항-ＥＰＨＲＩＮＢ２ 항체 및 그의 사용 방법 document_id A220623065898

혈관 공급의 발달은 많은 생리학적 및 병리학적 과정의 기본 요건이다. 활발하게 성장하는 조직, 예를 들어, 배아 및 종양은 적절한 혈액 공급을 필요로 한다. 이들은 혈관신생으로 불리는 과정을 통해 새로운 혈관 형성을 촉진시키는 전-혈관신생 인자를 생산함으로써 상기 필요를 만족시킨다. 혈관 형성은 하기 단계 모두를 또는 다수를 포함하는 것으로, 복잡하지만 규칙적인 생물학적 사건이다: a) 내피 세포(EC)가 기존 EC로부터 증식하거나 기원 세포로부터 분화하고; b) EC가 이동하고 융합하여 코드-유사 구조를 형성하고; c) 이어서 혈관 코드는 관생성을 거쳐 중심 관강을 갖는 관을 형성하고; d) 기존 코드 또는 관이 싹을 내밀어 2차 관을 형성하고; e) 원시 혈관총은 추가의 재형성 및 재성형을 거치고; f) 주변-내피 세포가 동원되어 내피관을 둘러싸, 관에 유지 및 조절 기능을 제공하며; 상기 세포는 작은 모세혈관에 대한 혈관주위세포, 보다 큰 혈관에 대해 평활근 세포 및 심장에서 심근 세포를 포함한다 (문헌 [Hanahan, Science 277:48-50 (1997)]; [Hogan ＆ Kolodziej, Nat. Rev. Genet. 3:513-23 (2002)]; [Lubarsky ＆ Krasnow, Cell 112:19-28 (2003)]). 현재 혈관신생이 다양한 질병의 발병기전에서 관련됨은 잘 확립되어 있다. 이들은 고형 종양 및 전이, 아테롬성 동맥경화증, 수정체후 섬유증식증, 혈관종, 만성 염증, 안내 신생혈관 질환, 예를 들면, 증식 망막병증, 예를 들어, 당뇨 망막병증, 연령관련 황반 변성(AMD), 신생혈관 녹내장, 이식된 각막 조직 및 다른 조직의 면역 거부, 류마티스성 관절염 및 건선을 포함한다 (문헌 [Folkman et al., J. Biol. Chem. 267:10931-34 (1992)]; [Klagsbrun et al., Annu. Rev. Physiol. 53:217-39 (1991)]; 및 [Garner A., "Vascular diseases," In: Pathobiology of Ocular Disease. A Dynamic Approach, Garner A., Klintworth GK, eds., 2nd Edition (Marcel Dekker, NY, 1994), pp 1625-1710]). 종양 성장의 경우에, 혈관신생은 과다형성에서 신생물로의 이행, 및 종양의 성장 및 전이를 위한 자양분을 공급하는데 중대한 것으로 보인다 (문헌 [Folkman et al., Nature 339:58 (1989)]). 신생혈관형성은 정상 세포에 비해 종양 세포가 성장 이익과 증식 자율성을 획득하도록 한다. 종양은 보통 이용가능한 모세혈관층으로부터의 거리 때문에 수 세제곱밀리미터의 크기로만 증식할 수 있는 단일 이상 세포로서 시작하고, 장시간 동안 추가의 성장 및 씨딩 없이 '휴면상태'로 머무를 수 있다. 이어서 일부 종양 세포는 혈관신생 표현형으로 전환되어 내피 세포를 활성화시키고, 이는 증식하여 새로운 모세혈관으로 성숙한다. 이들 새로 형성된 혈관은 1차 종양의 지속적인 성장을 허용할 뿐만 아니라, 전이성 종양 세포의 씨딩 및 재콜로니형성을 허용한다. 따라서, 종양 절편 내의 미세혈관의 밀도와 유방암 및 일부 다른 종양에서 환자 생존율 사이에 상호관련이 관찰되었다 (문헌 [Weidner et al., N. Engl. J. Med. 324:1-6 (1991)]; [Horak et al., Lancet 340:1120-24 (1992)]; [Macchiarini et al., Lancet 340:145-46 (1992)]). 혈관신생 전환을 제어하는 정확한 기전은 잘 알려지지 않았지만, 종양 덩어리의 신생혈관형성은 많은 혈관신생 자극제와 억제제의 순수한 균형으로부터 생성되는 것으로 생각된다 (문헌 [Folkman, Nat. Med. 1(1):27-31 (1995)]). 혈관 발달의 과정은 엄밀하게 조절된다. 지금까지, 대부분 주변 세포에 의해 생산된 분비형 인자인 상당한 수의 분자가 EC 분화, 증식, 이동 및 코드 유사 구조로의 융합을 조절하는 것으로 나타났다. 예를 들어, 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)는 혈관신생을 자극하고, 혈관 투과성을 유도하는데 관여하는 핵심 인자로서 확인되었다 (문헌 [Ferrara et al., Endocr. Rev. 18:4-25 (1997)]. 심지어 단일 VEGF 대립유전자의 상실이 배아 치사를 일으킨다는 발견은 혈관계의 발달 및 분화에서 상기 인자에 의한 대체불가능한 역할을 지적한다. 또한, VEGF는 종양 및 안내 질병과 관련된 신생혈관형성의 주요 매개자인 것으로 나타났다 (문헌 [Ferrara et al., Endocr. Rev. 상기 문헌]). VEGF mRNA는 검사된 대다수의 인간 종양에서 과다발현된다 (문헌 [Berkman et al., J. Clin. Invest. 91:153-59 (1993)]; [Brown et al., Human Pathol. 26:86-91 (1995)]; [Brown et al., Cancer Res. 53:4727-35 (1993)]; [Mattern et al., Brit. J. Cancer 73:931-34 (1996)]; [Dvorak et al., Am. J. Pathol. 146:1029-39 (1995)]). 또한, 안구액내 VEGF의 농도 수준은 당뇨 및 다른 허혈-관련 망막병증의 환자에서 혈관의 활발한 증식의 존재와 고도로 상호관련된다 (문헌 [Aiello et al., N. Engl. J. Med. 331:1480-87 (1994))]). 또한, 연구에 의해 AMD 환자에서 맥락 신생혈관막에서 VEGF의 편재화가 증명되었다 (문헌 [Lopez et al., Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 37:855-68 (1996)]). 