알레르기 질병 치료를 위한 흉선 간질 림포포이에틴수용체에 대한 항체 document_id A220623065299

시토킨 및 면역 세포는 특정 생리학적 메카니즘 또는 경로, 예를 들어, 다양한 염증성 질환을 일으키는 경로를 매개한다. 인간 흉선 간질 림포포이에틴 (TSLP)은 인간 상피세포로부터 생산되는 IL-7-유사 시토킨이다. 이는 B-세포 분화를 촉진하고 또한 흉선세포 및 성숙 T-세포 모두를 동시자극할 수 있다. TSLP는 인간 CD11c+ 수지상 세포 (DC) 상의 특이적 이종이량체 (heterodimer) 수용체에 결합한다. 수용체 이종이량체는 공통적인 감마-유사 수용체 사슬 (TSLP 수용체; TSLPR) 및 IL-7R-α 사슬로 이루어진다 (예를 들어, 문헌 ([Tonozuka et al., Cytogenet. Cell Genet. 93:23-25, 2001]; [Pandey et al., Nat. Immunol. 1:59-64, 2000]; [L. S. Park et al., J. Exp. Med. 192:659-670, 2000]; 및 [Reche et al., J. Immunol. 167:336-343, 2001]) 참조). 수용체에 결합하는 리간드는 DC가 TH2-유인성 케모킨, TARC (흉선 및 활성화-제어 케모킨) 및 MDC (대식세포-유래 케모킨)을 분비하도록 유도한다. 또한, TSLP는 또한 강력한 DC 활성화, 비시험된 (naive) CD4+ T 세포 팽창, 및 TH2 표현형으로의 후속적인 분극을 유도하여 알레르기 유발성 시토킨 인터루킨 4 (IL-4), IL-5, IL-13 및 종양 괴사 인자-α를 생성시킨다. TSLP 신호 전달이 Stat5 전사 인자의 활성화를 일으키는 것이 또한 밝혀졌다. 또한, 급성 및 만성 아토피 피부염 환자는 피부 병변에서 TSLP를 과다 발현하는 것으로 보고되었고, 이는 TSLP 발현이 생체내 알레르기성 염증과 연관됨을 제안한다. 피부 각질 세포 이외에, 높은 수준의 TSLP 발현은 또한 기관지 상피세포, 평활근 및 폐 섬유모세포에서 발견되었고, 이는 호흡기 알레르기 적응증에서 TSLP의 잠재적인 역할을 또한 지지한다. 또한, IgE 활성화된 비만 세포는 매우 높은 수준의 TSLP를 발현하고, 그 메카니즘은 TH2 표현형의 유지에 참여할 수 있다. 서구 사회의 인구의 약 20%가 염증성 질환, 예를 들어, 천식, 비염, 아토피 피부염, 및 식품 알레르기를 포함하는 알레르기 질병에 걸린다. 50% 내지 80%의 아토피 피부염 환자는 천식 또는 알레르기 비염에 걸린다. 현재까지, 알레르기 유발 천식, 아토피 피부염, 및 알레르기 비염에 대한 치유법은 없다. 현재의 처치, 예를 들어 천식에 대한 베타-2 아드레날린 수용체 길항제, 아토피 피부염에 대한 Elidel, 및 알레르기 비염에 대한 H1-항히스타민제는 증상을 표적화하도록 사용된다. 따라서, 당업계에서는 상기 염증성 질환, 특히 알레르기성 염증을 치료하기 위한 보다 우수한 치료법에 대한 요구가 증가하고 있다. 본 발명은 상기 및 다른 문제를 해결하기 위한 것이다. 003c#발명의 개요003e# 본원에서 본 발명의 한 실시태양은 표적 단백질인 인간 흉선 간질 림포포이에틴 수용체 (hTSLPR)에 대해 특이적인 단리된 인간 또는 인간화 항체 또는 항원 결합 구역을 갖는 그의 기능적 단편을 제공하고, 항체 또는 그의 기능적 단편은 hTSLPR에 결합한다. 관련 실시태양에서, hTSLPR에 대한 결합은 염증 매개체 방출을 방지하는 세포 표면 hTSLP 수용체 결합에 의해 적어도 결정된다. 또다른 실시태양에서, 본 발명은 항체의 단리된 항원 결합 구역 또는 그의 기능적 단편을 제공한다. 특정 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 아미노산 서열 TYGMS (서열 7)를 갖는 H-CDR1 구역, 및 그의 보존적 변이체를 포함한다. 본원에서 설명되는 바와 같이, 보존적 변이체는 확인된 임의의 아미노산 서열 내의 아미노산 잔기를 포함한다. 관련 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 아미노산 서열 WINTYSGVPRYADDFKG (서열 8)을 갖는 H-CDR2 구역, 및 그의 보존적 변이체이다. 다른 관련 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 아미노산 서열 EGFITTVVGAAGRFVY (서열 9)를 갖는 H-CDR3 구역, 및 그의 보존적 변이체이다. 