여 하나 이상의 불순물을 제거한 후, 이 Fc 결합제로부터 단백질을 회수함으로써, 단백질 및 하나 이상의 불순물을 포함하는 원액으로부터 Aβ 결합 단백질, 바람직하게는 항-Aβ 항체를 정제하는 방법이다. 다양한 구체예에 있어서, 상기 단백질을 Fc 결합제에 흡착시키는 단계 및 이 Fc 결합제를 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액으로 세척하는 단계는 약 2℃∼약 24℃의 온도에서 수행된다. 다양한 구체예에서, Fc 결합제로부터 단백질을 회수하는 단계는, pH 약 2.0∼약 6.5인 용리 완충액을 사용하여 단백질을 용리시키는 과정을 포함한다. 다양한 구체예에서, Fc 부위 결합제는 단백질 A 및 단백질 G 중 하나 이상을 포함한다. 바람직한 구체예에서, Fc 결합제는 고상에 고정된다. 이와 같은 고상은 예를 들어, 비드, 아가로스 매트릭스, 실리카 중 하나 이상과, 이의 혼합물을 포함할 수 있다. Fc 결합제를 세척하는데 사용되는 완충액 중에 존재하는 2가 양이온 염은 예를 들어, 카오트로픽 염(chaotropic salt)을 포함할 수 있다. 세척 완충 용액의 제조에 적당한 2가 양이온 염으로서는 염화마그네슘, 염화칼슘, 염화니켈 및 이의 혼합물을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 다양한 구체예에서, 세척 완충 용액의 제조용으로서 적당한 2가 양이온 염으로서는 2족 원소(예를 들어, 마그네슘, 칼슘 및 바륨 등)의 2가 양이온, 전이 금속 원소(예를 들어, 구리, 니켈 및 망간 등)의 2가 양이온의 티오시안산염(SCN-), 과염소산염 (ClO4-), 질산염(NO3-), 염화물, 및 브롬화물 염, 그리고 이들 염의 조합을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 다양한 구체예에서, 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액의 pH값은 약 4∼약 9이고, 몇몇 구체예에서는 약 4∼약 8, 약 4.5∼약 7.5 또는 약 6∼약 8이다. 본원에 제시된 범위 내에 포함되고/포함되거나 이의 중간값에 해당하는 pH값과 이의 범위는 본 발명의 범위 내에 포함된다. 예를 들어, 2가 양이온 염의 pH값은 약 7.1∼약 7.9, 약 7.2∼약 7.9, 약 7.3∼약 7.7, 약 7.4∼약 7.6, 약 4∼약 5, 약 5∼약 6, 약 6∼약 7, 또는 약 8∼약 9이다. 뿐만 아니라, 본원에 언급된 수치를 상한선 또는 하한선으로 가지는 범위도 본 발명의 범위 내에 포함된다. 예를 들어, 2가 양이온 염의 pH값은 약 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5 또는 8 이상(또는 이 pH 범위 내의 pH)이다. 다양한 구체예에서, 완충 용액의 2가 양이온 염의 농도는 약 0.1 M∼약 5 M이고, 몇몇 구체예에서는 약 0.5 M∼약 3 M, 약 1.0 M∼약 3 M 또는 약 0.6 M∼약 2.5 M이다. 예를 들어, 2가 양이온 완충액은 약 0.6 M 이상의 CaCl2, 또는 약 2 M 이상의 MgCl2 또는 약 2 M 이상의 CaCl2를 포함할 수 있다. 본원에 제시된 범위 내에 포함되고/포함되거나 이 범위의 중간값에 해당하는 수치 및 범위 또한 본 발명의 범위 내에 포함된다. 예를 들어, 완충 용액 중 2가 양이온 염의 농도는 약 0.5 M∼약 0.75 M, 약 0.5 M∼약 0.8 M, 약 0.5 M∼약 0.9 M, 약 0.5 M∼1.0 M, 약 0.5 M∼2 M, 약 1.5 M∼약 2.0 M, 약 1.5 M∼약 2.5 M, 약 1.5 M∼약 3.0 M, 또는 약 2.5 M∼약 3 M이다. 뿐만 아니라, 본원에 상한선 또는 하한선으로서 언급된 수치를 가지는 범위는 본 발명의 범위에 포함된다. 예를 들어, 완충 용액의 2가 양이온 염의 농도는 약 0.6M, 1M, 1.5M, 2M, 2.5M 또는 3M 이상(또는 이 농도 범위 내의 농도)이다. 다양한 구체예에서, 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액의 온도는 약 2℃∼약 24℃이다. 