ＴＬＲ７ 및 ＴＬＲ８에 대한 안정화된 면역 조절성 ＲＮＡ〔ＳＩＭＲＡ〕 화합물 document_id A220623067128

면역 반응은 반응에 관여되는 세포의 서브셋(subset)에 근거하여 선천성 반응 및 후천성 반응 둘 모두를 포함한다. 예를 들어, 지연 타입 과민반응 및 세포독성 T 림프구(CTL)의 활성화와 같은 전통적인 세포 매개 기능에 관련된 T 헬퍼(Th) 세포는 Th1 세포인 반면, B-세포 활성화에 대해 헬퍼 세포로서 관련된 Th 세포는 Th2 세포이다. 면역 반응의 타입은 항원 노출에 대한 반응으로 생성된 사이토카인(cytokine) 및 케모카인(chemokine)에 의해 영향받는다. 사이토카인은 T 헬퍼 1(Th1) 및 T 헬퍼 2(Th2) 세포의 균형을 맞춤으로써 면역 반응을 조절하기 위한 수단을 제공하며, 이는 일어나는 면역 반응의 방법에 직접적인 영향을 준다. 상기 균형이 보다 많은 수의 Th1 세포 쪽으로 치우치면, 세포 매개된 면역 반응이 일어나고, 이것은 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 포함한다. 상기 균형이 보다 많은 수의 Th2 세포로 치우치면, 체액 또는 항체 면역 반응이 일어난다. 각각의 이러한 면역 반응은 상이한 일련의 사이토카인이 Th1 및 Th2 세포로부터 분비되게 한다. Th1 및 Th2 세포에 의해 분비된 사이토카인에서의 차이는 이들 두 서브셋의 상이한 생물학적 기능의 결과일 수 있다. Th1 세포는 항원에 대한 신체 고유의 반응(예를 들어, 바이러스 감염, 세포내 병원균 및 종양 세포)에 관여한다. 항원에 대한 초기 반응은 항원 제시 세포(예를 들어, 활성화된 마크로파지 및 수상돌기 세포)로부터의 IL-12의 분비 및 이에 수반되는 Th1 세포의 활성화일 수 있다. Th1 세포의 활성화 결과는 특정 사이토카인(예를 들어, IL-2, IFN-감마 및 그 밖의 사이토카인)의 분비 및 수반되는 항원 특이적 CTL의 활성화이다. Th2 세포는 박테리아, 기생충, 항원 및 알레르겐에 반응하여 활성화되는 것으로 공지되어 있으며, 특정 사이토카인(예를 들어, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10, IL-13 및 그 밖의 사이토카인) 및 케모카인의 분비를 통해 신체의 후천성 면역 반응(예를 들어, IgE 생성 및 호산구 활성화)을 매개할 수 있다. 이러한 특정 사이토카인의 분비는 B-세포 증식과 항체 생성 증가를 유도할 수 있다. 또한, 이러한 특정 사이토카인은 그 밖의 사이토카인의 방출을 촉진하거나 억제할 수 있다(예를 들어, IL-10은 Th1 세포로부터 IFN-γ 분비를 억제하고, 수상돌기 세포로부터 IL-12 분비를 억제한다). 궁극적으로, 선택된 자극에 반응하여 방출되는 사이토카인 및 케모카인과 Th1 및 Th2 세포 간의 균형은 신체의 면역 시스템이 질병에 대해 반응하는 방법에 있어서 중요한 역할을 한다. 예를 들어, IFN-α는 C형 간염을 억제할수 있고, MIP-1α 및 MIP-1β(또한, 각각 CCL3 및 CCL4로서 공지되어 있음)은 HTV-1 감염을 억제할 수 있다. Th1/Th2 면역 반응의 적합한 균형이 면역 시스템을 사용할 기회를 제공하여 다양한 질병을 치료하고 예방한다. Th1 면역 반응은 예를 들어, 박테리아 또는 합성 DNA 함유 비메틸화 CpG 디누클레오티드의 도입에 의해 포유동물에서 유도될 수 있으며, 이러한 면역 반응은 패턴 인식 수용체(PRR)로서 공지된 특정 면역 세포에 대한 수용체에 특이적인 올리고누클레오티드 서열(예를 들어, 비메틸화 CpG)를 제공하는 것으로부터 기인된다. 이러한 특정 PRR이 톨형 수용체(TLR)이다. 톨형 수용체(TLRs)는 미생물 감염에 반응하여 선천성 면역 반응을 유도함에 있어서 긴밀하게 관여된다. 척추동물에 있어서, 톨형 수용체로 불리우는 10개 단백질의 패밀리(TLRl 내지 TLRl0)는 병원균 관련된 분자 패턴을 인식하는 것으로 공지되어 있다. 