다른 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 아미노산 서열 KASQDVGTAVA (서열 10)를 갖는 L-CDR1 구역, 및 그의 보존적 변이체이다. 또다른 관련 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 아미노산 서열 WASTRHT (서열 11)을 갖는 L-CDR2 구역 및 그의 보존적 변이체이다. 또다른 관련 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 아미노산 서열 QQYSTYPT (서열 12)을 갖는 L-CDR3 구역, 및 그의 보존적 변이체이다. 다른 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 서열 5의 가변 구역 아미노산 서열을 갖는 중쇄, 및 서열 5의 CDR 구역과 CDR 구역에서 적어도 60, 70, 80, 90 또는 95%의 서열 동일성을 갖는 서열이다. 관련 실시태양에서, 단리된 항원 결합 구역은 서열 6의 가변 구역 아미노산 서열을 갖는 경쇄, 및 서열 6의 CDR 구역과 CDR 구역에서 적어도 60, 70, 80, 90 또는 95%의 서열 동일성을 갖는 서열이다. 다른 측면에서, 본 발명은 hTSLPR에 대한 모노클로날 길항 항체를 제공한다. 본 발명의 항-TSLPR 항체 중 일부는 서열 5의 중쇄 가변 구역 서열 및 서열 6의 경쇄 가변 구역 서열을 함유하는 참조 항체와 동일한 결합 특이성을 갖는다. 상기 항체 중 일부는 참조 항체와 동일한 결합 특이성을 나타내는 완전 인간 항체이다. 일부 항체는 TYGMS (서열 7), WINTYSGVPRYADDFKG (서열 8) 또는 EGFITTVVGAAGRFVY (서열 9)의 중쇄 상보성 결정 구역 (CDR) 서열; 또는 KASQDVGTAVA (서열 10), WASTRHT (서열 11), 또는 QQYSTYPT (서열 12)의 경쇄 CDR 서열을 갖는다. 일부의 항-hTSLPR 항체는 각각 중쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 TYGMS (서열 7), WINTYSGVPRYADDFKG (서열 8) 및 EGFITTVVGAAGRFVY (서열 9); 및 각각 경쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 KASQDVGTAVA (서열 10), WASTRHT (서열 11), 및 QQYSTYPT (서열 12)를 갖는다. 본 발명의 일부 다른 항체는 서열 5에 적어도 85% 동일한 중쇄 가변 구역 아미노산 서열 및 서열 6에 적어도 85% 동일한 경쇄 가변 구역 아미노산 서열을 함유한다. 본 발명의 일부 다른 항-TSLPR 항체는 서열 5에 동일한 중쇄 가변 구역 아미노산 서열 및 서열 6에 동일한 경쇄 가변 구역 아미노산 서열을 갖는다. 본 발명의 일부 항-hTSLPR 항체는 마우스 항체이다. 일부 다른 것은 키메라 항체이다. 키메라 항체의 일부는 인간 중쇄 불변 구역 및 인간 경쇄 불변 구역을 갖는다. 본 발명의 일부 다른 항-TSLPR 항체는 인간화 항체이다. 본 발명의 일부 다른 항-TSLPR 항체는 서열 5의 중쇄 가변 구역 서열 및 서열 6의 경쇄 가변 구역 서열을 함유하는 항체와 동일한 결합 특이성을 나타내는 완전 인간 항체이다. 본 발명에서 단일쇄 항체, 예를 들어, Fab 단편을 또한 제공한다. 일부 항-hTSLPR 항체는 IgG1 이소형의 항체이다. 일부 다른 항체는 IgG4 이소형의 항체이다. 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 항-hTSLPR 항체의 중쇄 가변 구역 또는 경쇄 가변 구역을 함유하는 폴리펩티드를 코딩하는 단리된 또는 재조합 폴리뉴클레오티드 (예를 들어, DNA)를 제공한다. 예를 들어, 폴리뉴클레오티드는 각각 중쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 TYGMS (서열 7), WINTYSGVPRYADDFKG (서열 8) 및 EGFITTVVGAAGRFVY (서열 9)를 함유하는 항체 중쇄를 코딩할 수 있다. 