안질환 치료를 위한 보체 경로 억제제의 용도 document_id A220623064722

황반 변성은 브루크 (Bruch) 막, 맥락막, 신경 망막 및/또는 망막 색소 상피의 이상과 연관된 중앙 시력의 진행성 상실을 특징으로 하는 질병군을 설명하기 위해 사용되는 임상 용어이다. 망막의 중심에 직경이 약 1/3 내지 1/2 cm인 황반이 존재한다. 원뿔세포가 보다 더 고밀도이므로, 황반은 특히 중앙 (오목)에서 상세한 시력을 제공한다. 혈관, 신경절 세포, 내부 핵층 및 세포, 및 얼기층은 모두 한쪽 측면에 배치되어 (원뿔세포 위에 놓이기 보다는), 광의 원뿔세포에 대한 보다 직접적인 경로를 허용한다. 망막 아래에, 섬유 조직 내에 묻힌 혈관의 집합체인 맥락막, 및 맥락막층 위에 놓이는 색소 상피 (PE)가 존재한다. 맥락막 혈관은 망막 (특히 그의 시각 세포)에 영양을 제공한다. 맥락막 및 PE는 눈의 전방에서 발견된다. PE를 구성하는 망막 색소 상피 (RPE) 세포는 광수용체의 정상 기능 및 생존을 담당하는 다양한 인자를 생산하고 저장하고 수송한다. 상기 다기능 세포는 대사체를 그들의 혈액 공급원인 눈의 맥락막 모세혈관으로부터 광수용체로 수송한다. RPE 세포는 또한 세포 생리학의 정상 과정에서 생산되는 막대세포 및 원뿔세포의 외부 절편의 끝을 포식하는 대식세포로서 기능한다. 다양한 이온, 단백질 및 물이 RPE 세포와 광수용체간 공간 사이에 이동하고, 이들 분자는 궁극적으로 광수용체의 대사 및 생활력에 영향을 미친다. 가장 우세한 황반 변성인 노인성 황반 변성 (AMD)은 시야의 중앙부에서 시각의 진행성 상실, 색 식별력의 변화, 및 비정상적인 암 순응 및 민감도와 연관된다. AMD의 2가지 주요 임상 소견은 건조형 또는 위축형, 및 습윤형 또는 삼출형으로서 설명되었다. 건조형은 읽기, 운전 또는 안면 인식과 같은 활동에 사용되는 미세 시력을 위해 요구되는 중앙 망막 또는 황반의 위축성 세포 사멸과 연관된다. 상기 건조 AMD 환자의 약 10-20%는 습윤 AMD로서 알려진 AMD의 제2형으로 진행한다. 습윤 (신생혈관/삼출) AMD는 망막의 전위, 출혈 및 반흔 형성을 일으키는, 황반 아래에서 망막 뒤의 혈관의 비정상적인 성장 및 혈관 누출에 의해 유발된다. 이는 수개월 내지 수년에 걸쳐 시력을 악화시킨다. 그러나, 환자는 급속한 시력 상실을 경험할 수 있다. 모든 습윤 AMD 환자는 진행된 건조 AMD로부터 기원한다. 습윤형은 AMD로 인한 실명의 85%를 차지한다. 습윤 AMD에서, 혈관은 유체와 혈액을 누출하므로, 중앙 망막을 파괴하는 반흔 조직이 형성된다. 두 형태의 발병에서 가장 유의한 위험 인자는 연령 및 망막 색소 상피 뒤에서 비정상적인 세포외 침착물인 결정체 (drusen)의 침착이다. 결정체는 RPE 단층의 측면 스트레칭 및 그의 직접적 혈관 공급원인 맥락막 모세혈관으로부터 RPE의 물리적인 전위를 일으킨다. 상기 전위는 맥락막 모세혈관과 망막 사이에서 정상적인 대사체 및 폐기물 확산을 방해할 수 있는 물리적인 장벽을 형성한다. 결정체는 AMD와 연관된 특징적인 침착물이다. 결정체의 생체발생은 RPE 기능이상, 광수용체 외부 절편의 손상된 소화, 및 후속적인 잔해 축적을 포함한다. 결정체는 보체 활성화제, 억제제, 활성화-특이적 보체 단편, 및 말단 경로 성분, 예를 들어 세포막 공격 복합체 (MAC 또는 C5b-9)를 함유하고, 이는 상기 물질의 국소 농도가 보체 케스케이드를 통해 작용하는 백혈구에 대한 강력한 화학주성 자극을 생산할 수 있음을 제안한다 (Killingsworth, et al., (2001) Exp Eye Res 73, 887-96). 