상기 10개 중, TLR3, 7, 8, 및 9는 세포 내측 엔도솜(endosome)에 편재되어, 핵산(DNA 및 RNA) 및 소분자, 예컨대, 누클레오시드 및 핵산 대사물질을 인식하는 것으로 공지되어 있다. TLR3 및 TLR9은 바이러스 및 박테리아, 및 합성 DNA에 각각 존재하는 dsRNA 및 비메틸화된 CpG 디누클레오티드와 같은 핵산을 인식하는 것으로 공지되어 있다. 박테리아 DNA는 면역 시스템 및 항종양 활성을 활성화시키는 것으로 나타나 있다[참조: Tokunaga T et al., J. Natl. Cancer Inst. (1984) 72:955-962; Shimada S, et al., Jpn. H cancer Res, 1986, 77, 808-816; Yamamoto S, et al., Jpn. J. Cancer Res., 1986, 79, 866-73; Messina, J, et al., J. Immunolo. (1991) 147:1759-1764]. CpG 디누클레오티드를 함유하는 안티센스 올리고누클레오티드를 사용하는 다른 연구에서는 면역 반응의 촉진화를 보여주었다[참조: Zhao Q, et al., Biochem.Pharmacol. 1996, 26, 173-82]. 이후, 연구에서는, TLR9이 박테리아 및 합성 DNA에 존재하는 비메틸화 CpG 모티브(motif)를 인식하는 것으로 나타났다[참조: Hemmi H, et al., Nature. (2000) 408:740-5]. 또한, CpG 함유 포스포로티오에이트 올리고누클레오티드의 또 다른 변형은 TLR9를 통한 면역 반응의 조절제로서 작용하는 능력에 영향을 미칠 수 있다[참조예: Zhao et al, Biochem. Pharmacol. (1996) 51:173-182; Zhao et al, Biochem Pharmacol. (1996) 52:1537-1544; Zhao et al., Antisense Nucleic Acid Drug Dev. (1997) 7:495-502; Zhao et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. (1999) 9:3453-3458; Zhao et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. (2000) 10:1051-1054; Yu et al, Bioorg. Med. Chem. Lett. (2000) 10:2585-2588; Yu etal, Bioorg. Med. Chem. Lett. (2001) 11:2263-2267; and Kandimalla et al, Bioorg. Med. Chem. (2001) 9:807-813]. 또한, 구조 활성 관련성 연구에서는 비메틸화 CpG 디누클레오티드로부터 초래되는 것들과는 차별되는 특이적 면역 반응 프로파일을 유도하는 신규한 DNA 기재 작제물 및 합성 모티브를 확인하였다[참조: Kandimalla ER, et al, Proc Natl Acad Sci USA. (2005) 102:6925-30, Kandimalla ER, et al., Proc Natl Acad Sci USA. (2003) 100:14303-8. Cong YP, et al., Biochem Biophys Res Commun. (2003) 310:1133-9. Kandimalla ER, et al., Biochem Biophys Res Commun. (2003) 306:948-53. Kandimalla ER, et al., Nucleic Acids Res. (2003) 31:2393-400. Yu D, et al., Bioorg Med Chem. (2003) 11:459-64. Bhagat L, et al., Biochem Biophys Res Commun. (2003) 300:853-61. Yu D, et al., Nucleic Acids