항-VEGF 중화 항체는 누드(nude) 마우스에서 다양한 인간 종양 세포주의 성장을 억제하고 (문헌 [Kim et al., Nature 362:841-44 (1993)]; [Warren et al, J. Clin. Invest. 95:1789-97 (1995)]; [Borgstroem et al., Cancer Res. 56:4032-39 (1996)]; [Melnyk et al., Cancer Res. 56:921-24 (1996)]), 또한 허혈 망막 질병의 모델에서 안내 혈관신생을 억제한다 (문헌 [Adamis et al., Arch. Ophthalmol. 114:66-71 (1996)]). 그러므로, 항-VEGF 단일클론 항체 또는 다른 VEGF 작용의 억제제는 종양 및 다양한 안내 신생혈관 질병의 치료를 위한 유망한 후보물이다. 상기 항체는 예를 들어, EP 817,648 (1998년 1월 14일자 공개); 및 W098/45331과 W098/45332 (둘 모두 1998년 10월 15일자 공개)에 기재되어 있다. 항-VEGF 항체의 하나인 베바시주맙 (bevacizumab)은 전이성 직장결장암(CRC)을 치료하기 위한 화학치료 요법과의 조합 사용에 대하여 FDA에서 승인을 받았다. 다양한 암 적응증 치료를 위해 베바시주맙은 현재 진행 중인 많은 임상 시험에서 연구되고 있다. EphrinB2 리간드 ("Ephrin-B2" 또는 "EphrinB2")는 인간 게놈에서 거대한 티로신 키나제 수용체 계열을 구성하는 에프린 리간드 계열의 구성원이다 (문헌 [Dodelet, Oncogene, 19: 5614-5619, 2000]에서 검토). 인간 에프린 리간드 티로신 키나제는 서열 동정에 의해 Eph 또는 Eph 수용체로서 명명되는 상응하는 A형 및 B형 수용체를 갖는 A 부류 및 B 부류로 분류된다. 신호 전달은, 수용체 티로신 키나제가 리간드에 의해 활성화되는 전방 방식으로 이루어질 수 있고, 신호 전달은, 막횡단 에프린B 리간드가 수용체와의 상호작용에 의해 활성화되는 역 방식으로도 이루어질 수 있다. Eph 수용체 리간드 상호작용은 축색 돌기 가이던스, 조직 경계 형성, 액포 형성, 및 세포 이동을 비롯한, 매우 다양한 생물학적 기능에 연루되어 있다 (문헌 [Kullander et al. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol., 3: 475-486, 2002]; [Cheng et al. Cytokine Growth Factor Rev., 13: 75-85, 2002]; [Coulthard et al. Int. J. Dev. Biol., 46: 375-384, 2002]). 치료제로서, 개발에 최적인 임상적 특징을 갖는 제제가 계속적으로 요구되고 있다는 것은 분명하다. 본원에 기술된 본 발명은 이러한 요구를 충족시키고, 그외 다른 이점을 제공한다. 특허 출원 및 간행물을 비롯한 본원에 인용된 모든 참고 문헌은 그의 전문이 참고로 인용된다. 발명의 요약 본 발명은 부분적으로 다양한 EphrinB2 결합 물질 (예로서, 항체, 및 그의 단편)의 동정에 기초한다. EphrinB2는 중요하고 이로운 치료제로서 제시되고, 본 발명은 EphrinB2 결합에 기초한 조성물 및 방법을 제공한다. 본원에 기술되어 있는 바와 같이, 본 발명의 EphrinB2 결합 물질은 EphrinB2 리간드 경로의 발현 및/또는 활성과 관련된 병적 상태를 표적화하는데 사용하기 위한 것으로서 중요한 치료제 및 진단제를 제공한다. 따라서, 본 발명은 EphrinB2 결합과 관련된 방법, 조성물, 키트 및 제조 물품을 제공한다. 본 발명은 EphrinB2에 결합하는 (예로서, 특이적으로 결합하는) 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 단리된 항-EphrinB2 항체를 제공하는데, 여기서, 상기 항체의 전장 IgG 형태는 30 pm 또는 그 보다 우수한 결합 친화도로 인간 EphrinB2에 특이적으로 결합하는 것이다. 당업계에 널리 확립된 바와 같이, 그의 수용체에 대한 리간드의 결합 친화도는 임의의 다양한 분석법을 이용하여 측정될 수 있으며, 다양한 정량적인 값의 용어로 표현된다. 따라서, 하나의 실시양태에서, 결합 친화도는 Kd 값으로 표현되고, (예를 들어, 최소화된 결합력 효과를 갖는) 고유 결합 친화도를 반영한다. 일반적으로 및 바람직하게, 결합 친화도는 무세포 환경에서든 세포-결합된 환경에서든 시험관내에서 측정된다. 예를 들어, 비아코어(Biacore), 방사성 면역분석법(RIA) 및 ELISA를 비롯한 본원에 기재된 것을 포함하는, 당업계에 공지된 임의 다수의 분석법을 이용하여 결합 친화도 측정치를 수득할 수 있다. 하나의 측면에서, 본 발명은 EphrinB2의 Eph 수용체 (예를 들어, EphB1, EphB2 및/또는 EphB3) 결합 영역에 결합하는 단리된 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 EphrinB2 세포외 도메인을 포함하거나, 상기 도메인으로 구성되거나, 또는 본질적으로 상기 도메인으로 구성된 폴리펩티드에 결합하는 단리된 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 EphrinB2 결합에 대하여 Eph 수용체 (예를 들어, EphB1, EphB2 및/또는 EphB3)와 경쟁하는 단리된 항-EphrinB2 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 EphrinB2 활성을 억제, 감소 및/또는 차단시키는 단리된 항-EphrinB2 항체를 제공한다. 일부 실시양태에서, EphrinB2 자가인산화는 억제, 감소 및/또는 차단된다. 