최근의 연구는 국소 염증 및 보체 케스케이드의 활성화를 상기 물질의 형성에 연관시켰다 (Bok D. Proc Natl Acad Sci (USA). 2005; 102: 7053-4; Hageman GS, et al. Prog Retin Eye Res. 2001; 20: 705-32; Anderson DH, et al. Am J Ophthalmol. 2002; 134: 411-31. Johnson LV, et al. Exp Eye Res. 2001; 73: 887-96). 습윤 AMD는 맥락막 혈관신생 (CNV)과 연관되고, 복합적인 생물학적 과정이다. 새로운 맥락막 혈관 형성의 발병기전은 거의 알려지지 않았지만, 염증, 허혈, 및 혈관신생 인자의 국소 생산과 같은 인자가 중요한 것으로 생각된다. 염증이 특정 역할을 하는 것으로 제안되었지만, 보체의 역할은 연구되지 않았다. CNV의 예비 연구는 마우스 모델에서 보체 활성화에 의해 유발된 것으로 나타났다 (Bora PS, J Immunol. 2005; 174: 491-497). 보체계는 미생물 감염에 대한 선천 면역의 중대한 성분이고, 정상적으로 혈청 내에 비활성 상태로 존재하는 단백질의 집단을 포함한다. 상기 단백질은 3개의 활성화 경로: 즉, 전통적인 경로, 렉틴 경로 및 대체 경로로 구성된다 (V.M. Holers, In Clinical Immunology: Principles and Practice, ed. R.R. Rich, Mosby Press; 1996, 363-391). 미생물 표면의 분자는 상기 경로를 활성화시켜 C3-전환효소로 알려진 프로테아제 복합체의 형성을 일으킬 수 있다. 전통적인 경로는 칼슘/마그네슘-의존 케스케이드이고, 이는 정상적으로 항원-항체 복합체의 형성에 의해 활성화된다. 이는 또한 리간드와 복합된 C-반응성 단백질의 결합에 의해 및 그람-음성 세균을 포함한 많은 병원체에 의해 항체-비의존 방식으로 활성화될 수 있다. 대체 경로는 특정 감수성 표면 (예를 들어, 효모 및 세균의 세포벽 다당체, 및 특정 생체중합체 물질) 상에 C3의 침착 및 활성화에 의해 활성화되는 마그네슘-의존 케스케이드이다. 대체 경로는 전통적인 경로 및 렉틴 경로의 활성의 증폭에 참여한다 (Suankratay, C, ibid; Farries, T.C. et al., Mol. Immunol. 27: 1155-1161(1990)). 보체 경로의 활성화는 백혈구 화학주성, 대식세포, 호중구, 혈소판, 비만세포 및 내피세포의 활성화, 증가된 혈관 투과성, 세포 용해, 및 조직 손상의 관여를 통해 염증 반응을 매개하는 보체 단백질의 생물학적 활성 단편, 예를 들어 C3a, C4a 및 C5a 과민독소 (anaphylatoxin) 및 C5b-9 세포막 공격 복합체 (MAC)를 생성한다. 인자 D는 인간에서 그의 혈장 농도가 매우 낮고 (1.8 ㎍/ml), 보체 대체 경로의 활성화를 위한 제한 효소인 것으로 나타났으므로 보체 경로의 상기 증폭의 억제를 위한 적합한 표적일 수 있다 (P.H. Lesavre and H.J. Mueller-Eberhard. J. Exp. Med., 1978; 148: 1498-1510; J.E. Volanakis et al., New Eng. J. Med., 1985; 312: 395-401). 보체 활성화의 억제는 동물 모델을 사용하는 몇몇 질병 증상의 치료 및 생체외 연구, 예를 들어 전신 홍반성 루푸스 및 사구체신염에서 효과적인 것으로 증명되었다 (Y. Wang et al., Proc. Natl. Acad. Sci.; 1996, 93: 8563-8568). AMD 환자의 단일-뉴클레오티드 다형성 (SNP) 분석을 이용하여, 인자 H 유전적 변이체 (Y402H)는 AMD 발생 증가와 연관성이 큰 것으로 밝혀졌다 (Zareparsi S, Branham KEH, Li M, et al. Am J Hum Genet. 