Res. (2002) 30:4460-9. Yu D, et al., J Med Chem. (2002) 45:4540-8. YuD, et al., Biochem Biophys Res Commun. (2002) 297:83-90. Kandimalla ER, et al., Bioconjug Chem. (2002) 13:966-74. Yu D, K et al., Nucleic Acids Res. (2002) 30:1613-9. Yu D, et al., Bioorg Med Chem. (2001) 9:2803-8. Yu D, et al., Bioorg Med Chem Lett. (2001) 11:2263-7. Kandimalla ER, et al., Bioorg Med Chem. ( 2001) 9:807-13. Yu D, et al., Bioorg Med Chem Lett. (2000) 10:2585-8, Putta MR, et al., Nucleic Acids Res. (2006) 34:3231-8]. 그러나, 최근까지, TLR7 및 TLR8에 대한 천연 리간드는 공지되어 있지 않다. TLR 7 및 8은 바이러스 및 합성 단일 가닥 RNA, 및 다수의 누클레오티드를 포함하는 소분자를 인식하는 것으로 나타났다[참조: Diebold, S.S., et al. Science v: 303, 1529-1531 (2004)]. 디볼드(Diebold) 등의 문헌(Science, v303: 1529-1531 (2004))에서는 인플루엔자 바이러스에 대한 IFN-α반응이 인플루엔자 게놈 RNA의 엔도솜 인식 및 TLR7 및 MyD88에 의한 시그널화를 필요로 한다는 것을 나타내고 있으며, TLR7에 대한 리간드로서 ssRNA를 확인하였다. 인간에 있어서, ssRNA는 TLR7에 의해서가 아니라 TLR8에 의해서 인식되는 반면, 뮤린 TLR7은 ssRNA 을 인식할 수 있다[참조: Lund JM, et al. Proc Natl Acad Sci USA. 2004 Apr 13; 101(15):5598- 603; Heil F. et al. Science. 2004; 303: l526-9; Diebold SS, et al., Science. 2004; 30:1529-31; Triantafilou K, et al, Eur J Immunol. 2005 Aug; 35(8):2416-23]. 특정 합성 화합물인, 이미다조퀴놀론 이미퀴모드(imidazoquinolones imiquimod) (R-837) 및 레시퀴노드(resiquimod) (R-848)가 TLR7 및 TLR8의 리간드이다[참조: Hemmi H et al., (2002) Nat Immunol 3:196-200; Jurk M et al, (2002) Nat Immunol 3:499]. 또한, 특정 구아노신 유사체, 예컨대, 7-데아자-G, 7-티아-8-옥소-G (TOG), 및 7-알릴-8-옥소-G (록소리빈(loxoribine))은 높은 농도에서 TLR7를 활성화시키는 것으로 나타났다[참조: Lee J et al., Proc Natl Acad Sci USA. 2003, 100:6646-51]. 그러나, 이러한 소분자, 예를 들어, 이미퀴모드는 또한 다른 수용체를 통해 작용하는 것으로 공지되어 있다[참조: Schon MP, et al., J. Invest Dermatol., 2006, 126, 1338-47]. TLR7 또는 TLR8 인식을 위한 임의의 공지된 특이적 ssRNA 모티프의 결여 및 가능하게는 넓은 범위의 자극성 ssRNA 분자는, TLR7 및 TLR8이 자가 및 바이러스 RNA 둘 모두를 인식할 수 있음을 시사한다. 최근에는, 특정 GU-풍부 올리고리보누클레오티드가 N-[l-(2,3-디올레오일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸암모늄에틸설페이트 (DOTAP) 또는 그 밖의 지질 제제로 착화된 경우, 면역자극성이고, TLR7 및 TLR8를 통해 작용하는 것으로 나타났다[참조:Heil et al. Science, 303: 1526-1529 (2004); Lipford et al. WO03/086280; Wagner et al. WO98/32462]. 