하나의 측면에서, 본 발명의 항-EphrinB2 항체는 (a) (i) RASQDVSTAVA (서열 6)인 서열 A1-A11을 포함하는 HVR-L1, (ii) SASFLYS (서열 8)인 서열 B1-B7을 포함하는 HVR-L2, (iii) EQTDSTPPT (서열 12)인 서열 C1-C9를 포함하는 HVR-L3, (iv) GFTVSSGWIH (서열 2)인 서열 D1-D10을 포함하는 HVR-H1, (v) AVIFHNKGGTDYADSVKG (서열 4)인 서열 E1-E18을 포함하는 HVR-H2, 및 (vi) ARTSAWAQLGAMDY (서열 5)인 서열 F1-F14을 포함하는 HVR-H3 으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1, 2, 3, 4 또는 5개 이상의 초가변 영역(HVR) 서열; 및 (b) 서열 1-12에 도시한 서열 중 1개 이상의 잔기가 변형된 서열을 포함하는 1개 이상의 변이체 HVR을 포함한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 HVR을 포함하며, 여기서 각 HVR은 서열 1-12로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함하거나, 상기 서열로 구성되거나, 또는 본질적으로 상기 서열로 구성되고, 여기서, 서열 6 또는 7은 HVR-L1에 상응하고, 서열 8 또는 9는 HVR-L2에 상응하고, 서열 10, 11 또는 12는 HVR-L3에 상응하고, 서열 1 또는 2는 HVR-H1에 상응하고, 서열 3 또는 4는 HVR-H2에 상응하고, 서열 5는 HVR-H3에 상응하는 것인 항체를 제공한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3을 포함하며, 여기서 각각은 순서대로 서열 6, 8, 10, 1, 3, 5를 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3을 포함하며, 여기서 각각은 순서대로 서열 7, 9, 11, 1, 3, 5를 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-H1, HVR-H2 및 HVR-H3을 포함하며, 여기서 각각은 순서대로 서열 6, 8, 12, 2, 4, 5를 포함한다. 본 발명의 항체에서 변이체 HVR은 HVR 내에 하나 이상의 (예로서, 2, 3, 4, 5개 이상) 잔기 변형을 가질 수 있다. 하나의 실시양태에서, HVR-L1 변이체는 하기 위치: A7 (S 또는 D); A8 (T 또는 S); A9 (A 또는 S); 및 A10 (V 또는 L)의 임의 조합으로 1-4개 (1, 2, 3 또는 4개)의 치환을 포함한다. 하나의 실시양태에서, HVR-L2 변이체는 하기 위치: B1 (S 또는 A); B4 (F 또는 N); 및 B6 (Y 또는 E)의 임의 조합으로 1-3개 (1, 2 또는 3개)의 치환을 포함한다. 하나의 실시양태에서, HVR-L3 변이체는 하기 위치: C1 (Q 또는 E); C3 (S 또는 T); C4 (Y 또는 D); C5 (T, D 또는 S); C6 (T 또는 N); 및 C8 (P 또는 F)의 임의 조합으로 1-6개 (1, 2, 3, 4, 5 또는 6개)의 치환을 포함한다. 하나의 실시양태에서, HVR-H1 변이체는 하기 위치: D4 (I 또는 V); D5 (T 또는 S); D6 (G 또는 S); 및 D7 (S 또는 G)의 임의 조합으로 1-4개 (1, 2, 3 또는 4개)의 치환을 포함한다. 하나의 실시양태에서, HVR-H2 변이체는 하기 위치: E4 (Y 또는 F); E5 (P 또는 H); E7 (N 또는 K); 및 E9 (A 또는 G)의 임의 조합으로 1-4개 (1, 2, 3 또는 4개)의 치환을 포함한다. 하나의 실시양태에서, HVR-H3 변이체는 하기 위치: F1 (A); F2 (R); F3 (T); F4 (S); F5 (A); F6 (W); F7 (A); F8 (Q); F9 (L); F10 (G); F11 (A); F12 (M); F13 (D) 및 F14 (Y)에 1-14개의 치환을 포함한다. 각 위치 다음에 오는 괄호 안의 문자(들)는 예시적인 치환 (즉, 대체) 아미노산을 나타내고; 당업자에게 명백한 바와 같이, 본원에 기술된 것과 관련하여 기타 아미노산의 치환 아미노산으로서의 적합성은 당업계에 공지된 기법 및/또는 본원에 기술된 기법을 사용하여 통상적으로 평가될 수 있다. 하나의 측면에서, 본 발명은 서열 1 또는 2의 서열을 포함하는 HVR-H1 영역을 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 서열 3 또는 4의 서열을 포함하는 HVR-H2 영역을 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 서열 5의 서열을 포함하는 HVR-H3 영역을 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명은 서열 6 또는 7의 서열을 포함하는 HVR-L1 영역을 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명은 서열 8 또는 9의 서열을 포함하는 HVR-L2 영역을 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명은 서열 10, 11 또는 12의 서열을 포함하는 HVR-L3 영역을 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 하기: (i) 서열 2의 서열을 포함하는 HVR-H1 서열; (ii) 서열 4의 서열을 포함하는 HVR-H2 서열; (iii) 서열 5의 서열을 포함하는 HVR-H3 서열 중 1개 이상, 2개 이상 또는 3개 모두를 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 하기 서열: (i) 서열 6의 서열을 포함하는 HVR-L1 서열; (ii) 서열 8의 서열을 포함하는 HVR-L2 서열; (iii) 서열 12의 서열을 포함하는 HVR-L3 서열 중 1개 이상, 2개 이상 또는 3개 모두를 포함하는 항체를 제공한다. 서열 1-12의 아미노산 서열은 도 1에 나타낸 개개의 HVR (즉, H1, H2 또는 H3)과 관련하여 넘버링된 것이며, 상기 넘버링은 하기 기술하는 바와 같은 카바트(Kabat) 넘버링 체계와 일치한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 도 1에 도시한 중쇄 HVR 서열을 포함하는 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 도 1에 도시한 경쇄 HVR 서열을 포함하는 항체를 제공한다. 