폴리뉴클레오티드는 또한 각각 경쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 KASQDVGTAVA (서열 10), WASTRHT (서열 11), 및 QQYSTYPT (서열 12)를 함유하는 항체 경쇄를 코딩할 수 있다. 본 발명의 일부 폴리뉴클레오티드는 서열 5의 성숙 구역에 적어도 90% 동일한 성숙 중쇄 가변 구역 서열을 코딩한다. 일부 다른 폴리뉴클레오티드는 서열 6의 성숙 구역에 적어도 90% 동일한 성숙 경쇄 가변 구역 서열을 코딩한다. 상기 폴리뉴클레오티드의 일부는 서열 5의 성숙 구역에 동일한 성숙 중쇄 가변 구역 서열 또는 서열 6의 성숙 구역에 동일한 성숙 경쇄 가변 구역 서열을 코딩한다. 다른 측면에서, 본 발명은 (1) 본 발명의 항-hTSLPR 항체의 중쇄를 코딩하는 제1 재조합 DNA 세그먼트, 및 (2) 항체의 경쇄를 코딩하는 제2 재조합 DNA 세그먼트를 포함하는 단리된 숙주 세포를 제공한다. 일부 숙주 세포에서, 재조합 DNA 세그먼트는 각각 제1 및 제2 프로모터에 작동가능하게 연결되고, 숙주 세포에서 발현될 수 있다. 상기 숙주 세포 중 일부는 각각 중쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 TYGMS (서열 7), WINTYSGVPRYADDFKG (서열 8) 및 EGFITTVVGAAGRFVY (서열 9); 및 각각 경쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 KASQDVGTAVA (서열 10), WASTRHT (서열 11), 및 QQYSTYPT (서열 12)를 갖는 모노클로날 항체를 발현한다. 일부 다른 숙주 세포는 서열 5의 성숙 구역에 적어도 90% 동일한 성숙 중쇄 가변 구역 서열; 및 서열 6의 성숙 구역에 적어도 90% 동일한 성숙 경쇄 가변 구역 서열을 함유하는 항-hTSLPR 항체를 발현한다. 상기 숙주 세포의 일부는 서열 5의 성숙 구역에 동일한 성숙 중쇄 가변 구역 서열 및 서열 6의 성숙 구역에 동일한 성숙 경쇄 가변 구역 서열을 함유하는 항-hTSLPR 항체를 발현한다. 일부 숙주 세포는 비-인간 포유동물 세포이다. 다른 측면에서, 본 발명은 대상, 예를 들어, 인간 환자에서 염증성 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 대상에게 유효량의 항-hTSLPR 항체를 함유하는 제약 조성물을 투여하는 것을 수반한다. 일반적으로, 항-hTSLPR 항체는 서열 5의 중쇄 가변 구역 서열 및 서열 6의 경쇄 가변 구역 서열을 함유하는 항-hTSLPR 항체와 동일한 결합 특이성을 갖는다. 일부의 상기 치료 방법에서, 완전 인간 항체가 사용된다. 일부 방법에서, 항-TSLPR 항체는 각각 중쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 TYGMS (서열 7), WINTYSGVPRYADDFKG (서열 8) 및 EGFITTVVGAAGRFVY (서열 9); 및 각각 경쇄 CDR1, CDR2, 및 CDR3 서열인 KASQDVGTAVA (서열 10), WASTRHT (서열 11), 및 QQYSTYPT (서열 12)를 함유한다. 일부 방법에서, 사용된 항-hTSLPR 항체는 서열 5의 성숙 구역에 동일한 성숙 중쇄 가변 구역 서열, 및 서열 6의 성숙 구역에 동일한 성숙 경쇄 가변 구역 서열을 함유한다. 일부 방법은 알레르기성 염증 질병에 걸린 대상을 치료하기 위한 것이다. 치료를 받을 수 있는 알레르기성 염증 질병의 예는 아토피 피부염, 천식, 또는 알레르기 비염을 포함한다. 또다른 실시태양에서, 본 발명은 항체 또는 그의 단편인 제1 성분 및 제2 아미노산 서열을 갖는 제2 성분으로 이루어진 면역컨쥬게이트 (immunoconjugate)를 제공한다. 예를 들어, 면역컨쥬게이트는 세포독소이거나, 면역컨쥬게이트는 hTSLPR과 상이한 표적에 대한 결합 특이성을 갖는 결합 단백질 또는 항체이다. 다른 실시태양에서, 본 발명은 항체 또는 그의 항체 단편을 갖는 키트를 제공한다. 일부 실시태양에서, 키트는 추가로 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 함유한다. 다른 관련 실시태양에서, 키트 내의 항체는 단위 용량으로 존재한다. 또다른 관련 실시태양에서, 키트는 대상에게 투여하는데 사용하기 위한 지시서를 포함한다. 본 발명의 특성 및 잇점은 명세서의 나머지 부분 및 청구의 범위를 참조하여 추가로 이해될 수 있다.