그러나, RNA 분자는 오랫동안, 예를 들어, 리보자임 및 siRNA로서 사용되었고, 리보자임 및 siRNA로서 사용된 RNA는 GU 디누클레오티드를 함유한다. 또한, 다수의 이러한 RNA 분자는 지질의 존재 하에서 TLR 자극을 통해 면역 반응을 일으키는 것으로 나타났다[참조: Kariko et al., Immunity (2005) 23: 165-75; Ma Z et al., Biochem Biophys Res Commun., (2005) 330, 755-9]. 그러나, 이러한 RNA 분자의 불안정성이 많은 분야에서 이러한 분자를 사용하고 적용함에 있어서의 발전을 방해한다. 리보오스 또는 데옥시리보오스 당을 함유하는 올리고누클레오티드 및 올리고데옥시누클레오티드는 진단적 프로빙, PCR 프라이밍, 유전자 발현의 안티센스 억제, siRNA, 아프타머(aptamer), 리보자임, 및 톨형 수용체(TLR)에 기초한 면역치료제를 포함하나, 이로 제한되는 것은 아닌, 광범위한 분야에서 사용되어 왔다. 보다 최근에, 많은 문헌에서는, 단독 사용을 위한 면역 조절제로서 또는 애주번트로서 알레르기, 천식, 자가면역성, 암 및 감염성 질환과 같은 많은 질병에 대한 면역치료 적용에서 올리고데옥시누클레오티드의 용도를 입증하였다. DAN 올리고누클레오티드가 TLR9에 의해 인식되고, RNA 올리고누클레오티드가 TLR7 및/또는 TLR8에 의해 인식된다는 사실은 DNA와 RNA 간의 구조적 형태에서의 차이에 의한 것으로 보인다. 그러나, DNA와 RNA 간의 화학적 차이가 또한 DNA가 RNA보다 훨씬 더 화학적으로, 그리고 효소적으로 안정하게 한다. RNA는 거의 존재하지 않거나, 존재할 경우 자가-ssRNA가 항원 제공 세포에 도달하도록 보장하는, 편재하는 세포외 리보누클레아제(RNAse)에 의해 급격히 분해된다. 핵산의 엑소누클레아제 분해는 3'-누클레아제 분해가 우세하며, 작은 비율의 5'-엑소누클레아제 작용을 갖는다. 엑소누클레아제 분해작용 이외에, RNA는 또한 RNAse의 엔도누클레아제 활성에 의해 분해될 수 있다. RNA-기재 분자는 지금 까지는 지질과 착화되어서 누클레아제 안정성을 제공하였다. 그러나, 자가면역 반응성을 억제하는 본질적 기능을 제공하면서, 이러한 리보누클레아제는 또한 이들이 합성 및 천연 ssRNA 둘 모두를 신속하게 분해시킬 것이기 때문에 면역치료를 위해 이용하고자 계획된 임의의 합성 ssRNA에 대해 상당한 문제점을 제공한다. 이러한 장애를 극복하기 위해, ssRNA 분자를 분해로부터 보호하는 것이, 리포좀에서 ssRNA를 캡슐화시키고, 이것을 폴리에틸렌이민과 축합시키거나, 이를 N-[1 -(2,3 디올레오일옥시)-프로필]-N,N,N-트리메틸아미노늄 메틸-설페이트(DOTAP)와 같은 분자에 착화시킴으로써 시도되었다. 그러나, 이러한 보호 조치는 여전히 불안정한 ssRNA에 적용되는 2차적인 조치이며, ssRNA(천연 또는 합성)의 생체내 효능 및 면역 조절 활성에 대한 이러한 보호 조치에 대한 효과는 여전히 불명료하다. 따라서, 네이키드(naked) RNA가 TLR7 및/또는 TLR 8에 대한 리간드로서 지속적으로 인식되도록 RNA를 유지하면서, 생체내 유용한 분자가 될 수 있도록 그 안정성을 개선시키는 것이 문제로 남아있다. 이상적으로, 이러한 문제는 새로운 면역치료제로서 작용할 수 있는 본래 안정한 RNA 기재 분자의 설계를 통해 해결될 수 있는 데, 이는 많은 임상적으로 관련된 응용, 예컨대, 동시 투여되는 경우에 백신접종의 효과를 개선시키거나, 면역 반응을 유발시키거나, 증진시키는 경우가 유리한 질병, 예를 들어, 암, 자가면역 질환, 기도 염증, 염증성 질환, 감염성 질환, 피부 질환, 알레르기, 천식 또는 병원균에 의한 질병을 치료 및/또는 예방하는 것에서의 용도를 발견할 것이다. 