2005; 77: 149-53; Haines JL, et al. Sci 2005; 208: 419-21). 인자 H 유전자의 상기 포인트 돌연변이에 대해 동종접합 또는 이종접합인 사람은 AMD 환자의 50%를 차지할 수 있다. 인자 H는 보체 대체 경로의 핵심적인 가용성 억제제이다 (Rodriguez de Cordoba S, et al. Mol Immunol 2004; 41: 355-67). 이는 C3b에 결합하여, 대체 경로 C3-전환효소 (C3bBb)의 붕괴를 가속화시키고 C3b의 인자 I 매개 단백질 분해 불활성화에 대한 보조인자로서 작용한다. 조직화학 염색 연구는 RPE-맥락막 계면에서 인자 H 및 MAC가 유사하게 분포함을 보여준다. AMD 환자에서 발견된 상기 계면에서 유의한 양의 침착된 MAC는 인자 H 반수체형 (Y402H)이 보체 억제 기능을 약화시킬 수 있음을 나타낸다. 인자 H (Y402H)는 C3b에 대한 결합 친화도가 더 낮을 수 있을 것으로 추측된다. 따라서, 이는 보체 대체 경로의 활성화를 억제하는데 있어서 야생형 인자 H만큼 효과적이지 않다. 이는 RPE 및 맥락막 세포를 대체 경로 매개된 보체 공격에 대한 지속적인 위험에 놓는다. 혈장 내의 인자 H의 결핍은 C3 및 종종 다른 말단 보체 성분, 예를 들어 C5의 소비와 함께 대체 경로의 비제어된 활성화를 유발하는 것으로 나타났다. 상기 발견과 일치하여, 인자 H의 혈장 수준은 AMD에 대한 공지된 위험 인자인 흡연과 함께 감소하는 것으로 알려져 있다 (Esparza-Gordillo J, et al. Immunogenetics. 2004; 56: 77-82). 현재, 건조 AMD에 대한 입증된 의료 요법이 존재하지 않고, 진행된 건조 AMD에 대해 이용가능한 치료법이 없다. 습윤 AMD의 선택된 환자에서, 누출 또는 출혈 혈관을 밀봉하기 위해서 레이저 광응고로 공지된 기술이 효과적일 수 있다. 불행히도, 레이저 광응고는 보통 손실된 시력을 회복시키지 않고, 단지 추가의 손실을 늦추거나 일부 경우에는 방지한다. 최근에, 광역학 요법은 초기에 치료될 때 습윤 AMD 환자의 약 1/3에서 비정상적인 혈관 성장을 중단시키는데 효과적인 것으로 나타났다. 비스다인 (Visdyne) 광역학 요법 (PDT)에서, 염료를 환자의 눈에 주입하고, 이는 망막에서 혈관 누출 영역에서 축적되고, 저출력 레이저에 노출될 때 누출 혈관을 밀봉하는 작용을 한다. 상기 2가지 레이저 기술 이외에, 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)를 표적으로 하는 몇몇 항-혈관신생 요법이 습윤 AMD의 치료를 위해 개발되고 있다. 그러나, 치료된 환자 중 10%만이 시력 개선을 보인다. 습윤 AMD가 상기와 같이 부적절하게 치료되고 진행된 건조 AMD에 대한 이용가능한 치료법이 전무한 상황에서, 상기 심각한 질병에 대한 새로운 치료법을 개발할 필요가 있다. 본 발명은 상기 심각한 질병을 치료하는 신규한 방법을 제공한다. 003c#발명의 개요003e# 본 발명은 눈 관련 병태 또는 질병, 예를 들어 노인성 황반 변성 (AMD), 당뇨 망막병증, 눈 혈관신생 (예를 들어 맥락막, 각막, 또는 망막 조직에 해를 끼치는 눈 혈관신생), 및 보체 활성화를 수반하는 다른 눈 병태의 치료를 위한 보체 억제제에 관한 것이다. AMD의 치료는 AMD의 건조형 및 습윤형을 모두 포함한다. 본 발명의 보체 억제제는 보체 대체 경로, 예를 들어 인자 D, 프로페르딘, 인자 B, 인자 Ba, 및 인자 Bb, 및 전통적인 보체 경로, 예를 들어 C3a, C5, C5a, C5b, C6, C7, C8, C9 및 C5b-9를 억제하는 것을 포함하고 이로 제한되지 않는다. 