본 발명의 항체의 일부 실시양태는 하기 서열 13에 도시된, 인간화된 4D5 항체 (huMAb4D5-8) (허셉틴(HERCEPTIN)®, 미국 캘리포니아주 사우쓰 샌프란시스코에 소재하는 제넨테크, 인크.(Genentech, Inc.)) (미국 특허 번호 제6,407,213호 및 문헌 [Lee et al., J. Mol. Biol. (2004), 340(5):1073-93]에서도 언급됨)의 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, huMAb4D5-8 경쇄 가변 도메인 서열은 30번, 66번 및 91번 위치 (상기에서 각각 굵은/이탤릭체로 표시되어 있는 Asn, Arg 및 His) 중 하나 이상에서 변형되어 있다. 하나의 실시양태에서, 변형된 huMAb4D5-8 서열은 30번 위치에 Ser을, 66번 위치에 Gly를, 및 91번 위치에 Ser을 포함한다. 따라서, 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 하기 서열 14에 도시된 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다: huMAb4D5-8에 대하여 치환된 잔기는 상기에서 굵은/이탤릭체로 표시되어 있다. 본 발명의 항체는, EphrinB2에 대한 결합 활성이 실질적으로 유지되는 경우라면, 임의의 적합한 프레임워크 가변 도메인 서열을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 인간 하위군 III 중쇄 프레임워크 컨센서스 서열을 포함한다. 이들 항체의 하나의 실시양태에서, 프레임워크 컨센서스 서열은 71번, 73번 및/또는 78번 위치에 치환을 포함한다. 이들 항체의 일부 실시양태에서, 71번 위치는 A이고, 73번 위치는 T이고/거나 78번 위치는 A이다. 하나의 실시양태에서, 이들 항체는 huMAb4D5-8 (허셉틴®, 미국 캘리포니아주 사우쓰 샌프란시스코에 소재하는 제넨테크, 인크.) (미국 특허 번호 제6,407,213호 ＆ 제5,821,337호, 및 문헌 [Lee et al., J. Mol. Biol. (2004), 340(5): 1073-93]에서도 언급되어 있음)의 중쇄 가변 도메인 프레임워크 서열을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 이들 항체는 추가로 인간 κI 경쇄 프레임워크 컨센서스 서열을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 이들 항체는 미국 특허 번호 제6,407,213호 ＆ 제5,821,337호에 기재된 huMAb4D5-8의 경쇄 HVR 서열을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 이들 항체는 huMAb4D5-8 (허셉틴��, 미국 캘리포니아주 사우쓰 샌프란시스코에 소재하는 제넨테크, 인크.) (미국 특허 번호 제6,407,213호 ＆ 제5,821,337호, 및 문헌 [Lee et al., J. Mol. Biol. (2004), 340(5): 1073-93]에서도 언급되어 있음)의 경쇄 가변 도메인 서열을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 프레임워크 서열이 서열 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36 및/또는 37의 서열을 포함하고, HVR H1, H2 및 H3 서열이 각각 서열 2, 4 및/또는 5인 것인, 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 프레임워크 서열이 서열 38, 39, 40 및/또는 41의 서열을 포함하고, HVR L1, L2 및 L3 서열이 각각 서열 6, 8 및/또는 12인 것인, 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 프레임워크 서열이 서열 42, 43, 44 및/또는 45의 서열을 포함하고, HVR H1, H2 및 H3 서열이 각각 서열 1, 3 및/또는 5인 것인, 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 프레임워크 서열이 서열 15, 16, 17 및/또는 18의 서열을 포함하고, HVR L1, L2 및 L3 서열이 각각 서열 6, 8 및/또는 10인 것인, 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 프레임워크 서열이 서열 42, 43, 47 및 45의 서열을 포함하고, HVR H1, H2 및 H3 서열이 각각 서열 1, 3 및/또는 5인 것인, 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 프레임워크 서열이 서열 15, 16, 47 및 18의 서열을 포함하고, HVR L1, L2 및 L3 서열이 각각 서열 7, 9 및/또는 11인 것인, 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 원하는 표적 결합 친화도를 얻기 위해 친화도 성숙된 것이다. 일례로, 본 발명의 친화도 성숙된 항체는 아미노산 위치 H29, H30, H31, H32, H52, H52a, H54, H56, L30, L31, L32, L33, L50, L53, L55, L89, L91, L92, L93, L94 및 L96 중 하나 이상에 치환을 포함한다. 