발명의 요약 제 1 양태에서, 본 발명은 하기 추가로 규정된 신규한 부류의 안정화된 면역 조절성 RNA ("SIMRA") 화합물 및 면역 반응을 유도하고/거나 증가시키는 이의 사용 방법을 제공함으로써 상기 요구를 충족시킨다. 본 발명에 따른 신규한 화학 물질은 면역 반응 유도에 실질적으로 더욱 효과적이며, 분해에 실질적으로 덜 민감한, 면역 반응 유도 및/또는 증강 화합물을 제공한다. 본 발명에 따른 방법은 면역치료 적용에 SIMRA에 의해 생성된 사이토카인 프로파일을 변형시킬 수 있다. 제 1 양태의 구체예에서, 본 발명은 TLR8에 대한 효능제 (agonist)로서 SIMRA 화합물을 제공한다. 제 1 양태의 추가의 구체예에서, 본 발명은, TLR7 및 TLR8에 대한 효능제로서 SIMRA 화합물을 제공한다. 제 1 양태의 추가의 구체예에서, 본 발명은 TLR7에 대한 효능제로서 SIMRA 화합물을 제공한다. 제 1 양태의 추가의 구체예에서, 본 발명은 애주번트로서 SIMRA 화합물을 제공한다. 제 2 양태에서, 본 발명은 약제 조성물을 제공한다. 이들 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체 및 본 발명의 처음 세 양태에 기술된 조성물중 어느 하나를 포함한다. 제 3 양태에서, 본 발명은 약제학적 유효량의 본 발명에 따른 SIMRA 화합물을 척추동물에 투여하는 것을 포함하여, 척추동물에서 면역반응을 유도하기 위한 방법을 제공한다. 제 4 양태에서, 본 발명은 면역 반응 유도 및/또는 증강이 이로운 질환 또는 질병 예를 들어, 암, 자가면역 질환, 기도 염증, 염증 질환, 감염 질환, 피부 질환, 알레르기, 천식 또는 병원균에 의해 초래된 질환을 갖는 척추동물을 치료학적으로 치료하는 방법으로서, 이러한 질환 또는 질병에 걸린 환자에 약제학적 유효량의 본 발명에 따른 SIMRA 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 제 5 양태에서, 본 발명은 척추동물에서 면역 반응 유도 및/또는 증강이 이로운 질환 또는 질병 예를 들어, 암, 자가면역 질환, 기도 염증, 염증 질환, 감염 질환, 피부 질환, 알레르기, 천식 또는 병원균에 의해 초래된 질환을 예방하는 방법으로서, 이러한 질환 또는 질병에 걸리기 쉬운 척추동물에 약제학적 유효량의 본 발명에 따른 SIMRA 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 제 6 양태에서, 본 발명은 사이토카인 또는 케모카인 (예를 들어, 면역 세포, PBMC)를 생성할 수 있는 세포를 분리하고, 이러한 세포를 표준 세포 배양 조건하에서 배양하고, 생체외에서 이러한 세포를 SIMRA로 처리하여 분리된 세포가 증가된 수준의 사이토카인 또는 케모카인을 생성하거나 분비하도록 하고, 처리된 세포를 질환의 예방 또는 치료를 위해 사이토카인 또는 케모카인 치료가 필요한 환자에 투여하는 방법을 제공한다. 도면의 간단한 설명 도 1은 본 발명의 SIMRA 화합물의 직렬 합성을 위한 합성 개략도이다. DMTr = 4,4'-디메톡시트리틸; CE = 시아노에틸. 도 2는 본 발명의 SIMRA 화합물의 평행 합성을 위한 개략도이다. DMTr = 4,4'-디메톡시트리틸; CE = 시아노에틸. 도 3은 본 발명의 SIMRA 화합물의 직렬 합성에 적합한 대표적인 알킬 링커의 그룹을 나타낸다. 도 4는 본 발명의 SIMRA 화합물의 평행 합성에 적합한 대표적인 소분자 링커의 그룹을 나타낸다. 도 5A는 천연 포스포디에스테르 RNA 20-머가 1% 인간 혈청중에 10분 미만에서 완전히 분해됨을 보여준다. 도 5B는 동일한 서열의 포스포로티오에이트 백본 변형된 RNA가 동일한 조건하에 비교적 안정적이며, 약 50%의 고유의 올리고가 10분 말기에도 존재함을 보여준다. 