본 발명은 또한 다른 약제, 예를 들어 항혈관신생제 및 소염제, 예를 들어 스테로이드와 조합으로 보체 억제제의 사용을 포함한다. 본 발명의 또다른 실시태양은 C5aR 및 C3aR 억제제, 예를 들어 항체 및 유도된 단편 및 단일 도메인 구성체, 및 소분자 화합물의 사용에 관한 것이다. 본 발명의 또다른 실시태양은 재조합 가용성 CR1 (TP10) 및 그의 유도 단백질의 사용; C3 억제 분자 (예를 들어, C3에 결합하여 활성화를 억제하는 펩티드 모방체 (peptidomimetic)인 콤프스타틴)의 사용; C3, C5, FD, 인자 P, 인자 B의 합성을 차단하는 siRNA의 사용에 관한 것이다. 이들 억제제는 소분자 화학적 화합물, 뉴클레오티드, 펩티드, 단백질, 펩티드 모방체 및 항체일 수 있지만 이로 제한되지 않는다. 본 발명의 또다른 실시태양은 환자에게 안내로 또는 임의의 다른 임상학상 효과적인 경로로 투여되는, 인간 혈액으로부터 정제된 인간 인자 H, 또는 재조합 인간 인자 H의 사용을 포함한다. 본 발명의 항체는 전체 면역글로불린, scFv, Fab, Fab', Fv, F(ab')2, 또는 dAb를 포함한다. 도메인 항체는 VH 도메인 또는 VL 도메인을 포함한다. 본 발명의 한 실시태양은 인자 D에 결합하여 보체 대체 경로를 활성화시키는 그의 능력을 차단하는 모노클로날 항체의 용도에 관한 것이다. 상기 항체, 예를 들어 ATCC에 기탁되고 HB 12476으로 명명된 하이브리도마로부터 생산된 모노클로날 항체 166-32는 본원에 참고로 포함된 WO 01/70818 및 US 20020081293에 기재되어 있다. 본 발명은 또한 모노클로날 항체 166-32와 동일한 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다. 본 발명의 모노클로날 항체는 또한 그 전부가 본원에 참고로 포함된 동시계류중인 출원 의 인간화 항체를 포함할 수 있다. 본 발명의 한 실시태양은 보체 성분 C5a에 결합하는 모노클로날 항체의 사용에 관한 것이다. 상기 항체는 ATCC에 기탁되고 PTA-3650으로 명명된 하이브리도마로부터 생산된 항체 137-26, 및 137-26과 동일한 에피토프에 특이적으로 결합하는 임의의 항체를 포함한다. 본 발명에 따라, 보체 경로 억제제는 (a) 비경구 투여; (b) 생체적합성 또는 생체분해성 지속 방출 임플란트 (implant); (c) 주입 펌프의 삽입; 또는 (d) 국소 투여, 예를 들어 결막하 투여 또는 유리체내 투여에 의해 투여될 수 있다. 보체 억제제는 또한 경구 투여, 장내 투여 및 외용 투여로부터 선택되는 비경구 투여에 의해 투여될 수 있다. 외용 투여는 눈 세척액, 안 연고, 아이실드 (eye shield) 또는 점안액을 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 보체 억제제는 면역조절 또는 면역억제 화합물과 조합하여 투여할 수 있다. 본 발명의 또다른 실시태양은 유전자 요법을 위해 보체 경로 억제제를 발현할 수 있는 핵산 구성체의 투여에 관한 것이다. 본 발명의 또다른 실시태양은 노화 Ccl-2 또는 Ccr-2-결여 마우스에서 AMD 모델의 사용을 포함하는, AMD의 치료에 유용한 보체 억제제를 스크리닝하는 방법을 포함한다. 이들 마우스는 인간 건조 및 습윤 AMD에서 발견된 것과 유사한 조직병리학적 변화를 나타낸다. 이들 마우스는 보체 억제제 또는 인자 H로 유리체 내로 치료할 수 있다. 시험할 약제로 치료된 마우스에서 AMD 발병으로부터의 보호를 결정하기 위해 조직 검사를 수행할 수 있다.