일례로, 본 발명의 친화도 성숙된 항체는 하기 치환: (a) 중쇄에서, V29I, S30T, S31G, G32S, F52Y, H52aP, K54N 및 G56A, 또는 (b) 경쇄에서, S30D, T31S, A32S, V33L, S50A, F53N, Y55E, E89Q, T91S, D92Y, S93D 또는 T, T94N, 및 P96F 중 하나 이상을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 49의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 48의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 49의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열 48의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 51의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 50의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 51의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열 50의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 53의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 52의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 53의 서열을 포함하는 중쇄 가변 도메인 및 서열 52의 서열을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 EphrinB2에 대한 결합에 대하여 상기-언급한 항체들 중 어느 것과 경쟁하는 항체를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 EphrinB2 상의, 상기-언급한 항체들 중 어느 것과 동일하거나 유사한 에피토프에 결합하는 항체를 제공한다. 당업계에 공지되어 있는 바와 같이, 그리고 본원 하기에서 더욱 상세히 기술되는 바와 같이, 항체의 초가변 영역을 구분짓는 아미노산 위치/경계는 문맥상, 그리고 당업계에 공지된 다양한 정의 (하기 기술되는 바와 같은 정의)에 따라 달라질 수 있다. 가변 도메인 내의 일부 위치는 하나의 조건 세트하에서는 초가변 영역 영역내 존재하는 것으로 간주될 수 있지만, 다른 조건 세트하에서는 초가변 영역 밖에 존재하는 것으로 간주될 수 있다는 점에서 이는 하이브리드 초가변 위치로서 고찰될 수 있다. 이들 위치 중 하나 이상은 또한 확장된 초가변 영역 (하기에 추가로 정의됨)에서 발견될 수 있다. 일부 실시양태에서, 항체는 단일클론 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 다중클론 항체이다. 일부 실시양태에서, 항체는 키메라 항체, 친화도 성숙된 항체, 인간화된 항체, 및 인간 항체로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 항체는 항체 단편이다. 일부 실시양태에서, 항체는 Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, 또는 scFv이다. 하나의 실시양태에서, 항체는 키메라 항체, 예를 들어, 이종성의 비인간, 인간 또는 인간화된 서열 (예컨대, 프레임워크 및/또는 불변 도메인 서열)에 이식된 비인간 공여자로부터의 항원 결합 서열을 포함하는 항체이다. 하나의 실시양태에서, 비인간 공여자는 마우스이다. 하나의 실시양태에서, 항원 결합 서열은 합성, 예컨대, 돌연변이유발 (예: 파지 디스플레이 스크리닝 등)에 의해 수득된 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 키메라 항체는 뮤린 V 영역 및 인간 C 영역을 갖는다. 하나의 실시양태에서, 뮤린 경쇄 V 영역은 인간 카파 경쇄에 융합된다. 하나의 실시양태에서, 뮤린 중쇄 V 영역은 인간 IgG1 C 영역에 융합된다. 본 발명의 인간화된 항체는 FR에서의 아미노산 치환 및 이식된 CDR에서 변화를 갖는 친화도 성숙 변이체를 갖는 것들을 포함한다. CDR 또는 FR에서 치환된 아미노산은 공여자 또는 수용자 항체에 존재하는 것으로만 한정되는 것은 아니다. 다른 실시양태에서, 본 발명의 항체는 추가로 향상된 CDC 및/또는 ADCC 기능 및 B-세포 사멸을 포함한 개선된 효과기 기능을 일으키는 Fc 영역에서의 아미노산 잔기의 변화를 포함한다. 본 발명의 기타 항체는 안정성을 개선시키는 특이적 변화를 갖는 것들을 포함한다. 다른 실시양태에서, 본 발명의 항체는 예컨대, 감소된 CDC 및/또는 ADCC 기능 및/또는 감소된 B-세포 사멸과 같은 감소된 효과기 기능을 일으키는 Fc 영역에서의 아미노산 잔기의 변화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 자연 살해(NK) 세포 상의 인간 보체 인자 C1q 및/또는 인간 Fc 수용체에 대한 결합 감소 (예로서, 결합 부재)를 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 인간 FcγRI, FcγRIIA, 및/또는 FcγRIIIA에 대한 결합 감소 (예로서, 결합 부재)를 특징으로 한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 IgG 부류 (예컨대, IgGl 또는 IgG4)의 것이며, E233, L234, G236, D265, D270, N297, E318, K320, K322, A327, A330, P331 및/또는 P329 (EU 인덱스에 따른 넘버링)에 1개 이상의 돌연변이를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체가 돌연변이 L234A/L235A 또는 D265A/N297A를 포함한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 본원에서 제공되는 항원 결합 서열 중 임의의 것을 포함하며, EphrinB2에 특이적으로 결합하는 항-EphrinB2 폴리펩티드를 제공한다. 