전강 난포-유래 배아 줄기 세포 document_id A220623067672

난소에는 수 많은 전강(원시, 제1차 및 제2차) 난포가 존재하지만, 일반적으로 인생 동안 오직 1% 미만의 난포가 수정 부위로 성숙 난모 세포를 방출할 수 있는 성숙(Graafian) 난포로 발전한다[1]. 나머지 난포는 난소 조직에서 “발생적으로 휴면상태”로 남아있고 최종적으로 아폽토시스(apoptosis)를 통하여 퇴화된다. 동물 생명공학 분야에서는 생식력을 증가시키기 위하여 전강 난포를 최근 10년간 이용해 왔다. 결과적으로, In vitro-배양 제2차 난포로 부터 유래한 난포 난모세포는 IVF 및 배양에 따라 배반포로 발전하였으며, 이식 후 배아의 만기까지의 발달은 C57BL6 x CBA의 F1 마우스에서 이루어졌다[2, 3]. 한편, 배아 줄기(ES) 세포의 인 비트로 조작에 의한 착상 전 배아를 생산하는 놀라운 성과가 최근 발표되었다[4]. 그 결과, 새로운 의학 기술을 발전시키는데 있어서 추가적인 전강 난포 배양의 적용이 제시되었다. 그럼에도 불구하고, 전강 난포 배양에 있어 기초적인 정보는 아직까지 보고되지 않고 있으며 난포 조작에 대한 표준 프로토콜을 확립하지 못하고 있다. 게다가, 미성숙 난포 배양 기술의 가능성 여부는 다른 계통 및 종에 있어서 검증되어야 하며 표준 방법의 개발은 임상전 모델 연구와 새로운 생명공학기술의 임상 적용에 있어 매우 필수적이다. 발생 능력이 있는 난모 세포의 많은 양을 획득하기 위하여 미성숙 난포의 도입은 새로운 의학 생명공학기술을 발달시키는 것뿐 만아니라 가축의 생식적 효율을 향상시키기 위하여 고려되고 있다. Eppig와 그의 연구진들[2, 21]은 인 비트로 배양된 말기의 제2차 난포로 부터 유래한 난모 세포를 인 비트로 수정한 후 정상 출산을 하는데 최초로 성공하였다. 전강 난포의 배양 프로토콜을 최적화하는데 몇 차례 시도가 있었으며, 예를 들면, 최근 마이크로비드(microbead)와 3차원 배양 시스템을 테스트 하였다[5, 22, 23]. 게다가, 비-인간 영장류의 배아 줄기 세포는 인 비트로 성숙된 난모세포의 단위생식 활성화 후 유도되었으며, 또한 전강 난포에 대한 냉동 보존 시스템을 개발하기 위한 노력을 하고 있다. 그러나, 인 비트로 배양된 전강 난포 배아 줄기 세포를 만들기 위한 시도는 실패하였다. 본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.