다양한 구체예에서, Fc 결합제로부터 항체를 회수하는 단계는, pH 범위 약 2.0∼약 6.5, 바람직하게는 약 2.0∼약 4.0, 더욱 바람직하게는 약 2.5∼약 3.5인 용리 완충액을 사용하여 항체를 용리시키는 과정을 포함한다. 본원에 제시된 범위 내에 포함되고/포함되거나 이 범위의 중간값에 해당하는 수치 및 범위도 본 발명의 범위 내에 포함된다. 예를 들어, 용리 완충액의 pH는 약 2∼약 3 또는 약 3∼약 4이다. 더욱이, 본원에 언급된 수치를 상한선 또는 하한선으로 가지는 범위는 본 발명의 범위 내에 포함된다. 예를 들어, 용리 완충액의 pH는 약 2, 2.5, 3, 3.5 또는 4(또는 이 pH 범위 내의 pH)이다. 다양한 구체예에서, 회수된 단백질에 대해서는 Fc 결합제의 크로마토그래피 단계 이전, 또는 이후에 행하여지는 부가의 정제 단계를 수행할 수 있다. 예를 들어, 대표적인 추가의 정제 단계로서는 음이온 교환 크로마토그래피, 양이온 교환 크로마토그래피, 고정 금속 친화성 크로마토그래피, 소수성 상호 작용 크로마토그래피(HIC), 하이드록시아파타이트 크로마토그래피, 투석, 친화성 크로마토그래피, 황산암모늄 침전법, 에탄올 침전법, 역상 HPLC(RP-HPLC), 크로마토포커싱(chromatofocusing), 한외 여과법, 정용 여과법, 미세 여과법 및 겔 여과법을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 다양한 구체예에서, Fc 결합제 크로마토그래피 단계 이후에는 음이온 교환 크로마토그래피 및 HIC 단계가 수행된다. 다양한 구체예에서, 크로마토그래피 단계 이후에는 또한 바이러스 여과 단계, 한외 여과/정용 여과 단계 및/또는 미생물 오염물 여과 단계가 수행된다. 하나의 측면에서, 본 발명은 불순물-함유 용액으로부터 Aβ 결합 단백질, 바람직하게는 항-Aβ 항체를 정제하는 방법을 제공한다. 다양한 구체예에서, 본 발명의 방법은 우선, 단백질을 Fc 결합제에 흡착시키는 단계 → 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액으로 Fc 결합제를 세척하여 하나 이상의 불순물을 제거하는 단계 → Fc 결합제로부터 단백질을 회수하여 첫 번째 용리 풀을 마련하는 단계를 포함한다. 다양한 구체예에서, 정제 과정 이후에는 계속해서 첫 번째 용리 풀을 이온 교환 크로마토그래피시키는데, 즉, 이온 교환 수지와 첫 번째 용리 풀을 접촉시켜 표적 단백질이 수지에 흡착되지 않도록 만들고, 또한 이후에 소통 중인(flow-through) 표적 단백질을 회수하여 두 번째 용리 풀을 마련한다. 다양한 구체예에서, 이온 교환 크로마토그래피 단계는 또한 이온 교환 수지를 완충 세척 용액으로 세척하여 임의의 흡착된 표적 단백질 중 최소한의 일부를 회수하는 단계를 더 포함한다. 다양한 구체예에서, 정제 과정 이후에는 계속해서 두 번째 용리 풀을 소수성 상호 작용 크로마토그래피시키는데, 즉, 표적 단백질을 소수성 상호 작용 수지(예를 들어, 소수성 리간드로 작용화된 고상)에 흡착시키고, 또한 표적 단백질을 실질적으로 용리시키지 않는 정도의 이온 세기를 가지는 완충 세척 용액으로 소수성 상호 작용 수지를 세척함으로써, (통상적으로 소수성 상호 작용 수지로부터 표적 단백질을 방출시키는데 충분한 만큼 낮은 이온 세기를 가지는 용리 완충액을 이용하여) 정제된 표적 단백질을 회수한다. 본 발명의 다양한 측면의 바람직한 구체예에서, Fc 결합제는 바람직하게는, 원액과 접촉하기 이전에 적당한 완충액으로 평형화된 고상에 고정된다. 상기 고상은 Fc 결합제를 고정시키는 아가로스를 포함하는 컬럼인 것이 바람직하다. 다양한 구체예에서, 상기 컬럼은 컬럼에 비특이적으로 부착되는 것을 줄여주거나 또는 막아주는 시약 예를 들어, 글리세롤로 코팅된다. 다양한 구체예에서, 본 발명의 방법에 의해 정제된 단백질은 약학적으로 허용 가능한 담체 중에 제형화되어, 진단용, 치료용 또는 이러한 분자가 사용되는 것으로 알려져 있는 기타 여러 분야에 사용될 수 있다. 다양한 측면에서, 본 발명은 단백질 및 이의 인트론 리드쓰루 변이체(IRT)를 함유하는 용액으로부터 Aβ 결합 단백질, 바람직하게는 항-Aβ 항체를 정제하는 방법을 제공한다. 바람직한 측면에서, 본 발명의 방법은 단백질 제제 예를 들어, 항체 제제 중 하나 이상의 인트론 리드쓰루 변이종의 수준을 감소시키는데 사용된다. 