본 발명의 항체는 EphrinB2에 결합하고 (예로서, 특이적으로 결합하고), 일부 실시양태에서는, EphrinB2 활성화, EphrinB2 하류 분자 신호 전달, EphrinB2-결합 Eph 수용체 (예를 들어, EphB1, EphB2 및/또는 EphB3) 활성화, EphrinB2-결합 Eph 수용체 (예를 들어, EphB1, EphB2 및/또는 EphB3) 하류 분자 신호 전달, EphrinB2에 대한 EphrinB2-결합 Eph 수용체 (예를 들어, EphB1, EphB2 및/또는 EphB3) 결합의 파괴, EphrinB2 인산화 및/또는 EphrinB2 다량체화, 및/또는EphrinB2-결합 Eph 수용체 인산화, 및/또는 임의의 생물학적으로 관련된 EphrinB2 및/또는 EphrinB2-결합 Eph 수용체 (예를 들어, EphB1, EphB2 및/또는 EphB3) 생물학적 경로의 파괴, 및/또는 종양, 세포 증식 질병 또는 암 치료 및/또는 예방; 및/또는 EphrinB2 발현 및/또는 활성 (예로서, EphrinB2 발현 및/또는 활성의 증가)과 관련된 질병 치료 또는 예방을 포함하나, 이에 한정되지 않는, EphrinB2-관련 효과들 중 하나 이상의 측면을 조절할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 EphrinB2에 특이적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체가 EphrinB2 세포외 도메인(ECD)에 특이적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체가 EphrinB2 세포외 도메인으로 구성되거나, 본질적으로 구성된 폴리펩티드에 특이적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 항체가 약 30 pm 또는 그보다 강한 Kd로 EphrinB2에 특이적으로 결합한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 항체는 생체내 또는 시험관내에서 EphrinB2 활성을 감소, 억제 및/또는 차단시킨다. 일부 실시양태에서, 항체가 EphrinB2 자가인산화를 감소, 억제 및/또는 차단시킨다. 일부 실시양태에서, 항체가 EphrinB2-결합 Eph 수용체 (예를 들어, EphB1, EphB2 및/또는 EphB3)와의 결합에 대하여 경쟁한다 (감소시키고/거나 차단시킨다). 하나의 측면에서, 본 발명은 질병, 예로서, 암, 종양, 및/또는 세포 증식 질병 치료 요법용 및/또는 예방 요법용 약제의 제조에 있어 본 발명의 항체의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 질병은 신경병증 또는 신경퇴행성 질환이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 본 발명의 하나 이상의 항체 및 담체를 포함하는 조성물을 제공한다. 하나의 실시양태에서, 담체는 제약상 허용되는 것이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 본 발명의 항-EphrinB2 항체를 코딩하는 핵산을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 본 발명의 핵산을 포함하는 벡터를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 본 발명의 하나 이상의 핵산 및 담체를 포함하는 조성물을 제공한다. 하나의 실시양태에서, 담체는 제약상 허용되는 것이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 본 발명의 핵산 또는 벡터를 포함하는 숙주 세포를 제공한다. 벡터는 임의 유형, 예를 들어, 재조합 벡터, 예로서, 발현 벡터일 수 있다. 다양한 숙주 세포 중 임의의 것이 사용될 수 있다. 하나의 실시양태에서, 숙주 세포는 원핵 세포, 예를 들어, 이. 콜라이(E. coli)이다. 하나의 실시양태에서, 숙주 세포는 진핵 세포, 예를 들어, 포유동물 세포, 예로서, 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 본 발명의 항체를 제조하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 본 발명은 항체 (또는 그의 단편)를 코딩하는 본 발명의 재조합 벡터를 적합한 숙주 세포에서 발현시키고, 상기 항체를 회수하는 것을 포함하는, 항-EphrinB2 항체 (본원에서 정의된 바와 같이, 전장의 항체 및 그의 단편을 포함한다)를 제조하는 방법을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 용기; 및 용기 내에 함유된 조성물을 포함하며, 여기서 조성물은 하나 이상의 본 발명의 항-EphrinB2 항체를 포함하는 것인 제조 물품을 제공한다. 하나의 실시양태에서, 조성물은 본 발명의 핵산을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 항체를 포함하는 조성물은 추가로 담체를 포함하며, 이는 일부 실시양태에서는 제약상 허용되는 것이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 제조 물품은 추가로 대상체에게 조성물 (예컨대, 항체) 투여에 관한 설명서 (예로서, 본원에 기술된 임의 방법에 관한 설명서)를 포함한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 하나 이상의, 본 발명의 항-EphrinB2 항체를 포함하는 조성물을 포함하는 제1 용기; 및 완충액을 포함하는 제2 용기를 포함하는 키트를 제공한다. 하나의 실시양태에서, 완충액은 제약상 허용되는 것이다. 하나의 실시양태에서, 항체를 포함하는 조성물은 추가로 담체를 포함하며, 이는 일부 실시양태에서는 제약상 허용되는 것이다. 하나의 실시양태에서, 키트는 추가로 대상체에게 조성물 (예컨대, 항체) 투여에 관한 설명서를 포함한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 질병, 예로서, 암, 종양, 및/또는 세포 증식 질병 치료 요법용 및/또는 예방 요법용 약제의 제조에 있어 본 발명의 항-EphrinB2 항체의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 질병은 신경병증 또는 신경퇴행성 질환이다. 