도 5C는 3'-말단을 통해 부착된 두개의 포스포로티오에이트 백본 변형된 RNA가 더욱 안정적이며, 고유 RNA의 약 78% 이상이 10분 후에도 유지됨을 보여주며, 이는 누클레아제 분해에 대한 분자의 증가된 안정성을 나타낸다. 도 5D는 3'-3'-결합된 포스포로티오에이트 백본 변형된 RNA의 5'-말단에 링커 또는 캡을 부착하면 5'-링커 또는 캡이 없는 RNA와 비교하여 안정도를 완만하게 증가함을 보여주며, 이는 주요 분해가 3'-말단에서 발생함을 나타낸다. 도 5E는 본 발명의 추가적인 포스포로티오에이트 백본 변형된 면역 조절성 화합물의 안정도를 나타낸다. 도 6은 ELISA에 의해 측정된, 본 발명의 SIMRA 화합물의 피하 투여 후 2시간에 C57BL/6 마우스로부터의 혈청중의 IL-12 수준을 나타내며, 이는 SIMRA 화합물 (예를 들어, SEQ ID NO 11)이 생체내에서 IL-12 분비를 유도할 수 있음을 입증한다. 도 7은 본 발명의 SIMRA 화합물 100mg/kg 투여량으로 투여된 마우스로부터의 혈청중의 사이토카인 프로파일을 나타내며, 이는 SIMRA 화합물 (예를 들어, SEQ ID NO 11)이 생체내 투여 후 사이토카인 생성을 유도함을 입증한다. 도 8A 및 8B는 본 발명의 SIMRA 화합물로 처리된 인간 PBMC로부터의 사이토카인/케모카인 프로파일을 나타내며, 이는 SIMRA 화합물 (예를 들어, SEQ ID NO 11)이 인간 PBMC에서 사이토카인 분비를 유도함을 보여준다. 도 9는 본 발명의 SIMRA 투여 후 4시간에 종양 세포 주입된 마우스에서 ELISA에 의해 측정된 혈청 IL-12 농도를 나타내며, 이는 종양 함유 포유동물에 SIMRA 화합물 투여 후 IL-12의 양이 증가됨을 보여준다. 도 10은 본 발명의 SIMRA 화합물 투여 후 마우스 종양 모델에서 종양 결절의 수를 나타내며, 이는 SIMRA 화합물이 생체내 투여 후 종양 결절의 수를 감소시킴을 보여준다. 도 11A 내지 11D는 본 발명의 SIMRA 화합물로 처리된 인간 PBMC 및 pDC로부터의 사이토카인/케모카인 프로파일을 나타낸다. 도 11A 내지 11D는 SIMRA 화합물이 록소리빈 또는 7-데아자-G 보다 더욱 견고하고 구별되는 사이토카인/케모카인 프로파일을 유도함을 보여준다. 도 11A 내지 11D는 추가로 SIMRA 화합물의 백본, 링커, 결합 및/또는 캡에 대한 변형이 독특하고 별개의 사이토카인/케모카인 프로파일을 생성하는 SIMAR를 초래한다는 것을 보여준다. 도 12는 SIMRA 화합물의 투여 후 24시간에 시아노몰구스 원숭이에서 혈액 프로파일에서의 변화를 나타내며, 이는 SIMRA 화합물이 선택된 면역 세포에서 효과를 유도할 수 있음을 보여준다. 도 13A 및 13B는 SIMRA 화합물 투여 후 24시간에 ELISA에 의해 측정된 시아노몰구스 원숭이에서 혈장 사이토카인/케모카인 농도를 나타내며, 이는 SIMRA 화합물 (예를 들어, SEQ ID NO 11 및 30)이 생체내에서 사이토카인/케모카인 프로파일에 영향을 끼칠 수 있음을 보여준다. 도 14는 0시간과 비교하여 투여 후 24시간에 유세포 분류기에 의해 측정된, 시아노몰구스 원숭이에서 T-조절 세포 수, 총 T-세포 수, 단핵구 수, NK 세포 수 및 B-세포 수에서의 변화를 나타내며, 이는 SIMRA 화합물이 생체내 면역 반응 조절에 효과적임을 보여준다. 더욱 특히, 이들 데이타는 SIMRA 화합물이 선택된 면역 세포에 대한 효과를 유도할 수 있음을 보여준다. 도 15는 유세포 분류기에 의해 측정된, 0시간과 비교하여 투여 후 24시간에 시아노몰구스 원숭이에서 면역 세포에 대한 활성 마커 CD69의 변화를 나타낸다. 도 15는 SIMRA 화합물이 생체내에서 상이한 면역 세포 군집을 활성화시키는데 효과적임을 보여준다. 더욱 특히, 이들 데이타는 SIMRA 화합물이 선택된 면역 세포에 대한 효과를 유도할 수 있음을 보여준다.