다수의 구체예에서, Fc 결합제로부터 회수된 단백질의 인트론 리드쓰루 변이체의 수준은, 원액 중 인트론 리드쓰루 변이체 수준보다 5배 이상 낮으며, 몇몇 구체예에서는 원액 중 인트론 리드쓰루 변이체 수준보다 10배 이상 낮다. 다양한 구체예에서, 인트론 리드쓰루 변이체는 Fc 결합제로부터 회수된 단백질을 함유하는 용액 중 이 단백질 종의 약 1.0%, 0.8%, 0.5%, 0.2% 또는 0.1% 미만을 구성한다. 다양한 측면에서, 본 발명은 단백질 및 이의 저 분자량 변이체(LMW)를 함유하는 용액으로부터 Aβ 결합 단백질, 바람직하게는 항-Aβ 항체를 정제하는 방법을 제공한다. 바람직한 측면에서, 본 발명의 방법은 단백질 제제 예를 들어, 항체 제제 중 하나 이상의 저 분자량 변이종의 수준을 감소시키는데 사용된다. 다수의 구체예에 있어서, Fc 결합제로부터 회수된 단백질의 저 분자량 변이체 수준은, 원액 중 저 분자량 변이체 수준보다 5배 이상 낮으며, 몇몇 구체예에서는 원액 중 저 분자량 변이체 수준보다 10배 이상 낮다. 다양한 구체예에서, 상기 저 분자량 변이체는 Fc 결합제로부터 회수된 상기 단백질을 함유하는 용액 중 상기 단백질 종의 약 1.0%, 0.8%, 0.5%, 0.2% 또는 0.1% 미만을 구성한다. 다양한 측면에서, 본 발명은 단백질 및 이의 디설파이드 결합 부족 변이체(UDB)를 함유하는 용액으로부터 Aβ 결합 단백질, 바람직하게는 항-Aβ 항체를 정제하는 방법을 제공한다. 바람직한 측면에서, 본 발명의 방법은 단백질 제제 예를 들어, 항체 제제 중 하나 이상의 디설파이드 결합 부족 변이종의 수준을 감소시키는데 사용된다. 다양한 구체예에서, Fc 결합제로부터 회수된 단백질의 디설파이드 결합 부족 변이체의 수준은, 원액 중 디설파이드 결합 부족 변이체 수준보다 5배 이상 낮으며, 몇몇 구체예에서는 원액 중 디설파이드 결합 부족 변이체 수준보다 10배 이상 낮다. 다양한 구체예에서, 상기 디설파이드 결합 부족 변이체는 Fc 결합제로부터 회수된 상기 단백질을 함유하는 용액 중 상기 단백질 종의 약 20%, 15%, 10%, 5%, 2% 또는 1% 미만을 구성한다. 다른 측면에서, 본 발명은 우선, Fc 결합제를 단백질과 흡착시키는 단계 → 이 Fc 결합제를 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액으로 세척하여 하나 이상의 불순물을 제거하는 단계 → Fc 결합제로부터 단백질을 회수하는 단계 중 최소한의 단계들을 포함하는 방법 중 임의의 방법에 따라서 정제된, Aβ 결합 단백질, 바람직하게는 항-Aβ 항체를 제공한다. 다양한 구체예에서, 상기 항-Aβ 항체는 3D6, 10D5, 12B4, 12A11, 15C11 및 266으로 이루어진 군으로부터 선택되는 인간화 항-Aβ 항체이다. 다양한 구체예에서, 항-Aβ 항체는 3D6, 10D5, 12B4, 12A11로 이루어진 군으로부터 선택되는 인간화 항-Aβ 항체이다. 다른 측면에서, 본 발명은 우선, Fc 부위를 가지는 Aβ 결합 단백질 예를 들어, 항-Aβ 항체를 Fc 결합제에 흡착시키는 단계 → 이 Fc 결합제를 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액으로 세척하여 하나 이상의 불순물을 제거하는 단계 → Fc 결합제로부터 단백질을 회수하는 단계 중 최소한의 단계들을 포함하는 방법 중 임의의 방법을 수행하는데 적당한 시스템을 제공한다. 다른 측면에서, 본 발명은 우선, Aβ 결합 단백질, 바람직하게는 항-Aβ 항체를 Fc 결합제에 흡착시키는 단계 → 이 Fc 결합제를 2가 양이온 염을 함유하는 완충 용액으로 세척하여 하나 이상의 불순물을 제거하는 단계 → Fc 결합제로부터 단백질을 회수하는 단계 중 최소한의 단계들을 포함하는 방법 중 임의의 방법을 수행하기 위한 정제 기법을 제공한다. 본 발명은 또한 다양한 측면에서, 본 발명의 방법 중 하나 이상의 방법을 수행하는데 사용되는 키트에 관한 것이기도 하다. 다양한 구체예에서, 이 키트는 하나 이상의 시약과 이 키트의 사용 설명서를 포함한다. 예를 들어, 이 키트는 이 키트의 사용 설명서와 함께, 예를 들어, Aβ 결합 단백질 예를 들어, 항-Aβ 항체를 정제하기 위한 하나 이상의 시약 예를 들어, Fc 결합제, 2가 양이온 염 및 2가 양이온 염을 함유하는 완충 세척 용액 제조용 시약을 포함한다.