일부 실시양태에서, 질병은 혈관신생과 관련된 병적 상태이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 혈관신생 억제용 약제의 제조에 있어 본 발명의 항체의 용도를 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 질병, 예로서, 암, 종양, 및/또는 세포 증식 질병 치료 요법용 및/또는 예방 요법용 약제의 제조에 있어 본 발명의 핵산의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 질병은 신경병증 또는 신경퇴행성 질환이다. 일부 실시양태에서, 질병은 혈관신생과 관련된 병적 상태이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 질병, 예로서, 암, 종양, 및/또는 세포 증식 질병 치료 요법용 및/또는 예방 요법용 약제의 제조에 있어 본 발명의 발현 벡터의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 질병은 신경병증 또는 신경퇴행성 질환이다. 일부 실시양태에서, 질병은 혈관신생과 관련된 병적 상태이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 질병, 예로서, 암, 종양, 및/또는 세포 증식 질병 치료 요법용 및/또는 예방 요법용 약제의 제조에 있어 본 발명의 숙주 세포의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 질병은 신경병증 또는 신경퇴행성 질환이다. 일부 실시양태에서, 질병은 혈관신생과 관련된 병적 상태이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 질병, 예로서, 암, 종양, 및/또는 세포 증식 질병 치료 요법용 및/또는 예방 요법용 약제의 제조에 있어 본 발명의 제조 물품의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 질병은 신경병증 또는 신경퇴행성 질환이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 질병, 예로서, 암, 종양, 및/또는 세포 증식 질병 치료 요법용 및/또는 예방 요법용 약제의 제조에 있어 본 발명의 키트의 용도를 제공한다. 일부 실시양태에서, 질병은 신경병증 또는 신경퇴행성 질환이다. 일부 실시양태에서, 질병은 혈관신생과 관련된 병적 상태이다. 본 발명은 EphrinB2의 발현 및/또는 활성, 예로서, 증가 또는 감소된 발현 및/또는 활성, 또는 바람직하지 못한 발현 및/또는 활성과 관련된 질환 상태를 조정하는데 유용한 방법 및 조성물을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는, EphrinB2의 증가된 발현 및/또는 활성과 관련된 종양, 암, 및/또는 세포 증식 질병을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는, 세포 (예로서, 암 또는 종양 세포)를 사멸시키는 방법을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는, 종양 또는 암 성장을 감소, 억제, 차단 또는 방지하는 방법을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는, 신경병증 또는 신경퇴행성 질환을 치료 또는 예방하거나, 손상된 신경 세포를 수복시키는 방법을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는, 뉴런의 발생, 증식, 유지 또는 재생을 촉진시키는 방법을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는, 혈관신생을 억제시키는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 혈관신생 부위는 종양 또는 암이다. 하나의 측면에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는, 혈관신생과 관련된 병적 상태를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 혈관신생과 관련된 병적 상태는 종양, 암, 및/또는 세포 증식 질병이다. 일부 실시양태에서, 혈관신생과 관련된 병적 상태는 안구내 신생혈관 질환이다. 본 발명의 방법은 임의의 적합한 병적 상태에 영향을 주기 위해 사용될 수 있다. 예시적인 질병은 본원에 기술되어 있고, 소세포 폐암, 신경모세포종, 흑색종, 유방암종, 위암, 직장결장암(CRC), 및 간세포암종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법에서 표적화되는 세포는 암 세포이다. 예를 들어, 암 세포는 유방암 세포, 직장결장암 세포, 폐암 세포, 유두암종 세포, 결장암 세포, 췌장암 세포, 난소암 세포, 두경부암 세포, 중추신경계암 세포, 골육종 세포, 신장암종 세포, 간세포암종 세포, 방광암 세포, 위암종 세포, 두경부 편평세포암종 세포, 흑색종 세포, 백혈병 세포, 및 결장 샘종 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법에서 표적화되는 세포는 과증식성 및/또는 과다형성성 세포이다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 방법에서 표적화되는 세포는 이형성 세포이다. 추가의 또다른 실시양태에서, 본 발명의 방법에서 표적화되는 세포는 전이성 세포이다. 본 발명의 방법은 추가의 치료 단계를 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어, 하나의 실시양태에서, 하나의 방법은 표적화된 세포 및/또는 조직 (예컨대, 암 세포의 경우)을 방사선 요법 또는 화학요법제에 노출시키는 단계를 포함한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 유효량의 다른 치료제 (예로서, 항-혈관신생제)와 조합하여 유효량의 항-EphrinB2 항체를 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 항-EphrinB2 항체(들)는 각종 신생물성 또는 비-신생물성 상태를 치료하기 위하여 항암제 또는 항-혈관신생제와 조합되어 사용된다. 하나의 실시양태에서, 신생물성 또는 비-신생물성 상태는 혈관신생과 관련된 병적 상태이다. 일부 실시양태에서, 다른 치료제는 항-혈관신생제, 항-신생물성 제제, 및/또는 화학요법제이다. 항-EphrinB2 항체는 연속적으로 또는 동일한 조성물 또는 별개의 조성물로 상기 목적에 효과적인 다른 치료제와 조합하여 투여될 수 있다. 항-EphrinB2 항체 및 다른 치료제 (예컨대, 항암제, 항-혈관신생제)를 투여하는 것은 동일하거나 상이한 투여 경로를 사용함으로써 동시에 예컨대, 단일 조성물로서, 또는 2개 이상의 별개의 조성물로서 수행될 수 있다. 별법으로, 또는 추가로, 투여는 순차적으로 임의 순서대로 수행될 수 있다. 별법으로, 또는 추가로, 본 단계는 순차적으로 및 동시에, 이 둘 모두의 조합으로 임의 순서대로 실시될 수 있다. 특정 실시양태에서, 2개 이상의 조성물 투여 사이의 시간 간격은 몇 분 내지 몇 일부터 몇 주 내지 몇 개월 범위일 수 있다. 예를 들어, 먼저 항암제를 투여한 후에 항-EphrinB2 항체를 투여할 수 있다. 그러나, 동시에 투여할 수 있거나, 항-EphrinB2 항체를 먼저 투여하는 것도 고려된다. 따라서, 하나의 측면에서, 본 발명은 항-EphrinB2 항체를 투여한 후, 항-혈관신생제 (예로서, 항-VEGF 항체, 예로서, 베바시주맙)를 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 2개 이상의 조성물 투여 사이의 시간 간격은 몇 분 내지 몇 일부터 몇 주 내지 몇 개월 범위일 수 있다. 특정 측면에서, 본 발명은 유효량의 항-EphrinB2 항체 및/또는 혈관신생 억제제(들) 및 하나 이상의 화학요법제를 투여하여 질병 (예로서, 종양, 암, 및/또는 세포 증식 질병)을 치료하는 방법을 제공한다. 각종 화학요법제가 본 발명의 조합 치료법에 사용될 수 있다. 고려되는 화학요법제의 일례로는 비제한적인 화학요법제를 본원 하기의 "정의"에서 제공한다. 항-EphrinB2 항체 및 화학요법제를 투여하는 것은 동일하거나 상이한 투여 경로를 사용함으로써 동시에 예컨대, 단일 조성물로서, 또는 2개 이상의 별개의 조성물로서 수행될 수 있다. 별법으로, 또는 추가로, 투여는 순차적으로 임의 순서대로 수행될 수 있다. 별법으로, 또는 추가로, 본 단계는 순차적으로 및 동시에, 이 둘 모두의 조합으로 임의 순서대로 실시될 수 있다. 특정 실시양태에서, 2개 이상의 조성물 투여 사이의 시간 간격은 몇 분 내지 몇 일부터 몇 주 내지 몇 개월 범위일 수 있다. 예를 들어, 먼저 화학요법제를 투여한 후에 항-EphrinB2 항체를 투여할 수 있다. 그러나, 동시에 투여할 수 있거나, 항-EphrinB2 항체를 먼저 투여하는 것도 고려된다. 따라서, 하나의 측면에서, 본 발명은 항-EphrinB2 항체를 투여한 후, 화학요법제를 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 특정 실시양태에서, 2개 이상의 조성물 투여 사이의 시간 간격은 몇 분 내지 몇 일부터 몇 주 내지 몇 개월 범위일 수 있다. 하나의 측면에서, 본 발명은 대상체에게 유효량의 항-EphrinB2 항체를 항-혈관신생제와 조합하여 투여함으로써 항-혈관신생제 억제 활성을 증진시키는 것을 포함하는, 혈관신생과 관련된 병적 상태를 앓는 대상체에서 항-혈관신생제의 효능을 증진시키는 방법을 제공한다. 하나의 측면에서, 본 발명은 재발성 종양 성장 또는 재발성 암 세포 성장을 억제 또는 예방하기 위한 방법 및 조성물을 제공한다. 재발성 종양 성장 또는 재발성 암 세포 성장은 환자에게 하나 이상의 현재 이용가능한 요법 (예를 들면, 암 요법, 예컨대 화학요법, 방사선 요법, 수술, 호르몬 요법 및/또는 생물학적 요법/면역요법, 항-VEGF 항체 요법, 특히 특정 암에 대한 표준 요법 처방)을 시행하거나 또는 환자를 상기 요법으로 처치하는 조건이 환자를 치료하기에 임상적으로 적합하지 않거나 또는 환자가 더 이상 상기 요법으로부터 어떠한 유익한 효과도 얻지 못하여 이들 환자에게 추가로 효과적인 요법이 필요하게 되는 것을 설명하기 위해 사용된다. 또다른 측면에서, 본 발명은 샘플내 EphrinB2-항-EphrinB2 항체 복합체를 검출하는 것을 포함하는, EphrinB2 검출 방법을 제공한다. 본원에서 사용되는 바, "검출"이라는 용어는 대조군과 관련되거나, 대조군과 무관한 정성적 및/또는 정량적 검출 (수준 측정)을 포함한다. 또다른 측면에서, 본 발명은 질병을 앓고 있거나, 앓을 것으로 의심되는 환자로부터 얻은 생물학적 샘플 내에서 EphrinB2-항-EphrinB2 항체 복합체를 검출하는 것을 포함하는, EphrinB2 발현 및/또는 활성과 관련된 질병을 진단하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, EphrinB2 발현은 증가된 발현이거나 비정상적인 발현이다. 일부 실시양태에서, 질병은 종양, 암, 및/또는 세포 증식 질병이다. 또다른 측면에서, 본 발명은 검출가능한 표지를 포함하는, 본원에 기술된 임의의 항-EphrinB2 항체를 제공한다. 또다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기술된 임의의 항-EphrinB2 항체와 EphrinB2의 복합체를 제공한다. 일부 실시양태에서, 복합체는 생체내 또는 시험관내 존재한다. 일부 실시양태에서, 본 복합체는 암 세포를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항-EphrinB2 항체는 검출가능하게 표지된다.